抗瓜氨酸化蛋白/肽抗体及类风湿因子在类风湿关节炎早期诊断中的应用

目的:探讨两种抗瓜氨酸化蛋白/肽抗体(ACPA)即第三代抗环瓜氨酸肽(CCP3)抗体、抗突变型瓜氨酸波形蛋白(MCV)抗体及类风湿因子(RF)在类风湿关节炎(RA)诊断中的价值。方法:检测30例早期RA患者(RA组)、32例骨性关节炎(OA)和强直性脊柱炎(AS)患者(OA和AS组)及30例健康体检者(对照组)血清抗MCV抗体、抗CCP3抗体及RF水平。分析3种抗体、疾病活动评分(DAS28)、红细胞沉降率(血沉,ESR)及C反应蛋白(CRP)在RA患者治疗后水平的变化。结果:RA组3种抗体的阳性率均高于对照组及OA和AS组(P<0.01)。抗MCV抗体、抗CCP3抗体及RF对RA诊断的敏感性分别为76.67%、66.67%、63.33%,特异性分别为96.77%、95.16%、83.87%。RF与抗MCV抗体、抗MCV抗体与抗CCP3抗体联合检测对RA诊断的敏感性为83.33%、80.00%。RA患者DAS28、ESR、CRP、抗MCV抗体及RF水平较治疗前降低(P<0.05或P<0.01)。结论:抗MCV抗体对RA早期诊断价值较高。抗体联合检测提高了诊断的敏感性。抗MCV抗体及RF对判断RA疾病活动性有重要意义。3种抗体均具有鉴别RA与OA、AS的价值。     

荜茇酰胺对人肺癌A549/DDP细胞耐药性的逆转作用

目的:研究荜茇酰胺对人肺癌A549/顺铂(DDP)细胞耐药性的逆转作用。方法:A549/DDP细胞经0、20、30μmol/L荜茇酰胺作用48 h后,用MTS法检测肿瘤细胞抑制率;流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡、细胞周期、P-糖蛋白(P-gp)表达和肿瘤细胞内罗丹明Rht123含量的变化;Western blotting法检测多药耐药基因(MDR)1、多药耐药相关蛋白(MRP)1、DNA拓扑异构酶(Top)Ⅱ、谷胱甘肽S-转移酶(GST)-π、凋亡抑制蛋白Survivin、周期蛋白依赖性蛋白激酶(CDK)1和蛋白激酶(PK)Cζ蛋白表达;实时荧光聚合酶链反应(RT-PCR)法检测MDR1、MRP1、Top-II、GST-π、Survivin和CDK1 m RNA表达;酶标仪检测含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-3、8活性。结果:A549/DDP细胞经0、20、30μmol/L荜茇酰胺作用48 h后,DDP对肿瘤细胞增殖的抑制率明显升高;与0μmol/L比较,20、30μmol/L荜茇酰胺作用48 h后,DDP导致的细胞凋亡率和G2期/M期明显升高,P-gp表达明显减弱,Rh-123浓度明显增加,MDR1、MRP1、Top-II、GST-π、Survivin、CDK1和PKCζ蛋白表达明显减弱,MDR1、MRP1、Top-Ⅱ、GST-π、Survivin、CDK m RNA表达明显减弱,Caspase-3、8的活性明显增强。结论:荜茇酰胺可逆转人肺癌A549/DDP细胞DDP耐药性,可能与其调节多药耐药相关基因表达有关。     

紫杉醇对U373细胞周期阻滞及增殖抑制的机制研究

目的研究紫杉醇(PTX)诱发神经胶质瘤U373细胞的周期阻滞和增殖抑制的相关机制。方法 MTT检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞周期分布,免疫细胞荧光化学观察细胞形态学变化,RT-PCR和Western blot检测细胞周期相关CyclinB1、CyclinD1、CDK1、CDK2和p53的表达变化。结果 PTX可以明显抑制U373细胞的增殖活性,抑制作用呈时间浓度依赖性;细胞周期分析显示,实验组细胞G2/M期比例增高;细胞免疫荧光检测实验组细胞阻滞于有丝分裂期;RT-PCR和Western blot显示,PTX可以增加CDK1和CyclinB1表达,降低CyclinD1表达(P<0.05),而对CDK2无明显影响。结论 PTX能够抑制神经胶质瘤U373细胞增殖,引起有丝分裂期阻滞,诱导细胞凋亡,与其细胞周期相关蛋白表达水平密切相关。     

