环氧合酶-2和血管内皮生长因子共表达与肝细胞癌血管形成的关系

目的　探讨环氧合酶 (COX) 2与肝细胞癌血管形成的关系。方法　利用免疫组织化学、Westernblot方法检测 48例肝癌组织中COX 2和血管内皮生长因子 (VEGF)蛋白及逆转录 聚合酶链反应法 (RT PCR)检测COX 2和VEGFmRNA的共表达 ,对共表达COX 2和VEGF蛋白和mRNA的肝癌组织进行微血管记数。结果　免疫组织化学检测中 ,48例肝癌组织 3 6例共表达COX 2和VEGF蛋白。类似结果见于蛋白电泳分析。RT PCR显示 ,48例肝癌组织 3 6例共表达COX 2mRNA和VEGFmRNA。两者之间的表达明显相关 (γ =0 .845 )。共表达COX 2和VEGF蛋白和mRNA的肝癌组织中 ,平均微血管数 (5 6.8± 17.5 )个 ,明显高于阴性表达组。结论　COX 2可能与肝细胞癌的血管形成有关 ,且其作用之一可能是通过上调VEGF通道来发挥的     

CS-3000 plus血细胞分离机在治疗性血液成分单采中的临床应用

【目的】观察应用CS-3000plus血细胞分离机进行治疗性血液成分单采的临床疗效，分析影响血液成分单采效果的相关因素。【方法】对87例患者应用CS-3000plus血细胞分离机进行161次治疗性血液成分单采，分析临床效果和实验室指标的改善情况。【结果】应用CS-3000plus血细胞分离机进行血浆置换后，71．43％患者临床症状、体征或者实验室指标取得明显改善。相关分析提示，进行治疗性血细胞成分单采患者的白细胞、血小板、红细胞、血红蛋白、红细胞比容下降值与采前相应初始值均呈正相关（P〈0．05）。白细胞单采术的患者白细胞计数下降值与处理全血量呈正相关（P〈0．05），在处理血量达到5000～7000ml时，血小板单采术患者血小板计数下降值与处理全血量无明显相关性（P〉0．05）。当处理全血量达到500～800ml时，红细胞单采术患者红细胞、血红蛋白、红细胞比容下降值与处理全血量无明显相关性（P〉0．05）。【结论】应用CS-3000plus血细胞分离机进行治疗性血液成分单采对迅速缓解临床症状，减少并发症的发生和提高临床药物治疗效果均有较大意义。合理设定全血处理量，调整采集相关参数，有助于采集的顺利进行和采集效果的进一步提高。     

Effect of Shenmai Injection on L-type Calcium Current of Diaphragmatic Muscle in Rats

Diaphragmaticmuscleisanimportantrespiratorymuscle,anddiaphragmaticfatiguecanleadtomanydisorders .Onlyintherecent 2 0 yearshavethesys temicresearchesbeen performedtoinvestigatethefunctionofdiaphragmanditspathophysiology .Di aphragmaticfatiguecanbeinducedby…     

THE PHENOTYPE OF MAST CELL IN PRIMARY ADENOID LIVER TUMOR OF RAT AND ITS RELATION TO TUMOR CELL

Mast cells in adenoid liver tumors of 32 rats induced with nitrosomorpholine were observed ultrastructurally, and among them, some were studied immunocytochemically via immunogold techniques. Data indicating that mast cells which located in tumor tissues presented positive expression of rat mast cell protein (RMCP) Ⅰ, Indicating origination from the mucosa mast cells, while those in the connective tissues around tumors were largely stained negatively with either RMCP Ⅰor RMCP Ⅰ antisera, with the exception of only a few cells showing positive RMCP Ⅰ staining. Ultrastructural observation showed that mast cells in tumon contacted closely with the tumor cells. Membranes of the intracytoplasmic granules in these mast cells were fusing together. The content inside the granules were discharged and spread along the intercellular space between the tumor cells. There was not any lesion observed uitrasructrually in the tumor cells contacting with the mast cells. The significance of mucosa mast cells in adenoi     

THE EFFECT OF ACUPUNCTURE ON PREVENTION AND TREATMENT OF ISCHEMIC ARRHYTHMIA AND THE RELATION BETWEEN EFFECT OF ACUPUNCTURE AND CHOLINERGIC MUSCARINE-LIKE RECEPTORS

For investigating the effect of acupuncture on ischemic arrhythmia and its mech-anism, adult albino rats with ligated anterior descending branch of coronary artery as experimentalmodel were treated with or without acupuncture, and others with imitative operation but without bothcoronary artery ligation and acupuncture treatment were used as control. It was found in acupuncturegroup that the fibrillation-liability of ischemic myocardium was efficiently decreased, the affinity ofAch-M receptors on membranes of ischemic myocardium was markedly increased, and the tolerance ofischemic myocardium to atropine was elevated in the experiment of atropine inducing fibrillation.These results indicate that acupuncture may play a therapeutic role on ischemic arrhythmia throughactivating the activity of muscarine-like receptors of cholinergic nervous system.     

