戊型肝炎病毒结构区基因的克隆表达及其在诊断中的 …

目的 研制戊型肝炎病毒诊断试剂。方法 利用融合蛋白表达载体ＰＧＥＸ－３Ｘ表达了戊型肝炎病毒第二读码框区（ＯＲＦ２４０２－６６０）优势怕表位，表达抗原溶于水，可利用商品化的谷胱甘肽Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ－４Ｂ亲合层析柱得到纯化的抗原。结果 经应用发现，此基因重组抗原作为酶联免疫试剂的抗原，用于检测血清中戊型肝炎病毒抗体，与新加坡进口试剂盒有高度的一致性。和血清中的抗体反应性更强。结论 预示该基因抗原可能     

Identification of immune genes in grass carp Ctenopharyngodon idella in response to infection of the parasitic copepod Sinergasilus major

The parasitic copepod Sinergasilus major is an important pathogen of grass carp Ctenopharyngodon idella. To understand the immune response of grass carp to the copepod infection, suppression subtractive hybridization method was employed to characterize genes up-regulation during the copepod infection in liver and gills of the fish. One hundred and twenty-two dot blot positive clones from infected subtracted library were sequenced. Searching available databases by using these nucleotide sequences revealed that 23 genes are immune-related, including known acute-phase reactants, and four novel genes encoding proteins such as source of immunodominant MHC-associated peptides (SIMP), TNF receptor-associated factor 2 binding protein (T2BP), poliovirus receptor-related protein 1 precursor, glycoprotein A repetitions predominant (GARP). The differential expression of seven immune genes, i.e. GARP, alpha-2-macroglobulin, MHC class I, C3, SIMP, T2BP, transferrin, as a result of infection was further confirmed by RT-PCR, with the up-regulation of alpha-2-macroglobulin, MHC class I, C3, SIMP and T2BP in the liver of infected fish, and down-regulation of SIMP in the gills of infected fish. The present study provides foundation for understanding grass carp immune response and candidate genes for further analysis.     

汉区少数民族学生文化疏离感研究

目的:提出文化疏离感的操作性定义和初步的理论构想,为我国少数民族的文化认同和文化适应,以及少数民族青少年的教育培养提供比较重要的参考资料,为疏离感理论的丰富起到一定积极作用.方法:自编<汉区少数民族学生文化疏离感量表>,进行信效度考察以后对678名汉区少数民族学生进行调查.结果:1.文化疏离感及其四个子维度在地区主效应上均表现出显著差异,在年龄主效应上差异不显著;文化分离感和不和谐感在性别主效应上差异显著.2.文化疏离感及其两个子维度(文化孤立感和文化分离感)在年龄和地区,以及在年龄、地区和性别的交互作用上均表现出显著差异.3.影响文化疏离感及其文化孤立感、文化分离感、被控感三个维度的主要变量是学生小学前后居住地区的改变,而影响不和谐感的主要变量是性别.结论:小学前后居住地的改变会影响少数民族学生文化疏离感.     

小儿慢性乙型肝炎外周血T细胞亚群和临床病理关系的研究

目的　探讨小儿慢性乙型肝炎细胞免疫功能与临床、病理的关系 ,了解其间的相关性。方法　研究对象为确诊的 94例 12岁以内慢性乙型肝炎住院患儿。常规检测血T细胞亚群等、血丙氨酸转氨酶 (ALT)水平、病毒学指标 ,并进行腹部B超、肝脏病理学检查。结果　有活动性肝脏病理炎症者CD4 CD8 升高 (P <0 0 5 ) ;女性比男性CD4 降低差异有非常显著意义 (P <0 0 1)、CD8 升高差异有显著意义 (P <0 0 5 )、CD4 CD8 降低差异有非常显著意义 (P <0 0 1) ;T淋巴细胞的异常改变与HBVDNA、PTA以及脾脏大小关系不明显。而各项观察的临床、病理指标与CD3 T淋巴细胞、B淋巴细胞均无明显相关性。结论　小儿慢性乙型肝炎患者机体存在细胞免疫功能失衡 ,其相关性表现在肝脏炎症损伤严重程度与T淋巴细胞功能的损伤有明显的相关性 ,女性对HBV的T淋巴细胞反应比男性更有利于清除HBV ,其预后及对抗病毒和免疫调节治疗反应较好。     

双价痢疾菌苗滴鼻免疫小鼠后不同部位淋巴细胞表型的变化

目的:观测双价痢疾工程菌苗滴鼻免疫小鼠后,不同时间、不同部位淋巴组织细胞表型的变化,探讨痢疾菌苗滴鼻免疫对黏膜和系统免疫应答的影响。方法:BALB/c小鼠随机分为3组,每组30只,分别以FSM-2117和FS-5416痢疾菌苗经滴鼻途径免疫小鼠4次,菌量依次为5×106、1×107、4×107和4×107CFU/只,对照组给予PBS,间隔2 wk。4次免疫后7、30和90 d活杀,分离NALT、鼻通道、脾、小肠PP结淋巴细胞,采用流式细胞术检测其淋巴细胞表型的变化。结果:4次免疫后7 d,小鼠鼻相关淋巴组织(NALT)、鼻通道(NP)和Peyer’s结(PP)淋巴细胞中,CD3 T细胞数均显著增加,其中以CD4 T细胞增加为主。FSM-2117免疫组的脾细胞中B220 细胞显著增加;而FS 5416免疫组的脾细胞中CD3 T细胞显著增加。4次免疫后30 d,NALT、NP和脾淋巴细胞仍出现上述变化;而90 d,仅NALT和NP淋巴细胞出现上述同样变化。结论:两株双价痢疾菌苗滴鼻免疫小鼠后,能有效地诱导黏膜和系统免疫应答,且持续时间较长,但该免疫应答的减弱是从距免疫部位较远的部位而开始的。     

