神经配蛋白及其水解产物的功能

神经配蛋白（neuroligin）是介导突触发育及成熟的一类关键蛋白，与神经发育疾病如自闭症等密切相关。近年来，研究者发现神经配蛋白除了以整体蛋白形式发挥功能外，其在不同发育阶段、神经元活动或一些神经精神疾病病理状态下可被多种蛋白酶水解，从而影响突触活性，参与部分神经系统疾病的发生和发展。不同的水解产物可具有与整体蛋白不一样的生理功能，在神经活动中发挥不同的功能，如调节突触可塑性、增加突触强度和数量、影响β淀粉样蛋白多肽聚合、促进胶质瘤增殖和生长、激活相关信号通路等。本文在阐述神经配蛋白整体蛋白结构和功能的基础上，总结分析了其水解过程的条件、产物及其功能，并探讨其生理学意义。     

原发性肉碱缺乏症的筛查、诊断、治疗及基因型研究

目的 分析新生儿及母源性原发性肉碱缺乏症(PCD)临床筛查、诊断、治疗及基因型,为PCD的临床诊治提供依据。方法 采用串联质谱法(MS/MS)对2009年1月1日—2018年12月31日在浙江省医疗机构出生后3 d的新生儿足跟血进行多种遗传代谢病筛查。游离肉碱(C0)低于本实验室切值的可疑患儿及其母亲同时召回确诊。结果 共筛查3 040 815例新生儿,血C0低于正常参考值(切值＜10μmol/L)者4 459例,确诊PCD 患儿121例(其中男55例,女66例);发病率为1/25 131。对确诊后随访资料完整的111例患儿分析显示:初筛C0值为(5.94±2.01)μmol/L、召回复查C0值为(5.70±1.99)μmol/L,差异无统计学意义(t=1.05,P>0.05)。左卡尼汀初始剂量为40～200mg/(kg·d),维持剂量时C0的水平为(24.94±10.26)μmol/L,显著高于治疗前C0水平(t=20.728,P<0.001)。母源性PCD 64例,发病率为1/47 513,C0平均为(3.31±1.79)μmol/L。111例PCD患儿共检出SLC22A5基因上42种变异,其中以c.1400C>G (p.S467C) 突变最为常见,约占33.33%(74/222);其次为c.51C>G(p.F17L)占14.73 %。93.75%的母源性PCD患者母亲进行基因检测(60/64),c.1400C>G (p.S467C) 突变约占35.83%(43/120)。除2例患儿不明原因死亡外,其他PCD患儿生长发育正常。结论 PCD可通过新生儿疾病筛查早期发现,但需排除母源性肉碱缺乏症。基因检测可明确诊断,SLC22A5 c.1400C>G (p.S467C) 变异是浙江省PCD患者最常见的突变类型。左卡尼汀治疗有效,但需要长期规范治疗与随访。     

抗CD19 嵌合受体修饰的NK-92 细胞的构建及其对CD19 阳性非霍奇金淋巴瘤细胞的杀伤作用

目的：构建表达CD19 的二代CAR-NK-92 细胞系,探讨其对CD19 阳性非霍奇金淋巴瘤细胞的特异性杀伤作用。方法：构建表达CD19-CAR基因的载体并包装慢病毒颗粒,感染NK-92 细胞,流式细胞术检测感染率,并进一步分选阳性细胞,Western blotting 检测CD19-CAR 在NK-92 细胞中的表达;以CD19 阴性骨髓瘤细胞U-266、CD19 阳性的非霍奇金淋巴瘤细胞ARH-77 和HS-Sultan 细胞为靶细胞,以CD19CAR-NK-92 为效应细胞,流式细胞术检测细胞杀伤实验中存活肿瘤细胞的绝对数量并计算杀伤率。结果: 成功构建慢病毒载体pLVX-CD19-CAR并包装病毒颗粒,感染NK-92 细胞后CD19CAR-NK-92 细胞纯度高于90%;Western blotting 分析显示CD19-CAR已经成功表达在NK-92 中。CD19CAR-NK-92 对ARH-77[ （70.10±1.86）% vs （1.95±0.63）%,P<0.01]和HS-Sultan[ （74.98±1.60）% vs（0.58±1.49）%,P<0.01]细胞的杀伤率显著高于空载体对照组ZsGreen-NK-92 细胞,对U266 的杀伤率无显著差别（P>0.05）。结论：成功构建了表达CD19CAR的NK-92 细胞系,其对CD19 阳性的非霍奇金淋巴瘤细胞有特异性杀伤作用。     

