抗Rh(D)血型抗体制备的研究进展

1　多克隆抗Rh(D)抗体与ABO血型系统不同, Rh阴性个体的血清中没有抗D抗原的天然抗体。Rh阴性个体只有接受Rh阳性个体的血液后, 才可产生Rh(D)抗体。传统的抗Rh(D)抗体是通过筛选人血清而制备的, 以免疫志愿者为主要来源。然而, 并不是所有Rh阴性的志愿者都能产生抗Rh(D)抗体, 一般注入 1个单位的全血, 80%的个体会产生抗体, 而 5mLRh 红细胞只能使 40%的人发生免疫反应 [2]。为维持志愿者体内抗Rh(D)抗体的滴度, 需要对其进行多次免疫。鉴于伦理道德等问题, 目前大多数国家已禁止用D抗原对志愿者进行免疫制备抗Rh(D)抗体 [3]。…     

邻氯-N,N-二乙基苯甲酰胺的合成及药效

目的：合成新驱避剂,并测定其药效。方法：自行合成,并以人体和小白鼠为试验对象,在实验室和野外进行防蚊效果试验。结果：ＫＩＫ合成工艺简便,其１０％酊剂在实验室内涂于人体皮肤防止白纹伊蚊叮咬,１００％保护率为４ｈ,小白鼠为５ｈ;野外１５％酊剂涂于人体皮肤防止蚊虫叮咬,１００％保护率为６ｈ,与ＤＥＴＡ无明显差异。结论：该化合物合成简便,成本较低,防蚊效果较好。     

"十五"期间基层部队卫生防疫工作的几点思考

“九五”期间,基层部队卫生防疫工作取得了显著成绩,但在实践中也暴露出一些问题。针对部队卫生防疫工作存在的主要问题和军队卫生防疫工作的发展趋势,略谈做好“十五”期间基层部队卫生防疫工作的几点思考。目前,基层部队卫生防疫工作存在的主要问题,卫生防疫防念淡薄,指导思想存在一些偏差;规章制度落实不够,管理工作缺乏应有的力度;卫生装备比较滞后,卫生防疫检测水平不够高;缺乏卫生防病宣传教材,官兵自我保健意识不     

我国恙虫病立克次体(恙虫病东方体)分型研究近况

恙虫病立克次体 (Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａｔｓｕｔｓｕｇａｍｕｓｈｉ,Ｒｔ)是恙虫病病原体 ,自从 1931年定名以来 ,陆续发现Ｒｔ流行株 ,得到国际公认的有Ｇｉｌｌｉａｍ ,Ｋａｒｐ ,Ｋａｔｏ ,ＴＡ6 78,ＴＡ6 86 ,ＴＡ716 ,ＴＡ76 3和Ｈ18778个血清型[1] ,而Ｇｉｌｌｉａｍ、Ｋａｒｐ、Ｋａｔｏ三型作为国际标准参照株。 80年代初 ,日本[2 ] 又分离到Ｋａｗａｓａｋｉ、Ｋｕｒｏｋｉ和Ｓｈｉｍｏｋｏｓｈｉ三型。在病原体的研究中 ,流行病学专家关注的问题 ,也就是病原体的分型 ,病原体的分型方法可分为表型分型和基因分型。有关Ｒｔ分型研…     

单兵应急饮水净化消毒剂使用效果观察

目的 观察单兵应急饮水净化消毒剂的净化、消毒效果,为战时饮水提供科学依据。方法 按单兵应急饮水净化消毒剂的使用说明进行操作,以南京市内秦淮河水、某部驻防区域的长江水、安徽省固镇县新马桥乡行洪区某村边水及蚌埠市淮河水为试验对象,余氯用该所研制的余氯比色盒检测,其它指标按《生活饮用水检验规范》(2001)进行。结果按每升水加0．6g药剂、军用水壶盛水90％(水量约0．9L)投加1管(0．5～0．6g)药剂,经2～5min处理后的净化水无色无异臭,浑浊度降到3度以下,细菌总数和大肠菌群均为0。结论 单兵应急饮水净化消毒剂处理时间短,操作简单,能把江、河、湖泊、灾区疫区等野外水源水净化消毒为符合卫生标准的饮用水。     

