5-Azac 诱导急性移植物抗宿主病免疫低反应的甲基化研究

目的 建立小鼠急性移植物抗宿主病 （aGVHD） 模型, 检测 DNA 甲基化转移酶抑制剂 5-氮杂胞苷 （5-aza⁃ cytidine, 5-Azac）诱导 aGVHD 免疫低反应后的甲基化变化, 探讨 5-Azac 对小鼠 aGVHD 的免疫调节作用。方法选择雄性 C57BL/6（H-2b）与雌性 BALB/c（H-2d）小鼠分别作为异基因移植供、 受体建立移植物抗宿主病小鼠模型。 BABL/c 受体按照体质量相近进行配对, 分为移植对照组和 5-Azac 实验组。5-Azac 实验组于移植后 1~7、 14、 21、 28 d 尾静脉注射 5-Azac 0.25 mg/kg（0.3 mL/只）; 移植对照组尾静脉注射生理盐水 0.3 mL/只。提取 3 只移植对照组和 3 只 5-Azac 实验组小鼠的外周血 DNA, 分别等量混匀, 采用甲基化 DNA 免疫共沉淀测序 （MeDIP-seq） 的方法检测甲基化变化, 筛选差异甲基化基因, 并对其功能及生物学通路进行分析。结果 5-Azac 实验组小鼠的生存时间延长,排斥反应减弱, 成功诱导移植物抗宿主病免疫低反应状态。2 组小鼠 DNA MeDIP-seq 结果对比显示： 5-Azac 实验组启动子区存在 369 个差异甲基化基因, 其中上调 239 个、 下调 130 个; 外显子区存在 184 个差异甲基化基因, 其中上调 113 个、 下调 71 个。利用 KEGG （Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes） 数据库对差异甲基化基因分析, 结果显示其主要参与 10 个免疫学信号通路, 其中 TGF-β、 GSK-3β、 SYK、 PI3K、 NFAT、 CD28、 α4β7 与 aGVHD 的发生发展密切相关。结论 5-Azac 可以通过改变基因的甲基化状态有效诱导 aGVHD 的免疫低反应。     

丹柴合剂对树突状细胞的诱导分化作用

目的 研究中药复方制剂丹柴合剂对树突状细胞（DCs）的诱导分化作用,并探讨其机制。方法 制备丹柴合剂的大鼠含药血清。分离人外周血单个核细胞,经磁珠筛选出CD14+单核细胞,培养5-7 d获得未成熟树突状细胞（imDCs）,分为空白血清对照组与含药血清组,空白血清组分别加入含或不含脂多糖（LPS）的大鼠空白血清,含药血清组分别加入含或不含LPS的大鼠含药血清,用流式细胞术检测DCs表面分子CD86、CD11b和HLA-DR的表达,用酶联免疫反应（ELISA）法检测DCs分泌IL-10的情况,用流式细胞术检测DCs对T细胞增殖能力的影响,用实时定量PCR检测吲哚胺2,3双加氧酶（IDO）基因的表达。结果 经丹柴合剂作用后,DCs高表达CD11b,低表达CD86与HLA-DR,IL-10分泌增加。且该制剂通过促进DCs表达IDO进而抑制DCs介导的T细胞增殖能力。结论 丹柴合剂可将诱导DCs分化为DCregs并发挥免疫调节作用。     

小鼠回肠血管透明标本制作方法比较

目的 探讨运用不同填充剂与透明方式制作小鼠回肠血管透明标本的方法,评价其优缺点。方法 运用简易毛细管黏滞计测定填充剂的黏滞系数。8只小鼠被分为4组。采用改良灌流方法清洗血管,分别注入不同的填充剂,用不同的透明方法处理,比较肠组织和透明剂的折光指数。结果 硝化纤维素填充剂的黏滞系数、填充效果均优于其他组;20℃下,肠组织与透明剂折光指数差值分别为甘油法: 2.2×10^-3 nD,透明-固定液法: 65.8×10^-3 nD。结论 以硝化纤维素填充剂填充血管,使用透明 固定液法处理后,得到的标本效果较好。     