新生儿酪氨酸血症筛查及基因谱分析

目的: 探讨酪氨酸血症（HT）在中国南方人群中的流行、分布、基因谱特征和预后。方法: 回顾性分析2013年11月至2018年11月以酪氨酸/琥珀酰丙酮增高为关键指标,经串联质谱筛查检出并结合基因检测诊断为HT的新生儿的资料。结果: 共2 188 784名新生儿接受筛查,酪氨酸、琥珀酰丙酮正常范围（0.5%~95.5%）分别为34.5~280.0 μmol/L、0.16~2.58 μmol/L。诊断HT 3例,患病率为1:729 595。其中HTⅠ型（FAH基因c.455G>A纯合变异）、Ⅱ型（TAT基因c.890G>T及c.408+1G>A复合杂合变异）、Ⅲ型（HPD基因c.257T>C纯合变异）各1例,后两者为新发突变。HT筛查阳性预测值为3.4%。Ⅰ型患儿初筛酪氨酸666.9 μmol/L,琥珀酰丙酮3.87 μmol/L,伴胆汁淤积,肝酶、乳酸轻度增高,虽经特殊奶粉（去除酪氨酸、苯丙氨酸）治疗,2月龄时仍死于家中;Ⅱ型患儿初筛酪氨酸625.6 μmol/L,琥珀酰丙酮正常,经特殊奶粉治疗,酪氨酸控制在正常范围,随访至7个月,体格、行为发育正常,未见眼、皮肤病变;Ⅲ型患儿初筛酪氨酸1035.3 μmol/L,琥珀酰丙酮正常,不规则应用特殊奶粉治疗,随访至29个月,酪氨酸在532.1~1060.3 μmol/L波动,体格发育、智力发育正常。结论: HT在中国南方人群中罕见,三型在人群中均有分布,基因谱分散。Ⅰ型患儿建议早期联合尼替西农治疗,否则预后可能不良;Ⅱ型患儿如早期采取特殊饮食治疗,一般预后良好;Ⅲ型患儿的预后有待进一步积累资料后确定。     

I1363T突变致人骨骼肌电压门控钠通道快失活受损的机制

探究人源骨骼肌电压门控钠通道hNav1.4 I1363T突变体导致患者出现先天性副肌强直症状的机制。 利用氨基酸序列比对,检测hNav1.4 I1363位点的保守性;将hNav1.4蛋白的羧基端融合荧光蛋白mCherry,利用共聚焦显微镜观察hNav1.4野生型与I1363T突变体蛋白的表达量与分布情况;通过全细胞电生理技术记录野生型与I1363T突变体的稳态激活及快失活参数,并进一步分析野生型与I1363T突变体的窗电流。 hNav1.4 I1363位点在各类钠通道中高度保守。野生型与I1363T突变体均能正常上膜,且表达量无明显差异。野生型与I1363T突变体的50%激活电压V_0.5 分别为（-29.08±0.24）mV和（-28.79±0.21）mV,斜率因子k分别为5.06±0.21和4.73±0.18（均P＞0.05）;野生型与I1363T突变体的50%失活电压V_0.5 分别为（-68.03±0.34）mV和（-59.01±0.26）mV,斜率因子k分别为4.55±0.21和5.24±0.23（均P＜0.05）,I1363T突变体的失活电压向去极化方向移动,且更为平缓。I1363T突变体形成的窗电流大于野生型的窗电流。 I1363T突变会导致hNav1.4慢失活受损,增加肌肉细胞兴奋性,导致肌强直的发生;而增大的窗电流使得钠离子在细胞内缓慢聚集,最终导致细胞兴奋性下降,引发肌无力。      

食品安全抽样环节中的问题和建议

目的：探讨目前在食品生产、流通、餐饮环节抽样中出现的问题,提出改进食品安全抽样工作的建议,旨在提高食品安全抽检工作效率,为进一步做好食品安全监管工作提供参考。方法：介绍食品抽样检测的定义及食品安全抽检的内容、现阶段食品安全抽样的状况,分析抽检过程遇到的问题：抽样任务部分重复;抽样任务难以完成;抽样人员缺乏专业知识;餐饮抽样中涉及外购原料再加工后的问题样品难以溯源;部分被抽检样品信息标注无规范;样品贮存和运输过程中缺少温度和湿度的全程监控;被抽检单位不予配合。结果与结论：建立各级监管部门食品安全抽样检验工作机制;配备按食品要求的贮存和运输设备;追溯被抽检样品的来源;制定部分被抽检样品信息标注规范;提高抽样人员专业知识水平;加大食品安全的宣传。     

