温度调控对人参皂苷积累及其关键酶基因表达的影响

目的探究温度调控对人参皂苷积累及其合成途径关键酶基因表达量的影响。方法以培养23 d人参愈伤组织为实验材料,置于5、10、15、20、25、30℃6个培养箱中恒温培养,每天取样1次连续取样8 d,测定干、鲜质量和皂苷含量,确定响应敏感温度,以GAPDH为内参基因,real-timePCR检测皂苷合成途径中9个关键酶3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR2)、法尼基焦磷酸合成酶(FPS)、角鲨烯合成酶(SS1)、角鲨烯环氧酶(SE1)、达玛烷二醇合成酶(DS-Ⅱ)、β-香树素合成酶(PNY1)、β-香树素C-28位羟基化酶(CYP716A52v2)、原人参三醇合成酶(CYP716A53v2)、原人参二醇合成酶(CYP716A47)基因表达量。结果 20℃为人参愈伤组织干、鲜质量积累最佳温度,5、10、15℃皂苷含量2～3 d达到最大值,5℃为人参皂苷积累响应敏感温度,与对照组差异显著,人参皂苷Re、Rg1和总皂苷分别为对照组1.93、11.93和1.54倍。HMGR2、SS1、DS-Ⅱ、SE1和CYP716A52v2基因表达量在低温2～4d均达最大值,为对照组2.8、1.6、3....     

《中国药典》2020年版软体动物门药用动物养殖研究进展

分析《中华人民共和国药典》（以下简称《中国药典》） 2020年版软体动物门药用动物养殖的研究现状,为软体动物门药用动物养殖情况提供参考。通过统计《中国药典》 2020年版对软体动物门药用动物的收载情况,以及通过比较近年来文献报道的药用动物的养殖状况,对收载动物的地理分布与栖息环境,生活习性与活动规律,养殖技术中养殖方法与设施、饲养饵料、疾病防治进行分类对比。《中国药典》 2020年版共收载软体动物门7类,其中包括药用动物19种,具有养殖情况的有12种,药用部位是外壳（石决明、蛤壳、瓦楞子、牡蛎）、珍珠（珍珠母、珍珠）或内壳（海螵蛸）。《中国药典》 2020年版较2015年版所记载软体动物门中药用动物的养殖情况有所增加,其中皱纹盘鲍、三角帆蚌养殖技术成熟,文蛤、青蛤、金乌贼、泥蚶、长牡蛎的养殖达到扩养状态,无针乌贼、毛蚶、近江牡蛎是试养状态。为软体动物门药用动物的可持续发展提供保证和基础。     

中医学关于非酒精性脂肪肝研究

随着生活品质的提高,非酒精性脂肪肝患者的患病率日益增加,现代医学尚无针对性用药,文章搜集了近五年中医药关于非酒精性脂肪肝的相关报道,总结了脂肪肝的中西医发病机制,论述了中医内外治法.中医学通过调节肝脾肾三脏,疏通经络气血运行,减少痰瘀化生,同时拮抗炎症损伤、抑制氧化应激,进而保护肝细胞,提高临床疗效.     

植物外泌体样纳米囊泡的研究进展

植物外泌体样纳米囊泡（plant exocrine-like nano-vesicles,PELNs）是一种新兴的纳米治疗剂及传递平台,不但具有疾病治疗潜力,而且可以作为药物的载体靶向疾病位点,起到治疗递送双重作用,更重要的是PELNs具有绿色天然和低免疫原性等特点。本综述系统介绍了PELNs的外囊阳性细胞器、多囊泡体、液泡和自噬小体几种分泌机制;脂质、蛋白质和核酸3种组成成分;离心法、超滤法、尺寸排阻色谱法、流场-流分馏法、免疫磁珠法、聚合物沉淀法等分离方法及其抗炎、抗肿瘤、保护再生、抗病毒、保肝等生物学功能,整理了PELNs作为治疗剂及分子传递平台目前已发现的潜在机制,提出了PELNs研究过程中存在的产量化、机制研究及临床试验少等问题,并展望了其未来的发展潜力。     