单侧前庭周围性眩晕的平稳跟踪实验结果分析

目的:对单侧前庭周围性眩晕的眼震图平稳跟踪实验(SPT)结果进行定性、定量分析并探讨其影响因素。方法:应用法国Synapsys视频眼震图仪对185例单侧前庭周围性眩晕患者(实验组)和51例正常人(对照组)行SPT和自发性眼震(SN)检测,以SPT水平眼跟踪波的增益值及SN为评定参数,对SPT眼动波形及增益进行定性、定量分析,并分析SPT眼动增益与SN强度之间的相关性。结果:实验组SPT呈现为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型波,分别为105例(56.8%)、72例(38.9%)、8例(4.3%),存在SN者58例(31.4%),无Ⅳ型波。对照组仅呈现Ⅰ、Ⅱ型波,分别为38例(74.5%)、13例(25.5%),无Ⅲ、Ⅳ型波及SN。量化分析:对照组、实验组总体及定性划分后各型波的强、弱侧增益之间进行t检验,均差异有统计学意义(P<0.05);2组Ⅰ、Ⅱ型波的弱侧增益值之间均差异有统计学意义,强侧增益值之间均差异无统计学意义。对照组总体及定性划分后Ⅰ、Ⅱ波的左右侧增益值均差异无统计学意义(均P>0.05),强弱侧增益值比较均差异有统计学意义(均P<0.05)。实验组总体和定性划分后的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型波的强、弱侧增益值比较,均差异有统计学意...     

内窥镜下激光睫状体光凝术联合玻璃体切割术治疗糖尿病新生血管性青光眼的临床疗效

目的　探讨内窥镜下激光睫状体光凝术联合玻璃体切割术治疗糖尿病新生血管性青光眼的临床疗效。方法　选取２４例（２４眼）糖尿病新生血管性青光眼患者,行内窥镜下激光睫状体光凝术联合玻璃体切割术,术后至少随访６个月。观测指标包括手术前后患者视力、眼压变化、新生血管消退程度和术后并发症情况。结果　术后视力提高１４眼,不变８眼,降低２眼。术后第１天眼压为（２９．４±１０．８）ｍｍＨｇ（１ｋＰａ＝７．５ｍｍＨｇ）,１个月时为（２１．０±１１．９）ｍｍＨｇ,最终随访时为（２０．１±１０．８）ｍｍ-Ｈｇ,与术前（４６．６±７．３）ｍｍＨｇ比较,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。术后新生血管完全消失１０眼,部分消失残留少量无功能血管者１２眼,未见明显改善者２眼。术后第１天８例患者发生颜面部浮肿;术后发生球结膜混合充血９眼、角膜水肿４眼、一过性高眼压４眼、复发性玻璃体出血１眼（后行玻璃体腔灌洗术后病情稳定）。结论　内窥镜下激光睫状体光凝术联合玻璃体切割术治疗糖尿病新生血管性青光眼短期内临床效果显著,并发症少,患者痛苦少,是一种相对有效、安全的手术方法。     

二甲双胍对糖尿病大鼠脂肪组织AMPK和PPARγ的表达及胰岛素抵抗影响

目的:观察二甲双胍对2型糖尿病模型大鼠脂肪组织中腺苷酸活化蛋白激酶α2(AMPKα2)及过氧化物酶体增值物激活受体γ(PPARγ)的表达,及其对胰岛素抵抗的影响。方法:高脂饮食伴一次性腹腔注射STZ的方法制备2型糖尿病模型,造模成功后随机分为模型组(DM-C)和治疗组(DM-T)。DM-T组给予盐酸二甲双胍灌胃治疗。测定大鼠治疗前后的体质量,实验末测定各组大鼠肾周及睾周脂肪质量,并检测各组大鼠血糖、胰岛素水平,计算大鼠脂体比,胰岛素敏感指数。同时以半定量逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)检测各组大鼠脂肪组织AMPKα2及PPARγmRNA的表达。结果:与DM-C组比较,治疗组大鼠脂肪组织AMPKα2及PPARγmRNA的表达及血清胰岛素、胰岛素敏感指数显著增高(P<0.05);DM-T组大鼠血糖显著降低(P<0.05)。结论:二甲双胍可能通过上调2型糖尿病大鼠脂肪组织AMPKα2及PPARγmRNA的表达,调节机体糖代谢,改善胰岛素敏感性。     

