hHGF转染HepG2细胞后基因表达谱差异筛选

目的:构建hHGF真核表达载体,并在HepG2细胞中表达,筛选其对HepG2细胞的差异表达基因.方法:构建pcDNA3.1(-)-hHGF载体,测序鉴定:转染HepG2细胞后蛋白免疫印迹检测:运用基因表达谱芯片技术,筛选pcDNA3.1(-)-hHGF和pcDNA3.1(-)载体分别转染HepG2细胞后,提取mRNA并逆转录为cDNA,经表达谱芯片分析差异表达基因.结果:构建的表达载体经酶切和测序确定;转染HepG2细胞后hHGF表达经蛋白免疫印迹证实;经20000个基因的表达谱芯片分析发现,其中有430个基因表达水平显著上调,88个基因表达水平显著下调.结论:筛选出HGF转染HepG2细胞后的差异表达基因,对其在肝细胞中多种作用机制研究提供了重要依据.     

重组干扰素α1b（干扰灵）治疗慢性丙型肝炎318例临床疗效观察

本文报道用重组干扰素α1b对慢性丙型肝炎患者进行多中心临床疗效的观察。慢性丙型肝炎患者共318例，其中249例应用干扰素α1b治疗，第1～4周每日肌注30μg，第5～16周隔日肌注30μg，对照组69例。ALT完全应答率分别为163／249例(65．46%)和2／69例(2.90%)，P<0．05；血HCV RNA(PCR法)转阴率分别为48／171例(28．07%)和2／69例(2．90%)，P<0．05。治疗前后两次肝穿活检病理学比较结果表明，两组明显改善者分别为8／19例(42．11％)和0／2例(0％)。干扰素α1b对HCV RNA各型ALT完全应答率Ⅰ型为9／11例(81．82%)，Ⅰ型为11／22例(50．00%)，Ⅲ型为5／7例(71.43%)，Ⅰ型与Ⅱ型的疗效高于Ⅱ型，P<0.05。血HCV RNA(PCR法)转阴率Ⅰ型为7／9例(77．78%)，Ⅰ型为1／11例(9．09%)，Ⅱ型为4／5例(80．00%)，Ⅰ与Ⅲ型的转阴率高于Ⅱ型，P<0．05。干扰素α1h的不良反应有发热伴流感样症状者为70／249例(28．12％)，皮疹，脱发，白细胞减少和血小板减少各2例，各占0．80%，均未影响治疗。总之，干扰素α1b对慢性丙型肝炎患者的ALT复常、HCV RNA转阴和肝活检病理的改善皆有显著疗效，不良反应率比其他重组干扰素α-2α，α-2b步而轻。     

肾综合征出血热2例误诊分析

例1.患者女,28岁。因发热伴头痛5d,于1997-04-05入院。查体:T38.2℃,P89/min,R20/min,BP130/70mm Hg(1mm Hg=0.133kPa)。神志清醒,咽部充血,软腭处有散在淤血点;心肺正常,腹平软,肝脾不大,双肾区叩痛(-)。实验室检查:血WBC8.05×109/L,RBC3.95×1012/L,Hb120g/L,PLT95×109/L,尿蛋白(+)。初步诊断为上呼吸道感染。入院后给予抗感染、退热等治疗,入院3d,无发热,头痛消失,但出现尿少(尿24h为310mL),查尿蛋白(+++),抗HTV-IgM(+),诊断为肾综合征出血热(HFRS)(少尿期),按利尿、导泻等措施处理,入院第7天进入多尿期,住院21d,病愈出院…     

肝脏原发NK细胞淋巴瘤一例

患者男,57岁。因乏力,纳差,尿黄,尿少,进行性腹胀1个月于2004年9月30日入院。2004年8月下旬无明显诱因出现乏力,食欲减退,腹胀,腹痛,尿黄,尿少,每日少于1000ml。当地医院查ALT51U/L,AST168U/L,总胆红素163μmol/L,直接胆红素123μmol/L,γ谷氨酰转移酶807U/L。血常规:WBC8.72×109/L,Hb130g/L,PLT266×109/L。CT示肝脏正常大小,弥漫性改变,脾不大,无腹水。超声心动图:右肺动脉增宽,室间隔增厚,三尖瓣轻度反流。考虑右心衰可疑,给予抗炎、利尿治疗,效果欠佳。腹胀呈进行性加重,体表可触及肝脏下缘逐日下移,1个月来体重下降约5kg。…     

原因不明性肝炎血清蛋白结合蛋白的筛选和鉴定

目的应用噬菌体表面展示技术寻找原因不明性肝炎血清蛋白成分在肝细胞表面的结合蛋白,探讨原因不明性肝炎发病机制。方法将原因不明性肝炎患者血清蛋白作为固相筛选分子,对噬菌体正常人肝细胞T7 cDNA文库进行4轮生物筛选,经噬斑PCR测序,获得原因不明性肝炎血清蛋白结合蛋白的cDNA序列,将其在GenBank中搜索,比对可能与原因不明性肝炎血清蛋白相结合的蛋白。结果筛选出已有功能研究的蛋白9个和未知功能蛋白3个。结论发现了12种可能与原因不明性肝炎血清蛋白结合的肝细胞表面蛋白,为进一步研究原因不明性肝炎的发病机制提供基础。     

