SHIP1 基因过表达非小细胞肺癌细胞系的建立及其对细胞增殖能力的影响

目的：观察SHIP1 对NSCLC细胞增殖的影响。方法：由NCBI Gene 数据库查询获得人SHIP1 基因CDS区,插至载体pTSB-CMV-MCS-SBP-3Flag-EGFP,构建SHIP1 真核过表达质粒;进一步利用其构建SHIP1 过表达慢病毒。用该慢病毒感染A549、SPCA-1 和PC-9 细胞株,获得SHIP1 稳定过表达NSCLC细胞系。Western blotting 和qRT-PCR分别从蛋白水平和mRNA水平检测SHIP1 的表达变化。采用MTT法和克隆形成实验检测过表达SHIP1 的PC-9 细胞增殖活力和克隆形成能力。Western blotting检测AP-1 蛋白复合体各组分的表达。结果：SHIP1 真核过表达质粒经测序证实构建成功。稳定过表达SHIP1 的A549、SPCA-1 和PC-9 细胞,在荧光显微镜下可见均一表达绿色荧光。与阴性对照组比较,细胞中SHIP1 在mRNA（P<0.01）及蛋白水平均明显升高。在PC-9 细胞中,过表达SHIP1 使细胞增殖、克隆形成能力降低（均P<0.01）,p-c-Jun、FosB 等表达降低。结论：成功构建了稳定过表达SHIP1 的A549、SPCA-1和PC-9 细胞模型;过表达SHIP1可通过抑制AP-1 家族蛋白抑制NSCLC细胞增殖能力。     

Popdc2表达下调通过Akt磷酸化促进新生大鼠心肌细胞增殖

目的:探讨Popdc2对新生大鼠心肌细胞增殖作用及其机制?方法:分离出生后第0?7?14天大鼠心脏组织,荧光定量逆转录-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测心脏组织中Popdc2 mRNA表达情况?分离出生后0~2 d SD大鼠原代心肌细胞和成纤维细胞,qRT-PCR检测Popdc家族mRNA在心肌细胞表达情况?Popdc2 mRNA在心肌细胞和成纤维细胞表达情况;大鼠原代心肌细胞分别转染阴性对照小干扰RNA(NC组)和Popdc2特异性小干扰RNA(si-Popdc2组),EdU实验?Ki67染色检测心肌细胞增殖,免疫荧光检测心肌细胞特异性蛋白辅肌动蛋白(actinin)和心肌钙蛋白2(TNNT2)表达,qRT-PCR检测转染小干扰RNA后心肌细胞Popdc2及转录因子TBX20?TBX5 mRNA表达?增殖抗原蛋白Ki67 mRNA表达情况,Western blot检测总Akt及磷酸化Akt蛋白表达水平?结果:① Popdc家族中Popdc2 mRNA在心肌细胞表达最高(P均<0.01),且随着出生后天数增加Popdc2表达逐渐升高(P均<0.01),Popdc2 mRNA在心肌细胞表达高于成纤维细胞(P < 0.05);②与对照组相比,沉默Popdc2可促进原代心肌细胞DNA合成(P < 0.05),并增加Ki67阳性心肌细胞数量(P < 0.05);③qRT-PCR显示沉默Popdc2可上调转录因子TBX20(P < 0.01)?TBX5(P < 0.05)的mRNA表达,沉默Popdc2促进Ki67的mRNA表达 (P < 0.05),Western blot结果显示沉默Popdc2可促进Akt蛋白磷酸化,Akt308(P < 0.05),Akt473(P < 0.001)?结论:Popdc2表达下调可能通过调节转录因子表达及Akt蛋白磷酸化促进新生大鼠心肌细胞增殖,Popdc2 有可能成为心肌损伤后修复和再生治疗靶点?     

