丙烯氯菊酯水基喷射剂药效观察

目的测定0.5%丙烯氯菊酯水基喷射剂对淡色库蚊、家蝇、德国小蠊的杀灭效果。方法以淡色库蚊、家蝇、德国小蠊为试验对象,对丙烯氯菊酯水剂进行室内药效和模拟现场药效测试。结果该杀虫剂对淡色库蚊的KT50为6.65min,24h死亡率为100%;对家蝇的KT50为4.82min,24h死亡率为100%;对德国小蠊的KT50为9.26min,48h死亡率为100%。模拟现场对淡色库蚊1h击倒率为87.2%,24h死亡率为100%;对家蝇1h击倒率为91.8%,24h死亡率为100%;对德国小蠊1h击倒率为95.0%,48h死亡率为100%。结论丙烯氯菊酯水基喷射剂对淡色库蚊、家蝇和德国小蠊均有较好的击倒和杀灭效果。     

核糖体展示小分子抗体的研究进展

核糖体展示技术是由Plückthun实验室[1]在多聚核糖体展示技术[2]的基础上改进而来的一种利用功能性蛋白相互作用进行筛选的新技术,它将正确折叠的蛋白及其mRNA同时结合在核糖体上,形成mRNA-核糖体-蛋白质三聚体,使目的蛋白的基因型和表型联系起来,可用于抗体及蛋白质文库选择、蛋白质体外改造等。运用此技术已成功筛选到一些与靶分子特异结合的高亲和力蛋白质,包括抗体、多肽、酶等,是蛋白质筛选的重要工具。1核糖体展示技术的基本原理及特点核糖体展示技术通过聚合酶链反应(PCR)扩增DNA文库,同时引入T7启动子、核糖体结合位点及茎-…     

高效液相色谱法同时测定复方甲硝唑片中两主药含量

目的　建立复方甲硝唑片中主药甲硝唑和法莫替丁的含量测定方法。方法　采用高效液相色谱法 ,色谱柱 :SpherisorbC1 8(1 50mm× 4 .6mm ,5μm)不锈钢柱 ,流动相 :pH 3 .0 ,0 .0 5mol·L- 1 磷酸盐缓冲液 乙腈 甲醇 (88∶1 0∶2 ) ,检测波长 2 65nm ,内标法定量。结果　在优化的色谱条件下 ,甲硝唑、法莫替丁和内标氢氯噻嗪间均能完全分离 ,片剂辅料不干扰测定 ,甲硝唑、法莫替丁的线性范围分别为 1 0 0～ 50 0 μg·mL- 1 和 5～ 2 5μg·mL- 1 ,回收率分别为 99.79%和 1 0 0 .6 % ,RSD <1 .5 %。结论　该法专属性强 ,操作方便 ,结果准确 ,重复性好     

肠出血性大肠杆菌O157:H7志贺样毒素2B亚基的表达

目的:克隆肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7 AH07株志贺样毒素2B(Stx2B)亚单位基因,应用原核表达系统制备重组蛋白质.方法:根据靶基因序列设计特异性寡核苷酸引物,采用PCR法克隆EHEC AH07株Stx28的编码基因stx2b,靶基因经TA克隆后连接到表达载体pET-28a构建重组质粒,阳性重组子转化表达宿主菌E. coli BL-21 (DE3)感受态细胞,IPTG诱导目的蛋白表达,应用SDS-PAGE和Western-blot (WB)分析重组蛋白生物活性.结果:PCR扩增stx2b基因约220bp,成功构建重组质粒pET28a-stx2b,并在原核细胞中得到高效表达,目的蛋白质的相对分子质量约为7500,约占蛋白质总量的40%;WB显示目的蛋白质可与特异性抗体发生特异性反应.结论:成功克隆EHEC O157:H7 stx2b基因,在原核系统获得目的蛋白质的高效表达,为O157:H7感染机制及疾病诊断和疫苗研究奠定基础.     

抗菌肽抑制肿瘤细胞的实验研究

昆虫与高等动物不同,它具有独特的防御系统,即高效的无细胞免疫系统.昆虫细胞被感染后引起免疫应答反应,产生一系列的抗菌物质,抗菌物质中最重要是抗菌肽.它具有分子量小、热稳定、水溶性好、抗菌谱广等优点.抗菌肽对真核细胞几乎没有杀伤作用,仅仅作用于原核细胞和发生病变的真核细胞.这可能与细胞膜和骨架上的成分差异有关.随着对抗菌肽的深入研究,人们已经发现一些新型抗菌肽不仅作用于某些细菌、真菌和原虫,而且还作用于某些肿瘤细胞.     

