RFDD-PCR技术用于构建证的相关基因表达谱初探

目的　运用限制性酶切片段差异显示 (RFDD -PCR)技术初步筛选支气管哮喘肾虚证的相关基因 ,以冀探讨构建中医证的相关基因表达谱的一种研究方法。方法　应用RFDD -PCR技术 ,收集支气管哮喘肾虚证患者治疗前后外周血 ,分离其总RNA ,进行DNaseI处理、合成双链cDNA、TaqI限切酶酶切、在其两端连上接头、特异配对于接头的引物来降落PCR扩增、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、AgNO3 染色、回收差异条带并重新PCR扩增、反向斑点杂交、测序、生物信息学分析。结果　共找到 36条差异条带 ,其中 2 5条能用斑点杂交验证 ,选取 3条测序 ,结果与基因库比较未发现同源序列。结论　 3条基因片段可能是与支气管哮喘肾虚证相关的新基因 ;RFDD -PCR技术不失为构建中医证的相关基因表达谱的一种好方法。     

肺性脑病的预防和辨证施护

肺性脑病是因气道、肺、胸疾病引起的CO2潴留和缺氧所致的，以中枢神经系统功能紊乱为主要表现的综合病症。肺性脑病是肺心病最常发生且最严重的并发症，晚期病死率达60％。近年来，由于对并发症及危重患者有了较成熟的预防护理措施，病死率已逐渐下降，做好积极的预防和护理措施是非常重要的。     

IgA肾病中西医研究近况

近20a来，随着肾组织活检的推广，IgA肾病越来越受到肾科学者的重视。因为它不但是最常见的原发性肾小球疾病，又是导致慢性终末期肾功能衰竭的最主要原发性肾病。因此，研究IgA肾病成了当今中西医学者的热门话题。笔者现将近年来IgA肾病中西医主要认识综述如下。     

2.2.15细胞生长规律的探讨及在药物筛选中应用

目的　探讨 2 .2 .15细胞生长及其分泌HBsAg和HBeAg的规律以及在药物筛选中的应用。方法　利用HBV的体外细胞培养系统 (2 .2 .15细胞系 )建立抗HBV药物筛选的实验技术常规 ,对 2 .2 .15细胞及其分泌HBsAg和HBeAg的特性进行初步观察 ,并在此基础上对几种药物体外抗HBV活性进行研究。结果　选择每孔接种 0 .1mL浓度为 3× 10 8L-1的 2 .2 .15细胞培养至 8～ 12d为细胞指数生长期 ,滴板后第 1天上清中HBsAg和HBeAg均阳性 ,第 12天达高峰且含量最高。药物阿特福韦二吡呋酯、鞣花鞣质、无环鸟苷、α -干扰素对细胞的半数毒性浓度分别为 0 .6 7M ,0 .4 9g/L ,0 .75g/L ,>10× 10 8IU/L ,对病毒HBsAg和HBeAg的治疗指数 (TI)分别为 2 79,4 .4 7;2 7.2 2 ,5 .4 4 ;1,1;1,1。结论　 2 .2 .15细胞抗HBV药物筛选以 3× 10 8L-1/孔培养至 12d作为常规方法较为合适。阿特福韦二吡呋酯、鞣花鞣质均有显著体外抗病毒作用 ,可以作为阳性药物对照。     

益肾通方对大鼠前列腺增生模型的影响

目的:通过动物实验,探讨补气益肾祛瘀法治疗良性前列腺增生症的机理。方法:建立去势大鼠前列腺增生模型,随机分为造模组、治疗组、对照组3组,分别以0.9％NS、益肾通方、通尿灵溶解液灌胃,比较3组前列朦重量、前列腺指数及光镜下结构变化。结果:各指标组间比较,造模组与治疗组、对照组差异有显著性或非常显著性意义(P<0.05,P<0.01);治疗组与对照组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。结论:依据补气益肾祛瘀的制方原则配伍的益肾通方,有一定抗炎、抑制腺上皮增生的作用。     