四君子汤对D-半乳糖衰老模型小鼠心、肝、脑组织MDA含量及端粒酶活性的影响

目的 研究四君子汤(SJ)对D-半乳糖(D-gal)衰老模型小鼠心、肝、脑组织丙二醛(MDA)含量及端粒酶活性的影响。方法 60只小鼠分为5组,除正常对照组外其余4组采用10％的D-gal0．01g／g注射于小鼠颈背部皮下,每日1次,连续6周,建立小鼠衰老模型;于造模同时,3个给药组(低、中、高剂量)分别按6g／(b·d)、12g／(kg·d)、24g／(kg·d)的药量(容积为0．2m1／10g体重)喂饲四君子汤,连续用药6周;正常对照组和模型对照组喂饲同体积的蒸馏水。TBA比色法检测小鼠心、肝、脑组织MDA含量;PCR-ELISA法检测小鼠心、肝、脑组织端粒酶活性。结果 与正常对照组相比,模型对照组小鼠心、肝、脑组织MDA含量明显增加(P<0．01),心、肝脏组织端粒酶活性明显降低(P<0．01),脑组织端粒酶活性无明显变化(P>0．05);与模型对照组比较,3个给药组小鼠心、肝、脑MDA含量明显减少(P<0．01),低、中剂量给药组小鼠心脏组织端粒酶活性有升高的趋势,但差异不显著(P>0．05),高剂量给药组小鼠心脏组织端粒酶活性明显升高(P<0．05);3个给药组小鼠肝组织端粒酶活性均无明显变化(P>0．05);低、中剂量给药组小鼠脑组织端粒酶活性无明显变化(P>0．05),高剂量给药组小鼠脑组织端粒酶活性明显升高(P<0．01)。结论 四君子汤能拮抗自由基损伤,减少D-gal衰老模型小鼠心、肝、脑组织MDA含量,并能提高其心、脑组织端粒酶活性,但对肝组织端粒酶活性无影响。     

川芎嗪与黄芪甲苷配伍对人脐静脉内皮细胞血管生成的作用及机制探讨

目的研究川芎嗪与黄芪甲苷配伍对缺氧诱导损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的增殖的影响及机制。方法建立HUVECs缺氧损伤模型,将细胞分为5组,对照组、模型组、川芎嗪(80μg/mL)组、黄芪甲苷(40μg/mL)组及川芎嗪(80μg/mL)+黄芪甲苷(40μg/mL)组,MTT法检测川芎嗪、黄芪甲苷及其配伍对缺氧损伤HUVECs增殖的影响;免疫组化法检测缺氧损伤HUVECs细胞VEGF、Ang-II蛋白表达,Western blotting检测VEGF和Ang-II蛋白的表达,RT-PCR检测VEGF和Ang-II mR NA表达。结果与模型组相比,川芎嗪与黄芪甲苷均能提高细胞存活率,川芎嗪与黄芪甲苷配伍组具有极显著差异(P0.001);川芎嗪与黄芪甲苷配伍提高VEGF、Ang-II蛋白表达。同时,川芎嗪与黄芪甲苷配伍组能上调VEGF和Ang-II mR NA的表达(P0.001)。结论川芎嗪与黄芪甲苷配伍可能通过增加血管生成靶向因子VEGF和Ang-II的表达发挥促进血管生成的作用。     

(−)-Patchouli alcohol protects against Helicobacter pylori urease-induced apoptosis,oxidative stress and inflammatory response in human gastric epithelial cells

(−)-Patchouli alcohol (PA), the major active principle of Pogostemonis Herba, has been reported to have anti-Helicobacter pylori and gastroprotective effects. In the present work, we aimed to investigate the possible protective effect of PA on H. pylori urease (HPU)-injured human gastric epithelial cells (GES-1) and to elucidate the underlying mechanisms of action. Results showed that pre-treatment with PA (5.0, 10.0, 20.0 μM) was able to remarkably ameliorate the cytotoxicity induced by 17.0 U/mg HPU in GES-1 cells. Flow cytometric analysis on cellular apoptosis showed that pre-treatment with PA effectively attenuated GES-1 cells from the HPU-induced apoptosis. Moreover, the cytoprotective effect of PA was found to be associated with amelioration of the HPU-induced disruption of MMP, attenuating oxidative stress by decreasing contents of intracellular ROS and MDA, and increasing superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT) enzymatic activities. In addition, pre-treatment with PA markedly attenuated the secretion of nitric oxide (NO) and pro-inflammatory cytokines such as interleukin-2 (IL-2), interleukin-4 (IL-4) and tumor necrosis factor-α (TNF-α), whereas elevated the anti-inflammatory cytokine interleukin-13 (IL-13) in the HPU-stimulated GES-1 cells. Molecular docking assay suggested that PA engaged in the active site of urease bearing nickel ions and interacted with important residues via covalent binding, thereby restricting the active urease catalysis conformation. Our experimental findings suggest that PA could inhibit the cellular processes critically involved in the pathogenesis of H. pylori infection, and its protective effects against the HPU-induced cytotoxicity in GES-1 cells are believed to be associated with its anti-apoptotic, antioxidative, anti-inflammatory and HPU inhibitory actions.     