肠出血性大肠杆菌O157:H7和霍乱弧菌的多重PCR检测

目的 建立同时检测肠出血性大肠杆菌(O157：H7)和霍乱弧菌的多重PCR方法,为霍乱和肠出血性大肠杆菌感染的快速诊断提供实验依据。方法 首先选择O157：H7的O抗原(rfbE)、H鞭毛抗原(fliC)基因以及霍乱孤菌外膜蛋白(ompW)和肠毒素A亚单位(ctxA)基因特异的4对引物,分别或共同对O157：H7和霍乱孤菌进行PCR扩增,并以琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物。结果 所有O157：H7菌株均在497bp和625bp处出现O157 rfbE基因和H7 fliC基因扩增产物;霍乱菌株均出现560bp、302bp的ompW和ctxA基因扩增产物,O157：H7和霍乱弧菌共同扩增可出现4条单一条带。结论 选择4对特异引物的多重PCR方法可简便、特异、快速、灵敏地对O157：H7和霍乱弧菌进行同时检测。     

人EPO cDNA基因在CHO细胞中的稳定表达

建立稳定表达人红细胞生成素（ＥＰＯ）的工程细胞株。方法：用 ＤＮＡ磷酸钙共转染法,将人ＥＰＯ ｃＤＮＡ的表达质粒 ｐＣＤＢ与标志质粒 ｐＳＶ－ｄｈｆｒ共转染到 ＣＨＯ－ｄｈｆｒ－细胞中。用 ＥＬＩＳＡ法检测到 ７０个克隆的细胞培养上清,筛选出５０个克隆细胞系。结果：经ＭＴＸ加压扩增,获得４系高效表达ＥＰＯ的细胞系（Ｂ４、Ｃ３、Ｆ１０、Ｇ７）,表达量为 ２． ２～１０ μｇ／（１０６ ｃｅｌｌ· ２４ ｈ）,ＥＰＯ的分泌量在上述细胞系扩增了 １１～３１倍。 Ｆ１０细胞系表达量为最高,并进一步亚克隆纯化。其中Ｆ１０－６亚克隆细胞株的平均表达水平为１０ ｕｇ／（１０６ｃｅｌｌ·２４ ｈ）,细胞冻存后复苏传代１５次,ＥＰＯ的表达水平无明显改变。结论：以Ｆ１０－６亚克隆细胞株建立了工程细胞株。     

扁桃体淋巴细胞分泌IL-2抑制因子的研究

<正> 白细胞介素-2(IL-2)的抗肿瘤作用已有许多动物实验和临床应用结果证实。自1988年6月以来,我们试用以人体扁桃体淋巴细胞经培养产生的天然IL-2(N-IL-2)治疗晚期肿瘤患者取得了较好的效果。在     

康星杀蟑胶饵的连锁药效观察

目的：观察康星杀蟑胶饵对德国小蠊和美洲大蠊的连锁杀灭效果；方法：在灭蟑现场拾取中毒死亡的德国小蠊新鲜死虫(一次中毒)，作为饵料，观察其灭效；结果：一次中毒的死虫能引起蟑螂二次中毒，其中，德国小蠊5d的死亡率可达100％，美洲大蠊8d的死亡率为100％；二次中毒的死虫还能引起蟑螂三次中毒死亡，其中德国小蠊8d死亡率可达55％，美洲大蠊8d死亡率为26．7％；结论：康星杀蟑胶饵有较好的二次杀蟑效果及一定的三次杀蟑效果，其更适合德国小蠊的防制。     

人源化抗CD3单链抗体的构建、序列分析和表达研究

目的构建和表达抗CD3单链抗体,并对其构象进行模拟分析.方法应用重叠延伸拼接法连接抗CD3抗体的轻链可变区基因和重链可变区基因,构建抗CD3单链抗体基因(ScFv),并将其克隆于原核表达载体中表达.结果拼接后的抗CD3ScFv基因全长732bp,构象模拟分析表明其三维结构稳定,兼容性分数S＞0,表达的目的蛋白约26.5kD.结论抗CD3ScFv基因的成功构建,为进一步研究抗CD3/抗乙肝病毒的双特异性抗体奠定了基础.