逆转录病毒载体介导乙型肝炎病毒反义基因的转录表达

为了探索在真核细胞内转录表达乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）反义核酸的方法，用基因重组技术将ＨＢＶ前Ｃ／Ｃ基因（ＰｒｅＣ／Ｃ）和前Ｓ／Ｓ基因（ＰｒｅＳ／Ｓ）片段反向插入逆转录病毒载体质粒，再将重组体分别转染ＰＡ３１７包装细胞，进而获得能够介导ＨＢＶ反义基因向小鼠ＮＩＨ３Ｔ３细胞转移表达的重组逆转录病毒。经分子杂交试验表明，含有ＨＢＶ反义基因的重组逆转录病毒序列已经整合到转染的ＰＡ３１７细胞染色体上；转导的ＮＩＨ３Ｔ３细胞内有ＨＢＶ反义ＲＮＡ转录表达。结论：逆转录病毒载体包装细胞系统能够介导ＨＢＶ反义基因在真核细胞中转录表达，因而有可能利用反义技术和基因转移方法进行抗－ＨＢＶ基因治疗     

重型肝炎/肝衰竭临床分类的进一步探讨

目的提高对重型肝炎，肝衰竭临床分类的进一步认识。方法回顾分析25l例急性、亚急性肝衰竭患者的临床资料，按照病因分为无肝病基础组（第l组）、肝炎组（第2组）、肝硬化组（第3组）共3组，并对每组中急性、亚急性肝衰竭的实验室检查、肝性脑病的发病率及预后进行统计学分析。结果（1）转氨酶、胆碱脂酶及白蛋白的差异：无论是急性还是亚急性肝衰竭中，无肝病基础组转氨酶、胆碱脂酶及白蛋白均明显高于有肝病基础患者，特别是高于肝硬化组患者（P〈0．05）；（2）肝性脑病的发病率及各等级分布：在l、2、3组中，急性肝衰竭肝性脑病的发病率分别为100．00％，66．23％和51．02％；亚急性肝衰竭分别为71．42％，54．81％和49．99％；（3）在预后方面：在1、2、3组中急性肝衰竭的好转治愈率分别为15．38％、42．85％和26．09％；亚急性肝衰竭患者33．33％、51．39％和36．85％，3组具有统计学差异（P〈0．05）。结论无论是急性还是亚急性发病，3组重型肝炎，肝衰竭患者的临床特点及其预后均有差异，依此进行分类，有其临床实用性及科学性，将能更好的指导临床诊断、治疗和预后判断。     

合成肽抗原抗人免疫缺陷病毒1／2型抗体酶联试剂盒…

根据人免疫缺陷病毒的基因结构和氨基酸序列，采用因相法合成了ＨＩＶ－１ｇｐ４１、ｂｐ１２０、ｐ２４和ＨＩＶ－２ｇｐ３６的４条多肽，混合包被酶标板做为固相抗原，采用间接酶联免疫吸附试验，建立了检测抗－ＨＩＶ－１／２ＩｇＧ抗体的酶联诊断试剂盒。检测卫生部药品和生物制品检定所提供的４１份质控参比血清，其特异性、敏感性均为１００％，变异系数小于１０％。检测１８６份其它病种病人血清均为阴性，与华怡、巴斯德、金     

用RACE技术对一株肠道病毒3''端进行扩增和序列分析

目的 应用3′RACE技术对一株本室分离肠道病毒基因组3′末端进行扩增，并对其核苷酸序列进行比较分析。方法 提取病毒总RNA，以锚定oligdT（17）引物进行逆转录，用特异引物及锚定引物进行3′RACE扩增，将PCR产物进行克隆、测序和序列分析。结果 获得了该病毒的3′端核苷酸序列，同源性分析结果显示该肠道病毒的核苷酸序列与肠道病毒76、89、90、91型的同源性最高为90％左右，而与其他型别的肠道病毒的同源性均小于80％；推导的氨基酸同源性与肠道病毒76、89、90、91型均在90％以上。结论 用RACE技术对肠道病毒3′端进行扩增及序列分析，证明该病毒属新型肠道病毒类，为进一步研究该病毒的分子生物学特性奠定了基础。     

拉米夫定联合胸腺五肽治疗慢性乙型肝炎疗效观察

目的：探索抗病毒药物联合免疫调节药物治疗慢性乙型肝炎的疗效。方法：采用拉米夫定联合胸腺五肽治疗慢性乙型肝炎，同期单用拉米夫定或胸腺五肽作对照，动态观察血清HBV复制指标及肝功能。结果：治疗结束时联合组血清HBeAg阴转及抗HBe阳转率明显优于拉米夫定组（P＜0．05），与胸腺五肽组比较差异无显著性（P＞0．05）；联合组的HBV DNA阴转率优于胸腺五肽组（P＜0．05），与拉米夫定组比较差异无显著性（P＞0．05）。治疗结束后6个月、12个月的病毒复制指标变化与治疗结束时无明显变化。联合组的显效率及总有效率均高于其他两组，且ALT复常率保持在85％以上。结论：拉米夫定联合胸腺五肽治疗慢性乙型肝炎，可达到有效而持续的抗病毒作用。亦有利于ALT持久复常。