Effects of platycodin D on IL-1β-induced inflammatory response in human osteoarthritis chondrocytes

Platycodin D (PYD), a major saponin derived and isolated from the roots of Platycodon grandiflorum, has been reported to have anti-inflammatory and anti-tumor effects. The present study aimed to investigate the effects of PYD on IL-1β-stimulated human osteoarthritis chondrocytes. Chondrocytes were treated with PYD 1 h before IL-1β treatment. The levels of MMP1, MMP13, IL-8, RANTES, PGE2, and NO were measured in this study. The expression of LXRα, NF-κB, and IκBα were detected by western blot analysis. The results showed that PYD significantly inhibited IL-1β-induced MMP1, MMP13, IL-8, RANTES, PGE2, and NO production. PYD also suppressed IL-1β-induced NF-κB activation. Furthermore, the expression of LXRα was up-regulated by PYD in a dose-dependent manner. In addition, LXRα siRNA inhibited the effects of PYD on MMP1, MMP13, PGE2, and NO production in human osteoarthritis chondrocytes. In conclusion, these results suggested that PYD attenuated IL-1β-induced inflammatory response in osteoarthritis chondrocyte by activating LXRα.     

葛根先煎时间对升麻葛根汤中的葛根素含量及药效学的影响

目的：通过研究不同时间煎煮葛根对升麻葛根汤中的葛根素含量及药效学的影响,探讨葛根的最佳煎煮时间,为葛根的特殊煎煮方法的临床应用提供理论依据。方法：采用高效液相色谱（HPLC）法测定不同时间煎煮葛根对升麻葛根汤中的葛根素含量影响。色谱条件：Agilent 5 TC-C₁₈柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）;流动相为甲醇-水（25：75）,流速为1 mL·min^-1,检测波长为250 nm,柱温30℃。采用氨水诱咳法和热板法观察不同时间煎煮葛根的升麻葛根汤对小鼠的镇咳作用和镇痛作用的影响。将ICR小鼠（雌性180只,雄性60只）随机分为12组,即空白对照组、感冒疏风胶囊组、阿司匹林肠溶片组、不同煎煮时间的升麻葛根汤9组（葛根先煎0,5,10,15,20,25,30,35,40 min）,按照0.02 mL·g^-1剂量分别灌胃给药,连续7 d。镇咳实验各组小鼠（雌雄各半）末次给药1 h后,将小鼠放入雾化器中,观察和记录各组小鼠的咳嗽潜伏期（首次开始咳嗽的时间）和2 min内咳嗽次数。镇痛实验各组小鼠（雌性）末次给药1 h后,将小鼠放置于（55±0.5）℃的智能热板仪上,记录其足底接触热板到出现舔足或跳跃的时间（热板反应潜伏期）。结果：在0.02~0.12 mg范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0.999 6）;葛根先煎15 min时葛根素含量为43.6 mg·g^-1,含量最高。与空白对照组比较,葛根先煎10,15,20,25 min组可使小鼠咳嗽潜伏期明显延长（P<0.01,P<0.05）,葛根先煎15、20 min组可使小鼠咳嗽次数减少（P<0.05）;葛根先煎10,15,20 min时,小鼠痛阈时间明显延长（P<0.05）。结论：葛根素含量测定结果表明,葛根在先煎15 min时,葛根素的含量最高,煎煮时间过短,葛根素不能充分溶出,煎煮时间过长,葛根素含量下降;药效学实验结果表明,葛根在先煎15 min时,升麻葛根汤对风寒表证的镇咳、镇痛作用显著。提示,葛根入汤剂应先煎15 min为宜。     

《中国药典》2020年版两栖纲药用动物养殖研究进展

分析《中华人民共和国药典》（以下简称《中国药典》） 2020年版两栖纲药用动物养殖的现状,为现代药用动物养殖技术研究提供依据。统计《中国药典》 2020年版两栖纲动物药的收载情况、含有两栖纲动物药的中成药品种。对收载动物的地理分布与栖息环境,生活习性与活动规律,养殖技术中养殖方法与设施、饲养饵料、疾病防治进行分类对比论述。《中国药典》 2020年版共收载两栖纲药用动物2种,分别为蟾蜍和林蛙。含有蟾酥的成方制剂和单味制剂数量为14种,占0.87%。《中国药典》 2020年版所载两栖纲药用动物蟾蜍养殖评估为扩养,林蛙养殖评估为成熟。