人源抗Met基因工程抗体scFv的改造与特性分析

目的:将已制备的抗Met单链抗体基因与人IgG Fc基因片段融合,表达有活性的融合蛋白分子,以增强单链抗体的可溶性.方法:从人淋巴细胞提取总RNA,经RT-PCR扩增并制备人IgG的Fc基因片段,并克隆于已构建好的pBAD-scFv原核表达载体中,转化大肠杆菌Top10,经阿拉伯糖诱导表达融合蛋白scFv-Fc.所表达的可溶性蛋白经亲和层析纯化、SDS-PAGE、Western blot分析鉴定,并用ELISA检测抗体效价.结果:序列分析表明重组质粒pBAD-scFv-Fc基因序列正确;SDS-PAGE分析表明,scFv-Fc融合蛋白分子量为60 ku,且为可溶性蛋白;该蛋白经过His亲和层析纯化、ELISA检测,结果表明,该融合蛋白能够与抗原分子Met特异性结合.结论:改造后的抗体融合蛋白scFv-Fc能与人Met特异性结合,增加了抗体蛋白溶解度,有利于抗体的大量制备.     

乙型肝炎病毒感染者外周血T细胞亚群和穿孔素-颗粒酶变化

目的探讨HBV感染者外周血单个核细胞(PBMC)中T淋巴细胞亚群分布频率及穿孔素和颗粒酶B表达的变化。方法通过细胞表面标记和细胞内细胞因子染色技术,采用流式细胞术分析HBV感染者PBMC中CD4+、CD8+T细胞的分布以及穿孔素和颗粒酶B的表达。结果与正常对照相比,急性和慢性乙肝患者CD4+T细胞百分率无明显改变,CD8+T细胞以及穿孔素和颗粒酶B表达均显著增高(前者P<0.01,后者P<0.05)。HBV携带者CD4+T细胞显著降低(P<0.05),CD8+T无明显改变。三组CD4+/CD8+T比例均显著降低(P<0.05)。结论与HBV携带者不同,急性和慢性乙肝患者CD8+T细胞频数及穿孔素和颗粒酶B表达均明显增高,提示细胞毒T细胞的数量及细胞毒颗粒表达与病毒清除和肝损害相关;急性和慢性患者在增高程度上的差异提示慢性乙肝的细胞免疫和细胞毒反应的不完全。     

C57小鼠发育过程中海马NGF基因转录水平的研究

采用半定量RT－PCR法测定了1，6，12月龄C57小鼠海马βNGF mRNA水平，将β－肌动蛋白基因作为内标。结果表明，6，12月龄两组间无显著性差异，但均显著低于1月龄组，说明C57小鼠发育过程中其海马β NGF基因转录水平明显降低。另外，发现C57小鼠海马β NGF基因第294位碱基为C，与普通小鼠的T不同，但这种碱基差异并不影响氨基酸组成。     

083噬菌体表面展示技术进展

噬菌体表面展示技术(Phage Display Techniques,PDT)是近年发展起来的,将外源肽或蛋白基因与噬菌体表面特定蛋白基因在其表面进行融合表达的新技术.可用来构建肽文库、抗体库,并从中筛选出有价值的活性肽或蛋白.随着该技术的不断发展和完善,已在许多领域得到了广泛应用.     

江苏四地区虻类采集及无锡地区季节消长的调查

通过调查发现江苏地区虻类5属19种。骚扰黄虻、四列斑虻和华广原虻为江苏地区的优势种群,6月份出现次峰,7、8月份为高峰,9月下旬和10月上旬完全消失,其季节消长与虻类传染的疾病密切相关,为防制提供了可靠的科学依据。     

诺毕速灭松和速灭灵对蚊,蝇的灭效观察

诺毕速灭松乳油经实验室试验表明,空间喷雾按6ml/m~3(每m~3含杀螟松30mg和胺菊酯3mg)对淡色库蚊和家蝇的KT_(50)分别为3.27和2.60分钟,24小时死亡率均达100%;经现场按同等剂量处理1～24小时后,能使蚊蝇密度下降87.8～100%。速灭灵经实验室按0.16ml/m~3(含右旋苯醚菊酯4mg/m~3)空间喷雾,对蚊蝇的KT_(50)分别为7.80和4.48分钟,24小时死亡率均达100%;现场按同等剂量处理1～24小时后,蚊蝇密度下降76.4～100%。上述两种杀虫剂对蚊蝇具有很好的击倒作用和杀灭能力。但速灭灵在每m~3仅用4mg时,效果略低于诺毕速灭松杀虫剂。     

