Fas／FasL系统与肝脏疾病

细胞凋亡（Apoptosis)是细胞生命的基本特征之一,是与细胞有丝分裂作用相反的,调节细胞群全相对稳定的一种重要方式,生理状态下的凋亡维持了体内正常细胞的更新和异常细胞的清除,但在病理状态下异常的凋亡又与生物体内多种疾病的发生密切相关,Fas抗原及Fas配体（ＦasL)是细胞表面的两种跨膜蛋白,当某一细胞的Ｆas和另一细胞的ＦasL相结合时,可以导致表达Fas的细胞凋亡,目前已知Ｆas/FasL系统是介导肝细胞凋亡的主要形式,因此Ｆas/FasL的异常与肝脏疾病的关系已成为当今肝病研究的重点之一。     

EBV转化B淋巴细胞中丙型肝炎病毒抗原表达的免疫组化研究

观察丙型肝炎患者外周血单个核细胞（PBMC）体外转化培养后其中是否仍有丙型肝炎病毒（HVC）存在。用EB病毒感染患者HCV阳性PBMC7并使其转化,获得永生化B细胞（EBVTB）。而后,用套式RT-PCR检测培养细胞和上清中的HCV RNA,用免疫组化SP法观察HCV抗原在细胞中的表达,HCV在传代细胞中持续存在,而培养细胞中的HCVRNA负链和培养上清中的HCV间断阳性,免疫组化发现HCVNS3、NS5和C抗原分布于胞细胞膜和核膜周围也可见阳性着色,细胞核阴性。HCV可以在体外EB病毒转化B细胞系中较长时间存在和复制。     

特异性HBsAg-聚白蛋白受体检测方法的建立及在慢性HBV感染中临床意义的观察

聚白蛋白受体(以下简称PHSA受体)通常认为人体感染HBV后,HBsAg及被感染的肝细胞膜上有PHSA受体,其本质是一种蛋白质。自1984年起我所先后建立了检测血清中HBsAg-PHSA的血凝及固相放免方法.血凝法是用PHSA致敏的绵羊红细胞制成血激法试剂。固相放免法采用方法为:     

丙型肝炎病毒E2糖蛋白在哺乳动物细胞中的表达、纯化及初步应用

目的在哺乳动物细胞中表达丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）Ｅ２糖蛋白,并对其进行纯化,研究该蛋白作为抗原检测丙型肝炎患者血清中抗Ｅ２抗体的可行性。方法将中国株ＨＣＶＥ２／ＮＳＩ基因片段克隆到含有６个连续组氨酸的真核表达载体上,转染哺乳动物细胞,表达Ｅ２糖蛋白,经金属和亲和层析（ＩＭＡＣ）纯化后用于ＥＩＡ检测丙型肝炎患者血清中抗Ｅ２抗体。结果哺乳动物细胞中表达的Ｅ２糖蛋白为７．０×１０４,ＩＭＡＣ纯化后纯度达９０．２％。３５份ＨＣＶＲＮＡ阳性标本中,２９份抗Ｅ２抗体阳性（８２．９％）。结论成功利用哺乳动物细胞中表达的Ｅ２糖蛋白建立ＥＩＡ检测抗Ｅ２抗体,并证实Ｅ２糖蛋白有较好的抗原性及敏感性,可用于建立新一代抗ＨＣＶ检测试剂。     

庚型肝炎病毒与丙型肝炎病毒混合感染的初步研究

庚型肝炎病毒 (ＨＧＶ)在健康献血员中主要以携带者形式存在 ,同时也存在于输血后肝炎、非甲～戊型肝炎患者中。为了解ＨＧＶ在北京地区丙型肝炎患者中的感染状况 ,我们采用ＨＧＶ非结构基因 3(ＮＳ3)区逆转录 -套式 -聚合酶链反应 (ＲＴ-ｎｅｓｔｅｄ -ＰＣＲ)方法检测了 80例丙型肝炎患者血清中的ＨＧＶＲＮＡ ,现将结果报告如下。1　材料与方法1 1　标本来源　所有病例选自 1996年 4月～ 1998年 12月北京医科大学人民医院肝病研究所肝炎科门诊及病房病人 ,慢性丙型肝炎患者 80例 ,其中男 42例 ,女 38例 ,年龄 3～ 68岁 ,平均40 7岁。Ｈ…     

肝癌患者HBxAg与Fas/FasL表达的研究

目的：探讨肝癌患者肝组织中 ＨＢｘＡｇ与 Ｆａｓ／ＦａｓＬ的表达状况及血清中 ＨＢＶ Ｘ基因与 Ｆａｓ／ＦａｓＬ的水平。方法：用ＳＰ法对３４例肝癌组织ＨＢｘＡｇ、Ｆａｓ与ＦａｓＬ表达状况进行分析,用ＥＬＩＳＡ法对３０例肝癌、３２例肝硬化及２０例正常人血清ｓＦａｓ与 ｓＦａｓＬ含量进行分析,并用ＰＣＲ法对肝癌与肝硬化患者血清ＨＢＶ Ｘ基因表达进行检测。结果：ＨＢｘＡｇ、Ｆａｓ与ＦａｓＬ在肝癌表达的阳性率分别为９７．０６％、８５．２９％及１００％。阳性信号均主要位于胞浆,且三者可在同一癌组织的相同区域出现阳性染色,Ｒｅｄｉｔ分析示三者的阳性程度无统计学差异（Ｐ＞０．０５）。血清ｓＦａｓ在肝癌、肝硬化与正常人中的含量分别为（７２２．９７±３２１．１３）μｇ／Ｌ、（８０１．９０±４１９．９４）μｇ／Ｌ和（２２４．０７±１４８．２３）μｇ／Ｌ,其中肝癌与肝硬化组显著高于正常人（Ｐ＜ ０． ０１）;血清 ｓＦａｓＬ在肝癌、肝硬化与正常人中的含量分别为（１５２． ２７±７． ９９）μｇ／Ｌ、（ １６２． ９７±１２． ４０）μｇ／Ｌ和（１５４．９９± ６．９６）μｇ／Ｌ,其中肝硬化组含量高于肝癌与正常人（ Ｐ＜０．０１）。血清ＨＢＶ　Ｘ基     

丙型肝炎患者抗E2抗体的初步检测及其意义

为了探讨急、慢性丙型肝炎病人血清抗E2抗体的临床意义．用哺乳动物细胞表达的E2抗原，通过Westernblot检测丙型肝炎病人血清中抗E2抗体。结果37份急慢性丙型肝炎病人血清抗E2抗体在HCVRNA阳性者中检测为59.5％，其中急性患者中检出率为30％，慢性患者中检出率为70．3％。提示抗E2抗体可以作为检测HCV感染有价值诊断指标之一。