CIK细胞治疗晚期恶性肿瘤72例的护理

目的探讨晚期恶性肿瘤患者应用CIK细胞治疗的护理体会.方法72例晚期恶性肿瘤患者CIK细胞治疗时做好患者的心理护理,加强回输时、回输后不良反应的观察并采取相应的措施及护理.结果72例患者中,6例出现不良反应,50例精神、饮食、睡眠、免疫力等均有不同程度改善,16例自觉症状无明显改善.结论 CIK细胞治疗前充分的心理护理及在回输时、回输后的有效护理措施,可保证治疗顺利进行,提高治疗效果,改善临床症状,提高生活质量.     

前S1抗原与乙肝五项标志物不同模式的相关性分析

<正>乙型肝炎病毒(HBV)前S1抗原(Pre-S1)是Dane颗粒的衣壳蛋白之一[l]。Pre--S1抗原在HBV的感染、复制及转归中都起着重要的作用,通过对Pre--S1抗原和乙肝5项标志物不同模式的相关性分析,     

DC/肿瘤融合细胞疫苗制备规范化研究

树突状细胞（dendritic cells,DC）是目前所发现的功能最强的专职抗原呈递细胞（antigen presenting cell,APC）,在激活静息T细胞产生抗肿瘤反应方面发挥着重要的作用。正因为如此,DC肿瘤疫苗的研究和应用倍受人们的关注,其中一种新型的DC肿瘤疫苗引发了研究者们的极大兴趣——DC／肿瘤融合细胞疫苗,其既表达肿瘤的所有抗原成分,     

超重和肥胖人群幽门螺杆菌感染与代谢指标的相关性研究

目的:探讨超重和肥胖人群幽门螺杆菌(Hp)感染与血脂、血糖及血压等代谢指标的相关性。方法:回顾性分析2022-01-2022-10在本院健康管理中心进行体检的759名超重和肥胖人员,根据¹⁴C-尿素呼气试验的结果将其分为Hp阳性组(247名)和Hp阴性组(512名),观察比较两组人员血压、血糖、血脂相关指标的差异,并应用Logistic回归模型分析影响Hp感染的危险因素。结果:Hp阳性组收缩压(SPB)、空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平明显高于Hp阴性组(P<0.05);Hp阳性组SPB、FBG、TG异常率高于Hp阴性组(P<0.05),Logistic逐步回归分析结果显示,SPB是Hp感染的独立影响因素(P<0.05)。结论:Hp感染会加重超重和肥胖人群糖脂代谢紊乱以及血压升高,而SPB的升高也是Hp感染的重要影响因素。     

MicroRNA与黑色素瘤转移相关性研究进展

黑色素瘤（melanoma）是一种侵袭性强的皮肤肿瘤,近年来随着发病率明显上升,逐渐成为常见恶性肿瘤。其进展迅速,极易转移,临床预后极差,严重危害人类健康。早期黑色素瘤主要通过手术切除治疗,但是对于晚期转移性黑色素瘤,目前治疗手段收效甚微。转移性黑色素瘤对放化疗疗效不明显,     

浅静脉留置针穿刺方法探讨

目的探讨浅静脉置管的改进方法,提高置管成功率,减少患者痛苦。方法采用随机抽样的方法将100例患者随机分成实验组（48例）和对照组（52例）,分别采用改进方法和传统方法进行静脉置管操作,比较两组的置管成功率。结果实验组一次置管成功率达97.9%（46/48）,对照组一次置管成功率仅为76.9%（40/52）,差异具有统计学意义（χ2=11.375,P〈0.01）。结论改进的浅静脉置管方优于传统方法值得临床推广。     

TIL细胞临床制备规范化研究

肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）是继淋巴因子激活的杀伤细胞（LAK）之后的第二代抗肿瘤免疫活性细胞。大量实验证实TIL体外活化扩增后具有显著的抗肿瘤作用,诸多临床试验也表明TIL细胞较LAK细胞具有更高的杀瘤活力和更好的靶向性。然而令人遗憾的是,TIL细胞作为一种特异性免疫活性细胞,尽管其用于肿瘤治疗已有20多年的历史,至今国内外还没有关于TIL细胞活化培养的统一技术规范。为此,我们结合各大实验室（包括本实验室）的制备经验,对TIL细胞培养的技术规范进行探讨,以保证其医疗质量和医疗安全。