环保型白蚁防治制剂1%氟氰苯唑微乳剂的研制及药效

目的 研制一种新型的环保型白蚁制剂——微乳剂，并观察其对白蚁的实验室药效。方法 根据微乳技术原理，筛选研制灭蚁微乳剂的乳化剂和助表面活性剂。通过测定对白蚁的击倒速度，白蚁穿越微乳剂处理土壤的能力，评价微乳剂对于白蚁的药效。结果 所配制的微乳剂对于乳白蚁的击倒速度较快，乳白蚁不能穿越0．025％、0．05％和0．1％氟氰苯唑微乳剂处理的土壤。结论 微乳剂少用有机溶剂，对环境污染小，有利于生产者和使用者的健康，是一种很好的白蚁预防剂型。预防白蚁处理土壤使用浓度为0．025％～0．05％。     

山东省家猪感染肾综合征出血热病毒流行病学调查和实验研究

目的 了解家猪在肾综合征出血热(HFRS)疫区的流行病学意义，探讨家猪与HFRS发病的关系。方法 以HFRS病毒(HFRSV)抗原和抗体为指标，采用反向间接血凝法(RPHA)，血凝抑制法(RPHI)，酶标葡萄球菌A蛋白(HPR-SPA)，间接免疫荧光法(IFA)和PCR反应对山东部分地区家猪自然感染HFRSV的情况进行检测。结果 家猪心、肝、脾、肺、肾等脏器及血、尿、粪和猪圈内污物检出HFRSV抗原与抗体，脏器抗原阳性率为3.33％～5．00％。而血、尿、粪和圈内的污染物抗原阳性率分别为3.67％、7.04％、2．51％和5.56％，血清抗体阳性率为1．96％，并从HFRSV抗原阳性的多种标本分离出病毒。人工感染后病毒可随血液波及多个脏器，二次感染乳鼠脑可检出HFRSV抗原。二次组织病理学检查发现肺、肝、肾等脏器有一过性病理改变;HFRSV可在猪体内增殖．并经多途经排出体外。结论 家猪可能是HFRSV的扩散宿主动物。     

驻海岛某部8个坑道储水水质检测评价

目的 :为了解战备坑道内的储水水质 ,确保战时饮用水的安全、卫生。方法 :对沿海某海岛自然通风坑道的 8个水井储水的感官性状、毒理学、细菌学指标分别进行了检测评价。结果 :(1)感官性状指标 :8个坑道的储水水样颜色均 <15度 ,浑浊度 <3度 ,无异臭及异味 ;(2 )毒理学指标 :氟化物在卫生标准范围内 ,未检出氰化物、砷、汞及 6价铬等 ;(3)细菌学指标 :有 2个坑道水样细菌学总数超标 ,菌落数 >10 0个 /ml,其余 6个水样合格 ,合格率 75 %;有 5个水样大肠菌群 >3个 /L ,仅有 3个水样合格 ,合格率 37 5 %;(4 )总评价 :根据生活饮用水大肠菌群指标要求 ,有 4个水源属一级水源水 ,水质良好 ,1个坑道水质超过二级 ,不宜作为生活饮用水水源。结论 :坑道储水的主要问题是微生物的污染 ,其原因主要是水源注入水及储存期间未采取有效的消毒措施 ,因此 ,对坑道水源要定期消毒和检测 ,加强监督。     

新型脂环驱避剂的合成及驱蚊效果

目的：合成新型脂环驱避剂（R202），观察驱蚊活性。方法：所得样品经元素分析、红外光谱证实其结构；采用强迫接触法、喷雾法，测定驱蚊活性，并进行小白鼠急性口眼毒性实验。结果：10％R202配剂对埃及伊蚊绝对驱避时间为9小时，而同样条件下10％对照化合物Deet配剂为7．5小时。结论：该药剂对蚊虫具有驱避和击倒双重作用，属低毒类。