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81.
轮状病毒VP4蛋白与肠产毒性大肠杆菌热稳定肠毒素蛋白的融合表达 总被引:3,自引:0,他引:3
利用DNA重组技术将轮状病毒(Rotavirus RV)VP4蛋白主要抗原编码区基因与产肠毒素大肠杆菌(Enteotoxigenic Escherichia coli ETEC)热稳定肠毒素(Heat-stable enteotoxin Escherichia coli ST)基因融合,插入原核表达质粒pET-28a( )中,经PCR、酶切、测序分析表明已将vp4-st片段克隆入PET-28a( ),而且具有正确的读码框和方向性,正确构建了VP4-ST的融合表达载体pET28-VP4-ST。表达质粒转化受体菌BL21(DE3)plysS,取经IPTG诱导后表达的目的蛋白进行SDS-PAGE、凝胶薄层扫描分析。结果表明:表达的目的蛋白以包涵体的形式存在,大小约40.2kDa,表达的蛋白量占菌体总蛋白的13.048%。 相似文献
82.
目的研究类叶升麻苷对谷氨酸诱导的PC12细胞损伤的影响。方法将PC12细胞分为正常对照组、模型对照组、阳性药组和类叶升麻苷给药组。除正常对照组外,其余各组均以1.5 mmol·L-1谷氨酸处理24 h,再分别以10 μmol·L-1维生素E 和15.625,31.25,62.5,125,250 μmol·L-1类叶升麻苷作用。通过倒置显微镜观察细胞形态,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞存活率,酶标法试剂盒测定乳酸脱氢酶(LDH)活性,硫代巴比妥酸(TBA)法试剂盒测定丙二醛(MDA)含量,WST[2 (4 碘苯基) 3 (4 硝基苯基) 5 (2,4 二磺酸苯基) 2氢 四唑盐,二钠盐]法试剂盒测定超氧化物歧化酶(SOD)活性,酶联免疫吸附法(ELISA)检测胞内活性氧(ROS)含量。结果与模型对照组比较,除类叶升麻苷Ⅰ组(15.625 μmol·L-1AS)以外,其余各类叶升麻苷给药组均可明显改善PC12细胞形态,提高细胞存活率和SOD酶活性(P<0.01),抑制LDH活性及MDA和ROS生成(P<0.01或P<0.01)。结论类叶升麻苷对谷氨酸诱导的PC12细胞损伤具有保护作用。 相似文献
83.
目的构建小鼠巨噬细胞半乳糖特异性凝集素(GSL)靶向的RNAi质粒载体,研究其对小鼠和巨噬细胞GSL基因表达的沉默作用。方法根据GSL核苷酸序列,合成3条特异性双链小干扰RNA(siRNA)分子,退火形成双链,分别连接到RNAi-Readyp SIREN-RetroQ-ZsGreen Vector,转化大肠杆菌得到阳性克隆,经测序鉴定确认siRNA载体构建成功后,转染小鼠巨噬细胞RAW264.7及尾静脉注射BALB/c小鼠,应用实时定量PCR和免疫组化法评价siRNA载体对小鼠和巨噬细胞GSL基因表达的抑制作用。结果 siRNA载体对小鼠体内GSL基因的抑制率为84-96%,对巨噬细胞GSL基因的抑制率可达61.98%~83.02%。结论构建的siRNA载体能有效抑制目的基因在体内外的表达,该结果为分析半乳糖特异性凝集素在布鲁氏菌侵染过程中的功能奠定了基础。 相似文献
84.
目的研究内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因894G/T多态性与新疆维吾尔族人群心肌梗死的相关性。方法选取新疆维吾尔族心肌梗死患者191例和165例对照者,采用Taqman实时荧光定量聚合酶链反应检测eNOS基因894G/T多态性,分析894G/T多态性与新疆维吾尔族人群心肌梗死的关系。结果维吾尔族心肌梗死组及对照组的等位基因频率及各基因型均未发现差异有统计学意义(P>0.05)。结论 eNOS基因894G/T多态性与新疆维吾尔族人群心肌梗死可能无相关性。 相似文献
85.
经皮椎体成形术中骨水泥注射量与分布的生物力学研究 总被引:3,自引:0,他引:3
目的:明确低量的骨水泥灌注对于椎体生物力学性能的影响以及骨水泥的偏侧分布是否增加了椎体向未强化侧塌陷的风险。方法:自4具老年尸体取得胸腰段脊柱标本(T8-L3)。将标本游离成单个椎体,用材料试验机前屈加载,制成椎体压缩骨折模型。经2ml或4ml骨水泥中位或偏侧注射强化后,对椎体再度压缩获得强度与刚度数据。初始、压缩后和再度压缩后椎体的前后左右高度均被测得。结果:注入骨水泥后椎体强度均得到了恢复,而注射4ml骨水泥后的强度明显高于初始水平。刚度均未能得到相应的恢复,但4ml组刚度恢复的程度明显高于2ml组。椎体的高度在强化后与最终压缩后的变化比较差异无统计学意义。结论:低量的骨水泥灌注可以恢复椎体的强度,不能恢复椎体的刚度。骨水泥的偏侧分布未增加椎体向偏侧塌陷的风险。 相似文献
86.
医学院新生心理压力状况调查分析 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:了解医学院新生心理压力现状及其影响因素,为开展医学院新生心理教育提供依据。方法:采用《中国大学生心理应激量表》对石河子大学医学院2008级555名新生的心理压力状况进行问卷调查分析。结果:医学院新生学习压力状况高于全国大学生常模;男生较女生容易出现发展方面的心理压力;农村生源学生较城镇生源学生容易出现生活、社交、家庭方面的心理压力;非独生子女在社交、家庭方面比独生子女心理压力较大。结论:应有针对性地在医学院新生中开展心理健康教育,减轻他们的心理压力,以提高适应能力。 相似文献
87.
88.
武汉市啮齿动物中汉坦病毒分子流行病学研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的研究湖北省武汉市啮齿动物中汉坦病毒(Hantavirus)流行情况及病毒型别。方法采用间接免疫荧光法(IFA)检测鼠肺中HV抗原;用逆转录聚合酶链式反应(RT—PCR)法扩增阳性样品中HV的部分S片段及部分M片段;构建系统发生树进行系统发生分析及分型。结果在武汉市肾综合征出血热(UVaS)疫区共捕获啮齿动物231只。在9份鼠肺样品中检测到HV抗原,其中5只为褐家鼠,2只为黄胸鼠,2只为小家鼠,病毒携带率为3.90%。用汉城型病毒(SEOV)特异性引物从7份HV抗原阳性样品中扩增出部分S片段(620~999nt)及部分M片段(2001~230Int)井测定序列。对扩增出的部分S片段和M片段核苷酸序列分析表明,7株病毒与Genebank已提交的SEOV有很高的同源性,均为SEOV。但在用部分S片段及部分M片段核苷酸序列所构建的系统发生树上,7株病毒的聚集模式不同。结论武汉市啮齿动物携带S1和S4亚型汉坦病毒,表现出SEOV在同一地区的遗传多样性。 相似文献
89.
90.
多媒体技术在教学使用中的问题及对策 总被引:8,自引:0,他引:8
本文对多媒体技术在使用过程中普遍存在的问题进行了分析,并提出了具体的改进措施。 相似文献