中药五倍子对不同根面龋损提取非胶原蛋白后再矿化的影响

目的体外观察人工形成的牛牙根面龋提取非胶原蛋白前后,中药五倍子对人工龋再矿化的影响。方法体外37℃恒温箱中,两种脱矿溶液中用牛牙模拟人牙形成不同形态根面龋模型(酸蚀性病损和表层下脱矿)。每组随机选择两个样本用偏光显微镜(PLM)观察表面形态;用盐溶液提取根面龋暴露区的可溶性牙本质磷蛋白(S-DPP),在恒温箱中用五倍子多酚化合物(GCE)对提取非胶原蛋白前后的根面龋同时进行再矿化循环7d,用激光共聚焦扫描显微镜(LSCM)观察样本并分析平均荧光量。结果 PLM观察显示表层下脱矿形成了较完好的表层,而酸蚀性病损则无表层形成。LSCM分析结果显示在酸蚀性病损形态下提取S-DPP后GCE处理荧光强度明显下降(P<0.05),而在表层下脱矿形态下提取S-DPP前后GCE处理荧光强度无明显差异(P>0.05)。结论在酸蚀性病损条件下提取S-DDP后GCE可能有更高的再矿化效果。     

β-葡萄糖苷酶水解黄芪甲苷的研究

目的 采用β-葡萄糖苷酶水解黄芪甲苷,并对其酶水解动力学进行初步研究。方法 以HPLC-ELSD法检测水解液中黄芪甲苷及水解产物环黄芪醇-6-O-β-D-葡萄糖苷（CMG）的量,以黄芪甲苷的水解转化率为指标,考察各反应因素对转化率的影响,并对该反应进行动力学研究。结果 最佳反应条件为反应温度50 ℃,溶液pH值5.0,酶浓度460 U/mL,底物初始浓度0.1 mmol/L,反应时间48 h;在此条件下,水解转化率达到90%以上。在最佳反应条件下,该水解反应过程符合单底物Michaelis Menten方程,其中最大反应速率（V_m）值为0.037 mmol/(L?min),米氏常数（K_m）值为5.8 mmol/L。结论 采用β-葡萄糖苷酶水解黄芪甲苷制备CMG可行;商品化的β-葡萄糖苷酶并非黄芪甲苷的特异性水解酶。     

平滑肌可收缩蛋白在人子宫肌及子宫平滑肌瘤中的差异表达研究

目的:探讨平滑肌可收缩蛋白SM-α-actin、Calponin和SM22在人类子宫肌及子宫平滑肌瘤中的差异表达.方法:采用Western blot检测人子宫肌及子宫平滑肌瘤组织中平滑肌可收缩蛋白SM-α-actin,Calponin和SM22的表达情况.进一步采用酶消化法分离培养人子宫平滑肌细胞(HM-SMCs)及子宫平滑肌瘤平滑肌细胞(HL-SMCs),并采用免疫荧光、Western blot检测HM-和HL-SMCs中SM-α-actin、Calponin、SM22的表达.结果:Western blot结果显示平滑肌可收缩蛋白SM-α-actin、Calponin、SM22在人子宫平滑肌瘤组织中表达下降,差异有统计学意义(P＜0.05);免疫荧光对原代培养的HM-和HL-SMCs中SM-αactin,Calponin和SM22的表达进行检测,结果均呈阳性,但与HM-SMCs相比,在HL-SMCs中表达水平下降.进一步的Westem blot结果也显示HL-SMCs中SM-α-actin,Calponin和SM22-α表达下降,差异有统计学意义(P＜0.05).绘制生长曲线显示子宫平滑肌瘤细胞生长缓慢.结论:子宫平滑肌瘤细胞的分化程度较低,在子宫平滑肌瘤病变中可能存在着平滑肌的去分化现象.SM-α-actin、Calponin和SM22可能在子宫平滑肌瘤的发生、发展过程中起着重要作用.     

大豆异黄酮对脑缺血大鼠保护作用的研究

目的:建立大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,观察大豆异黄酮(ISO)对脑缺血大鼠的保护作用。方法:健康成年SD大鼠随机分成6组:ISO低、中、高剂量组、VE组、模型组、假手术组。4w后前5组做MCAO模型,分别于造模后1h和6h磁共振检测抗氧化指标,用透射电镜进行神经细胞形态学观察。结果:与模型组相比,各ISO组大鼠血清SOD和GSH-PX活性、6h各兴趣区rADC、rDCavg、rFA值较高;血清MDA含量较低,差别均有统计学意义。ISO剂量与血清SOD和GSH-PX活性、6h各兴趣区rADC、rDCavg、rFA均呈正相关;而与血清MDA含量呈负相关。形态学观察显示,ISO高剂量组神经元细胞结构良好。结论:ISO可通过提高机体抗氧化能力对缺血性大脑损伤起到一定的保护作用,ISO低、中剂量组与VE组作用相近。