系膜增生性肾炎肾小管间质损害模型的建立及肾疏宁的保护作用

[目的]建立一种新的系膜增生性肾炎肾小管间质损害模型,并观察肾疏宁的保护作用。[方法]在系膜增生性肾炎(MsPGN)模型基础上,延长造模时间至12～16周,使其自然发展成肾小管间质损害模型,观察肾疏宁对进展性肾小管间质损害的保护作用,并设苯那普利为阳性对照组。[结果]随着造模时间的延长,模型组肾小管间质损害逐渐加重,肾疏宁及苯那普利组损伤程度明显减轻。[结论]系膜增生性肾炎中肾小管间质损害模型成功,中药肾疏宁对肾小管间质损害具有明显的保护作用。     

奈韦拉平对HeLa细胞端粒酶活性和细胞周期的影响

目的研究奈韦拉平(nevirapine,NVP)对HeLa细胞端粒酶活性和细胞周期的影响.方法采用TRAP-PCR-ELISA方法检测HeLa细胞在奈韦拉平作用后端粒酶活性的变化,用流式细胞仪分析细胞周期的改变.结果NVP作用后,HeLa细胞端粒酶活性明显抑制(P＜0.05),并且HeLa细胞的G2/M期细胞含量明显增高(P＜0.01).结论NVP对肿瘤细胞的端粒酶活性有抑制作用.     

核酸疫苗pVAX1-F的构建及瞬时表达

目的:构建仙台病毒核酸疫苗pVAXl-F,并在COS 7细胞中表达.方法:利用PCR法以仙台病毒cDNA为模板扩增出F基因,与pMD18-T连接,测序正确后用HindⅢ/EcoR Ⅰ双酶切,将F基因引入经同样酶切的pVAX1载体,构建pVAX1-F表达载体,用PCR法和双酶切法鉴定,并将此重组质粒通过脂质体介导转染COS 7细胞,流式细胞术检测抗原蛋白表达、RT-PCR法检测外源基因的表达.结果:经PCR法和酶切鉴定,目的片段大小与预期相符,经测序目的基因序列与GenBank(EF679198)公布结果一致.重组质粒pVAX1-F转染COS 7细胞72 h后,能够表达抗原蛋白,流式细胞术检测达到58.3%,与对照组3.6%比较差异具有显著性(P<0.01),且F基因mRNA明显表达.结论:成功构建pVAX1-F,并能够在COS 7细胞中瞬时表达,为仙台病毒F基因核酸疫苗进行免疫学评价奠定基础.     

大黄总甙、大黄素、番泻甙对不全梗阻后小鼠离体小肠葡萄糖-钠转运电位的影响

本实验采用记录翻转小鼠离体小肠囊葡萄糖－钠转运电位的方法，观察大黄总甙、大黄素、番泻甙对在全梗阻后小肠葡萄糖－钠吸收的影响。结果发现大黄有效成分对葡萄糖－钠转运电位产生明显抑制作用。表明这些成分可阻止不全梗阻后小肠葡萄糖－钠的吸收，并伴随水的吸收减少，使肠腔容积增大，进而使肠蠕动增强，亦可产生通里攻下的作用。这一结果可为进一步阐明大黄治疗不完全性肠梗阻的机理提供新的理论依据。     

实时定量RT-PCR方法检测豚鼠TSHR免疫BALB/c小鼠甲状腺TSHR的表达

目的：建立外标准法SYBR GREENI实时定量（real—time）RT—PCR方法，以检测豚鼠TSHR分子免疫对BALB／c小鼠甲状腺TSHRmRNA的表达的影响。方珐：取正常BALB／c小鼠甲状腺提取甲状腺总RNA．逆转录后进行PCR，得到333bp扩增产物。经回收纯化后作为real—time PCR的标准品。稀释为10^6、10^5、10^4、10^3、10^2、10^1拷贝，制作标准曲线；并同时进行普通PCR，比较其灵敏度。优化反应条件使溶解曲线有特异扩增。检测豚鼠TSHR分子免疫的BALB／c小鼠甲状腺TSHR mRNA的表达。结果：建立的外标准法SYBR GREENI实时定量RT—PCR方法可以灵敏的检测到10copy的核酸，灵敏度为普通PCR的10^4倍；溶解曲线只有特异峰，溶解温度为82．9℃。没有明显的引物二聚体和非特异峰出现。不同标准点批间变异系数范围为5．8％．14．3％（n=6）。与对照组比较，TSHR大分子免疫的BALB／c小鼠甲状腺组织TSHR mRNA水平显著升高（P〈0．05）。结论：外标准法SYBR GREENI实时定量lit—PCR具有灵敏度高，特异性强，重复性好的特点，比普通PCR更精确地检测出小鼠甲状腺组织TSHR mRNA的水平。     