IL-17A对卵巢癌顺铂耐药的影响及其影响机制的研究

?目的: 探究IL-17A 对卵巢癌（OVCA）顺铂(DDP)耐药的影响及其可能的作用机制。方法:应用MTT 法检测IL-17A（0.1、1、10、100 ng/mL,处理12、24、48、72 h）对A2780（顺铂敏感卵巢癌细胞株）和OVCAR3（顺铂耐药卵巢癌细胞株）增殖的影响;应用MTT 法检测IL-17A（1 ng/mL,处理 24 h）对A2780 和OVCAR3 细胞DDP 耐药的影响,并以rhIL-17RA 中和抗体（IL-17RAmAb）和Gli1 抑制剂Gant61 进行相应的阻断实验;应用Western blotting 法检测IL-17A 处理A2780 和OVCAR3细胞后,细胞中耐药相关分子ABCG2、MDR1 和Hedgehog（Hh）信号通路核转录因子Gli1 的蛋白表达,并分别以IL-17RAmAb 和Gant61 进行相应的阻断实验。结果: IL-17A 对A2780 和OVCAR3 的细胞增殖无显著性影响,但可显著增加DDP 降低的A2780 和OVCAR3 细胞活性（P<0.05）,分别以IL-17RA mAb 和Gant61 进行阻断实验均可消除由IL-17A 加剧的A2780 和OVCAR3 细胞DDP 的耐药性;IL-17A 可上调A2780

和OVCAR3 细胞耐药相关分子ABCG2,MDR1 和Gli1 的蛋白表达并且分别以IL-17RAmAb 和Gant61 进行阻断实验均可抑制IL-17A 引起的A2780 和OVCAR3 细胞中ABCG2,MDR1 和Gli1 蛋白表达。结论: IL-17A可作用于IL-17RA并激活Gli1介导的Hh信号通路,进而促进耐药相关分子ABCG2和MDR1表达,从而加剧以DDP为基础的OVCA化疗耐药性。     

自模板法制备中空介孔硅球及其载药释药性能的研究

目的: 采用自模板法合成中空介孔硅球（HMSNs）,并对其载药释药性能进行研究。方法: 采用自模板法,通过控制反应物摩尔数、温度、时间等反应条件制备HMSNs,并进行载药研究,计算载药率、包封率与释药率。结果:合成的HMSNs球形度良好,具有典型的介孔分子筛特征及硅基骨架特征峰,可以进行结构确证,药物在42 h的累积释药百分数达70%以上。结论:HMSNs可用于抗癌药物伊马替尼的装载,达到缓释的目的。     

近视眼不同屈光状态下调节反应量的观察

目的 分析青年人群中近视眼调节功能与正视眼的差异.方法 根据等效球镜度数的不同,将55例(110眼)受试者分为正视组(24眼)、低度近视组(25眼)、中度近视组(36眼)和高度近视组(25眼).使用GRAND-SEIKO WAM-5500开放视野式自动验光仪测量3 D调节刺激下诱发的调节反应量,比较正视眼和低、中、高度...     

Early histological alteration of the retina following photocoagulation treatment in diabetic retinopathy as measured by spectral domain optical coherence tomography

Purpose  

To investigate the earliest histological changes of the retina after laser treatment of diabetic retinopathy by using Spectral domain optical coherence tomography (SD-OCT, Heidelberg Engineering, Heidelberg, Germany).     

头孢哌酮/舒巴坦玻璃体腔注射治疗兔铜绿假单胞菌性眼内炎

目的评价头孢哌酮/舒巴坦治疗铜绿假单胞菌眼内炎的疗效。方法青紫蓝兔18只,随机分为3组,右眼注菌后6h分别注入100g/L头孢哌酮/舒巴坦、22.5g/L头孢他啶和生理盐水各0.1mL,观察24h。另取青紫蓝兔12只,随机分为2组。早期注药组注菌后6h注入100g/L头孢哌酮/舒巴坦0.1mL,晚期注药组注菌后20h注入100g/L头孢哌酮/舒巴坦0.1mL,观察1周。结果头孢哌酮/舒巴坦组、头孢他啶组与生理盐水组比较除角膜评分外（P〉0.05）,结膜、前房、玻璃体、视网膜、B型超声检查及组织病理学评分结果差异均有统计学意义（P〈0.05）;头孢哌酮/舒巴坦组与头孢他啶组相比,除虹膜炎症反应评分差异有统计学意义外（P〈0.05）,其他评分差异均无统计学意义（P〉0.05）,但从具体评分来看头孢哌酮/舒巴坦组优于头孢他啶组。早期注药组与晚期注药组相比,1周后结膜、前房、虹膜、玻璃体、视网膜、B型超声检查及组织病理学评分差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论 100g/L头孢哌酮/舒巴坦0.1mL玻璃体腔注射治疗早期铜绿假单胞菌眼内炎有效。