中医药抗中晚期胰腺癌血行播散机制初探

目的：探讨中西医结合辨证施治抗中晚期胰腺癌血行转移的可能机制。方法：收集212例中晚期胰腺癌患者．根据中西医结合辨证施治原则，分为湿热毒邪型、瘀积气滞型、脾虚湿热型、正虚邪实型，用免疫组化、血清学方法检测治疗前后血液游离癌细胞、血清CA19—9．CA125、CEA的变化，同时比较不同方法检测阳性率的差别。结果：中晚期胰腺癌治疗前血液游离癌细胞阳性率高达85％，治疗后明显降低62.7％，4种检测方法中CAl9—9免疫组化法阳性率最高，其次为CA125、常规病理HE染色，CEA免疫组化法较低。治疗前后血清CA19-9、CA125、CEA阳性率变化不大。结论：中西医结合辨证施治可以明显降低中晚期胰腺癌患者血液游离癌细胞阳性率．通过多途径、多靶点发挥抗肿瘤作用，多学科综合治疗是提高中晚期胰腺癌疗效的有效途径。     

HPLC法测定神昌丸中β-细辛醚的含量

目的 :测定神昌丸中 β 细辛醚的含量。方法 :色谱条件 :HypersilDivisionODSC1 8分析柱 (1 5 0mm× 4 6mm ,5 μm) ,流动相为甲醇 水 (6∶4 ) ,1 0 0 0ml中加入磷酸二氢钾 1 4g ,十二烷基磺酸钠 1 2g ,检测波长 2 5 7nm ,流速 1 0ml/min室温操作。结果 :β 细辛醚平均回收率为 99 0 2 % (RSD =1 6 2 % )。结论 :方法快速准确 ,样品处理简便易行。     

人RANTES基因在转基因青蒿植株中表达的测定

目的 为了增强青蒿的特异药理活性，探讨人β-趋化因子RANTES基因在青蒿细胞中表达的可能性。方法 将克隆的RANTES基因经Ti质粒衍生的双元表达载体pRPKII导入根癌农杆菌LBA4404菌株，通过叶盘共培养法已获得一批表现卡那霉素抗性的转基因青蒿植株。结果 PCR和Southern印迹杂交分析表明，RANTES基因已导入并整合到青蒿基因组中；RT-PCR、Northern印迹、Western印迹杂交结果证实，RANTES基因已在转基因青蒿植株中成功表达。结论 首次报道了RANTES基因在转基因青蒿植株中的表达，为基因工程改造青蒿打下了良好的基础。     

石菖蒲对谷氨酸钠致惊厥小鼠的作用

石菖蒲味辛性温 ,具芳香之气 ,行散之力较强 ,为宣气通窍之佳品 ,既能芳香化湿、醒脾健胃 ,又可化浊祛痰、开窍宁神 ,颇适用于中风神昏失语、癫痫、多寐、耳鸣等脑神诸病 ,是芳香宁神 ,涤痰开窍之要药 ,从古至今应用十分广泛。《神农本草经》谓“开心孔 ,补五脏 ,通九窍 ,明耳目 ,出声音。”《名医别录》亦谓其能“聪耳明目 ,益心智” ,而其开心、通窍、聪耳、明目、发声之功效 ,实与脑密切相关 ,因此 ,凡脑病多宜选用。本研究系列主要探讨石菖蒲不同部位对中枢神经系统作用 ,为进一步开发石菖蒲提供科学依据。本文报告石菖蒲不同部位对谷氨…     

3种解表方法抗流感病毒甲1型作用的实验研究

目的:比较辛温解表、辛凉解表、祛湿解表3种治法在体外、体内抗流感病毒甲1型鼠肺适应FM1株的作用。方法:选择桂枝麻黄各半汤、银翘散、新加香薷饮分别代表辛温解表、辛凉解表、祛湿解表等3种治法,并设病毒唑为阳性对照。观察其体外抗病毒作用及对小鼠流感病毒性肺炎的影响,对小鼠感染流感病毒的死亡保护作用和延长小鼠生命的作用。结果:3种解表法在体外流感病毒FM1株均无明显的抑制作用。3种解表法对小鼠流感病毒性肺炎均有抑制作用,与模型对照组比较,差异有显著性意义(P<0.05)。与病毒唑组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。3种解表方法对感染小鼠死亡的保护作用均不明显。结论:3种治法并不一定直接杀灭流感病毒,但可能通过调节机体免疫力等途径达到治疗流感的目的。