糖尿病并发勃起功能障碍危险因素Meta分析

目的：评价糖尿病并发男性勃起功能障碍危险因素。方法：利用Meta分析对1998—2004年各国符合条件的7个有关糖尿病并发男性勃起功能障碍危险因素的病例一对照研究进行定量综合分析，计算每个因素的综合OR值。根据对研究问异质性检验结果，采用相应的模型：固定效应模型或随机效应模型。结果：共有5个因素有显著意义，分别为：糖尿病病程（OR=2．45，95％CI，1．67～3．62）、高血压（OR=I．83，95％CI，1．42～2．36）、神经病变（OR=3．52，95％CI，3．18．3．89）、视网膜病变（OR=2．44，95％CI，1．86—3．21）、吸烟（OR=I．53，95％CI，1．06—2．23）。结论：糖尿病病程、高血压、神经病变、视网膜病变、吸烟为糖尿病并发男性勃起功能障碍的危险因素，而饮酒的作用尚不能确定。     

加强七年制医学生早期科研能力培养的探讨

目的通过医学微生物学的课外实践活动,加强七年制医学生早期科研能力的培养与训练。方法针对本专业的特点及结合教师的科研课题方向,指导学生参加部分科研项目;指导学生围绕感兴趣的某个专题查阅文献,撰写综述;由能力强的学生独立选题、立题设计出实验方案,再结合本教研室的实际情况,由教师适当地予以指导。结果学生通过课题的研究了解了医学微生物学的新进展、新发现及相关的科研思路,力求科研题目有前沿性。学生参加科研活动,通过实验设计了解了实验的整体过程,培养了科学的思维方法及独立思考、解决问题的能力,并培养了学生的严谨的科学态度。     

玉竹及其掺伪品的RAPD鉴定

目的探索鉴别玉竹及其掺伪品热河黄精、黄精等药用植物的方法。方法采用显微鉴定和RAPD技术进行药材鉴别。结果通过所选引物进行PCR扩增,可以获得特异性的谱带,将玉竹及其主要掺伪品热河黄精、黄精区分开。结论建立的该分析方法可用作区分玉竹及其掺伪品的依据。     

空心莲子草的化学成分研究

目的：分离空心莲子草Alternanthera philoxeroides的化学成分。方法：以硅胶柱、凝胶柱色谱分离,制备HPLC纯化,采用MS,NMR等波谱方法进行结构鉴定。结果：从石油醚及醋酸乙酯部位分离得到9个化合物：脱镁叶绿素a(phaeophytin a,1),脱镁叶绿素a′(pheophytin a′,2),齐墩果酸(oleanoic acid,3),β-谷甾醇(β-sitosterol,4),3β-羟基-豆甾-5-烯-7-酮(3β-hydroxystigmast-5-en-7-one,5),α-菠甾醇(α-spinasterol,6),二十四亚甲基环阿尔廷醇(24-methylenecycloartanol,7),环桉烯醇(cycloeucalenol,8),叶绿醇(phytol,9)。结论：化合物1,2,5,7～9均首次从该植物中分得。     

ISSR法鉴定中药玉竹与小玉竹

目的:鉴别中药玉竹及其掺伪品小玉竹,探索中药玉竹鉴别的新方法。方法:采用显微鉴定和ISSR法鉴定中药玉竹,共考察了28条随机引物,从中筛选出引物(CA)8G,(ATG)5用于分析,经18%琼脂糖电泳分离产物。结果:所选引物进行的PCR扩增可产生用于分析的多态性谱带。通过显微鉴定以及ISSR标记法可以将玉竹及其主要掺伪品区分开。结论:本实验所建立的ISSR标记方法可用于中药玉竹和小玉竹的区分。