全自动荧光免疫分析仪在新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症筛查中的应用

目的：分析全自动荧光免疫分析仪（GSP分析仪）检测新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）缺乏症的性能。方法：应用GSP分析仪检测国家卫生健康委临床检验中心室间质量评价质控品和G6PD试剂盒（荧光分析法）的低、高质控品,计算准确度和精密度。采用GSP分析仪和半自动荧光免疫分析仪（1420分析仪）同步检测2622例新生儿筛查标本和41例确诊患儿的标本,分析检测结果的相关性和一致性;采用GSP分析仪和1420分析仪检测漂浮和未漂浮标本各78例,比较检测结果差异;采用1420分析仪和GSP分析仪分别检测2017年1月至2018年12月1?100?384名新生儿筛查标本及2019年1月至2020年12月855?856名新生儿筛查标本,比较两种仪器的筛查效能。对目前使用的切值（26?U/dL）的合理性进行评估,并通过百分位数法,以第99.1百分位建立GSP分析仪筛查G6PD缺乏症的新切值。结果：GSP分析仪检测5个不同浓度室间质控品的检测值与靶值的相对偏倚为0.71%~4.23%,检测G6PD测定试剂盒质控品的批内精密度为4.34%~4.91%,批间精密度为0.85%~2.12%,总变异系数为5.44%~5.72%,均符合实验要求。GSP分析仪和1420分析仪检测的G6PD活性存在明显的正相关（r=0.740,P<0.01）,均能筛查出41例确诊患儿,筛查的一致性较好（Kappa=0.945）。1420分析仪检测漂浮干血斑中的G6PD活性明显低于未漂浮干血斑中的G6PD活性（P<0.05）,而GSP分析仪检测漂浮和未漂浮干血斑中的G6PD活性差异无统计学意义（P>0.05）。GSP分析仪和1420分析仪筛查G6PD缺乏症的敏感度均为100.00%,且特异度均在99.80%以上。与1420分析仪比较,GSP分析仪筛查G6PD缺乏症的阳性预测值、初筛阳性率和诊断率均上升,假阳性率下降（均P<0.01）。根据人群第99.1百分位建立新切值,男性为26.1?U/dL,女性为29.1?U/dL。结论：GSP分析仪检测性能良好,筛查效率高,更有利于疾病的检出,可用于临床新生儿G6PD缺乏症的大规模筛查。     

2019冠状病毒病爆发期间城市居民午睡与抑郁情绪的关系研究

目的：探索2019冠状病毒病（COVID-19）爆发期间城市居民午睡与抑郁情绪的关系,为突发公共卫生事件期间城市居民抑郁情绪的预防提供科学依据。方法：基于WELL中国队列人群,于2020年4月8日至2020年5月29日通过电话访谈获取COVID-19爆发期间被调查者的健康与生活方式信息,最终纳入3075名18~80岁杭州市拱墅区城市居民的调查资料。采用世界卫生组织五项身心健康指标测量抑郁情绪,多元logistic回归模型分析调查对象午睡状况与抑郁情绪的关系。结果：COVID-19爆发期间约有20.6%的城市居民出现抑郁情绪;在一般人群中,有午睡行为尤其是午睡时长不超过30?min与抑郁情绪发生风险（OR=0.61,95%CI：0.47~0.79,P<0.01）、新发抑郁情绪风险（OR=0.66,95%CI：0.50~0.88,P<0.01）较低相关;在有抑郁情绪的城市居民中,仅午睡时长不超过30?min有利于抑郁情绪改善（OR=0.42,95%CI：0.21~0.82,P<0.05）。结论：2019冠状病毒病爆发期间,约有1/5的城市居民存在抑郁情绪,短时间的午睡可能是抑郁情绪的保护因素。     

《药品分剂量操作规范》团体标准解读

浙江省健康服务业促进会于2023年发布了《药品分剂量操作规范》团体标准。标准规定了药品分剂量操作的基本要求、操作规程、质量检测、储存与效期管理等内容,特别是在各种分剂量模式上提供了详实可操作的流程,为其提供了工作依据。本文对团体标准的研制背景和主要技术内容进行了详实解读,旨在为标准的宣贯和落地实施提供指导和参考。     

Studies on the interaction of five triazole fungicides with human renal transporters in cells

The widespread use of triazole fungicides in agricultural production poses a potential risk to human health. This study investigates the interaction of five triazole fungicides, i.e., tebuconazole, triticonazole, hexaconazole, penconazole, and uniconazole with human renal transporters, including OAT1, OAT3, OCT2, OCTN1, OCTN2, MATE1, MATE2-K, MRP2, MDR1, and BCRP, using transgenic cell models. For uptake transporters, triticonazole was the substrate of OAT1 and OAT3 and the inhibitor of OCT2. Tebuconazole and penconazole inhibited OCTN2 (100 μM), while tebuconazole, triticonazole, hexaconazole, penconazole, and uniconazole inhibited MATE1 (100 μM). Tebuconazole and hexaconazole inhibited MATE2-K (100 μM). All five triazole fungicides were not substrates or strong inhibitors of MRP2, MDR1, and BCRP efflux transporters. Penconazole inhibited OCT2 with IC₅₀ = 1.12 μM. Penconazole and uniconazole inhibited MATE1 with IC₅₀ = 0.94 μM and 0.87 μM. Tebuconazole and hexaconazole inhibited MATE2-K with IC₅₀ = 0.96 μM and 1.04 μM, indicating that triazole fungicides may inhibit renal drug transporter activity at low concentrations. Triticonazole was transported by OAT1 and OAT3, and the K_m values of triticonazole were 5.81 ± 1.75 and 47.35 ± 14.27, respectively. Tebuconazole and uniconazole were transported by OAT3, and the K_m values of tebuconazole and uniconazole were 30.28 ± 7.18 and 87.61 ± 31.70, respectively, which may induce nephrotoxicity.