综合预测模型FibroTest对慢性乙型肝炎肝纤维化的诊断价值

目的探讨综合预测模型FibroTest对慢性乙型肝炎肝纤维化的诊断价值。方法留取2002年8月至2005年12月北京大学第一医院、安阳市第五人民医院和无锡市传染病医院的123例行肝活检的慢性乙型肝炎患者的血清,检测α2-巨球蛋白、结合珠蛋白、载脂蛋白-AⅠ、记录总胆红素和谷氨酰转肽酶的数值,并根据其结果结合患者的年龄和性别计算出FibroTest的数值。根据肝纤维化分期设定3个判定点,分别为显著纤维化(S2~S4期),严重纤维化(S3~S4期)和肝硬化(S4期)。以肝活检病理结果为金标准绘制出FibroTest的受试者工作特征曲线,计算曲线下面积(AUC),并与用天冬氨酸转氨酶-血小板比值指数(APRI)计算出的AUC进行比较,评价其对慢性乙型肝炎肝硬化的诊断价值。结果123例肝活检患者中S0期25例(20.3%);S1期27例(22.0%);S2期31例(25.2%);S3期29例(23.6%);S4期11例(8.9%),即显著纤维化者(S2~S4期)71例(57.7%),严重纤维化者(S3~S4期)40例(32.5%),肝硬化者(S4期)11例(8.9%)。FibroTest对3个判定点的AUC值分别为0.814(95%CI:0.740~0.888,P<0.01),0.824(95%CI:0.749~0.898,P<0.01),0.723(95%CI:0.575~0.870,P=0.015)。而APRI对3种不同程度肝纤维化的AUC值分别为0.715(95%CI:0.625~0.805,P=0.001),0.725(95%CI:0.631~0.818,P=0.002)和0.646(95%CI:0.497~0.795,P>0.05)。结论Fi-broTest可以准确地估计慢性乙型肝炎患者有无显著纤维化,可使45.5%的患者避免进行肝脏活检,并保证87.5%的诊断准确率。     

血管紧张素原基因5''端核心启动子区(-6)A～G变异与肝硬化相关性

血管紧张素原（AGT）主要在肝脏合成，是肾素-血管紧张素系统的惟一初始底物。AGT基因核心启动子区域位于TATA框与转录起始位点之间，对AGT基因转录表达起重要调空作用。AGT基因转录起始位点上游（-6）位点存在A～G突变，该突变可以直接影响AGT基因基础转录速率。研究表明，AGT（-6）A～G突变与丙型肝炎病毒（HCV）感染后的肝纤维化形成相关。现通过对人血管紧张素原核心启动子区域（-6）A～G的突变分析，探讨慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染后，AGT基因突变与肝硬化发生的关系。     

复方甘草甜素下调细胞周期素依赖性激酶1启动子表达

目的:了解复方甘草甜素调节细胞周期素依赖性激酶 1(CDK1)基因启动子的活性,为甘草甜素的作用机制提供理论依据． pCAT3-basic空载体的12．4倍,是甘草甜素刺激转染pCAT3- CDK1-P的HepG2细胞的9．3倍．结论:复方甘草甜素可以下调CDK1基因启动子的活性,进而下调CDK1基因的表达,为深入了解甘草甜素在肝纤维化和肝癌中的作用机制提供新的分子生物学依据．     

血清转换后的拉米夫定停药后肝炎3例

以往认为 ,拉米夫定治疗后达到ＨＢＶＤＮＡ阴转、ＡＬＴ正常、ＨＢｅＡｇ/抗 ＨＢｅ血清转换的患者 ,继续服药 3～ 6个月 ,仍为显效者 ,可停药。我院门诊使用拉米夫定治疗的患者中 ,有 13例患者在达到上述疗效后停药。但在对这些发生血清转换的患者进行随访的过程中发现 ,其中 3例发生拉米夫定停药后肝炎。例 1:女 ,42岁 ,病案号 :5 13 0 3。ＨＢｓＡｇ阳性 ,伴肝功能反复异常 1年 ,于 1996年 12月 1日到我院治疗。患者 1年来ＡＬＴ波动在 3 5～ 90Ｕ/Ｌ ,但无明显自觉症状。查体 :一般状况好 ,肝掌蜘蛛痣 ( -) ,皮肤巩膜无黄染 ,心肺检查…     

人类免疫缺陷病毒感染者尿液中抗-HIV-1检测

目前 ,我国最常用的检测抗人类免疫缺陷病毒 (ＨＩＶ)抗体的方法是用酶联免疫吸附试验 (ＥＬＩＳＡ)或胶体金的方法检测血清中的抗 ＨＩＶ 1,并以蛋白印迹法 (Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ)加以确证。本研究以血清标本检验确诊的 5 0例ＨＩＶ阳性感染者的尿液标本和 10 0例无ＨＩＶ感染史、经血清检查抗 ＨＩＶ 1阴性的人群的尿液标本作为对照 ,同时进行抗 ＨＩＶ 1的尿液检测 ,对尿检抗 ＨＩＶ 1的灵敏性和特异性作一评价。病例和方法一、病例选择选择 5 0例经血ＥＬＩＳＡ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ确诊为ＨＩＶ的无症状感染者。病例分别来自…