寨卡病毒E蛋白及第三结构域的原核表达和多克隆抗体制备

目的 在大肠杆菌中克隆表达和纯化寨卡病毒(Zika Virus,ZIKV)包膜糖蛋白(Envelope Protein,E)及第三结构域(Envelope DomainⅢ,EDⅢ),并制备两种免疫原的鼠多克隆抗体。方法 通过Vero-E6细胞培养扩增ZIKV,提取病毒总RNA并反转录为cDNA,利用E和EDⅢ基因的cDNA序列构建原核表达载体pET32a/E和pET28a/EDⅢ,转入E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,采用Ni⁺柱亲和层析法纯化蛋白。以纯化的重组蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,采集抗血清,间接ELISA法测定效价,Western Blot检测特异性。结果 成功表达并纯化重组蛋白E和EDⅢ,获得的多克隆抗体效价均达到1:409 600,Western Blot检测多克隆抗体可特异性识别重组E蛋白和EDⅢ以及天然E蛋白。结论 成功制备出特异性抗寨卡病毒E蛋白和EDⅢ的鼠源多克隆抗体,为深入探索寨卡病毒致病机制、检测方法和免疫策略奠定了研究基础。     

HBcAg肽特异性CD8+T细胞抑制乙型肝炎病毒的体外实验研究

摘要目的观察HBV感染者的HBcAg肽特异性CD8^＋T细胞体外抑制乙型肝炎病毒（HBV）的作用和探讨非溶细胞机制清除病毒的效应分子。方法以HepG2．2．15细胞为靶细胞。用HLA—A匹配的HBcAg肽特异性CD8^＋T细胞克隆（效应细胞）与靶细胞（效靶比例1：50）共同培养,于24h、48h和72h收集培养上清,通过检测其中HBV产物的变化,观察CD8^＋T克隆对HBV的抑制作用。用抗体中和法观察CD8^＋T细胞分泌的IFN-γ被封闭后HBV抑制的变化。结果HBV特异性CD8^＋T克隆与靶细胞共育后,培养上清可检出高水平IFN-γ。共育后对HBsAg、HBeAg和HBV—DNA的最高抑制率分别为54．55％、50．36％和74．55％,均在72h。IFN-γ被抗体封闭后,对HBVDNA的抑制率显著下降,24h和48h分别为6．22％和17．48％。细胞毒活性最高见于24h,15．66％。结论①病毒特异性CD8^＋T细胞对靶细胞中HBV的清除既有溶细胞机制,也有非溶细胞机制参与;②IFN-γ是非溶细胞机制清除病毒的主要效应分子。     

CD8^＋T淋巴细胞非溶细胞功能抑制HepG2．2．15细胞表达HBV的实验研究

目的观察慢性乙肝患者病毒特异性CD8^＋T细胞体外非溶细胞功能抑制HepG2．2．15细胞表达乙型肝炎病毒的作用。方法选择低溶细胞活性的HBcAg肽特异性CD8^＋T细胞克隆（效应细胞）与HepG2．2．15细胞（靶细胞）以1：10共同培养,于24h、48h和72h收集培养上清,通过检测其中细胞因子及HBV产物的变化,观察CD8^＋T克隆对HBV的抑制作用。用抗体中和法观察CD8^＋T细胞分泌的细胞因子被封闭后HBV抑制的变化。结果HBV特异性CD8^＋T克隆与靶细胞共育后,培养上清可检出高水平IFN—γ和少量TNF-α.共育后对HBsAg、HBeAg和HBV-DNA的最高抑制率分别为71．2％、68．5％和78．3％,均在72h。IFN—γ和TNF—α单独和同时被抗体封闭后,对HBV—DNA的抑制率显著下降。对靶细胞的最大细胞毒活性是7．2％（24h）。结论IFN-γ和TNF-α是CD^＋T细胞非溶细胞机制清除病毒的主要效应分子。     

CiaRH生物信息学分析及其在不同猪链球菌血清型中的分布

目的 对猪链球菌2型中二元信号转导系统CiaRH的序列进行分析并评估该系统在不同血清型中的分布。方法 利用生物信息学方法分析其组分蛋白的结构域。PCR及序列分析手段评估CiaRH在不同血清型猪链球菌中的分布情况。结果 比对结果显示,CiaRH同源蛋白存在于链球菌属的不同种细菌中。结构分析发现,在CiaH的N-端包含两个跨膜区,其间的间隔区域发现一个可能用来结合环境信号的PDC结构域;CiaH的C-端为保守的HisKA及HATPase_C结构域。PCR及序列比对结果显示,CiaRH在不同血清型猪链球菌中广泛分布。结论 提示CiaH为胞外感应型组氨酸激酶。在CiaR的N-端为保守的信号接收结构域REC,而C-端为具有DNA结合功能的trans_reg_C结构域。