PTEN和mTOR信号转导通路在胆管癌发展中作用的研究

目的: 研究PI3K/PTEN/AKT/mTOR信号转导通路中mTOR和PTEN蛋白在胆管癌中的表达及其在胆管癌发生、发展中的作用。方法:用免疫组织化学方法和RT-PCR法，检测胆管癌中mTOR 和PTEN 的表达。结果:与正常组织相比，免疫组化法和RT-PCR两种方法结果均显示，胆管癌中的mTOR表达明显增加，而PTEN的表达明显下降;两者呈负相关（r=-0.862,P<0.01）。结论:PI3K/PTEN/AKT/mTOR信号转导通路中重要的调节位点和节点PTEN在胆管癌中的表达明显降低，而mTOR的表达明显增高。〖KG(*8〗提示该信号转导通路在介导胆管癌的发生、发展的过程中起重要作用。     

肝细胞癌中Ephrin-A1及其受体的表达与血管生成的关系

目的:探讨Ephrin-A1 及其受体与肝细胞癌血管生成之间的关系。方法:采用免疫组织化学SP法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测52例肝细胞癌（肝癌组）和癌旁组织（癌旁组）标本中Ephrin-A1及其受体EphA1和EphA2蛋白及mRNA的表达情况，并分析其与肝细胞癌的临床病理因素及微血管密度(microvessel density, MVD)之间的关系。结果:在52例肝癌组中 Ephrin-A1及其受体EphA1，EphA2的蛋白阳性表达率分别为59.6%(31/52)，53.8%(28/52)和17.3%(9/52),而癌旁组织中的蛋白阳性表达率分别为23.1%(12/52)，28.9% (15/52)以及21.2%(11/52)。Ephrin-A1及其受体EphA1在两组中的差异有统计学意义(P<0.05)，而EphA2在两组间的差异无显著性（P>0.05）。Ephrin-A1及其受体EphA1mRNA在肝癌组的阳性表达率为67.3%(35/52)和73.7%(38/52)，明显高于癌旁组中的阳性表达42.3%(22/52)和48.1% (25/52) (P<0.05)，而EphA2mRNA在两组间的差异无显著性（P>0.05）。Ephrin-A1蛋白的高表达与患者的甲胎蛋白(AFP)水平及有无门静脉癌栓有关(P<0.05)。Spearman等级相关分析显示，在肝癌组中Ephrin-A1的表达与EphA1的表达呈正相关(r=0.671,P<0.01);而Ephrin-A1与EphA2的表达无相关性;肝癌组中Ephrin-A1的表达与MVD呈正相关(r=0.826,P<0.01)。结论:Ephrin-A1通过与其受体EphA1相结合，促进肝细胞癌的血管生成，从而促进肝细胞癌的生长、浸润和转移; Ephrin-A1及其受体EphA1有望成为肝癌抗血管生成治疗新的靶点。     

老年患者尿路感染菌群分布及其耐药性分析

目的 :了解老年患者尿路感染致病菌的菌群分布及其对抗生素的耐药情况 ,为临床合理使用抗生素提供依据。方法 :收集湖北省 15所三级甲等医院 2 0 0 2年尿路感染老年患者清洁中段尿细菌培养分离的 5 34株致病菌 ,对其进行耐药性监测。药敏采用K B法 ,用WHONET 5软件进行数据分析。结果 :共收集致病菌 5 34株 ,其中革兰阴性菌 4 0 9株 (76 .6 % ) ,革兰阳性菌 12 5株(2 3.4 % )。革兰阴性菌中大肠埃希菌检出率最高 (2 6 4株 ,4 9.4 % ) ,其次为克雷白杆菌 (44株 ,8.2 % )。 16 .7%的大肠埃希菌和 2 2 .7%的克雷白杆菌产超广谱 β 内酰胺酶。亚胺培南、阿米卡星、头孢他啶对革兰阴性菌的抗菌活性最强 ,而革兰阴性菌对环丙沙星、庆大霉素、哌拉西林的耐药率均在 5 0 %以上。革兰阳性菌以肠球菌最多见 (6 4株 ,12 % ) ,其次为葡萄球菌属 (43株 ,8.1% )。革兰阳性菌对SMZco、红霉素等的耐药率均在 4 0 %以上 ,但对万古霉素均敏感。结论 :老年患者尿路感染以革兰阴性菌为优势菌株 ,且耐药性日益严重 ,对亚胺培南、阿米卡星、头孢他啶最为敏感。革兰阳性菌宜以万古霉素为首选。     

用SYBR Green I实时逆转录-聚合酶链反应定量检测人、小鼠精子中CatSper1 mRNA

目的:建立并优化SYBR GreenI实时RT-PCR体系,定量检测人、小鼠成熟精子中的CatSper1 mRNA。方法:用TRIzol分别提取人、小鼠成熟精子中的总RNA,逆转录后用SYBR GreenI实时PCR定量检测CatSper1 mRNA。SYBR GreenI实时PCR采用普通PCR试剂,加入SYBR GreenI染料,优化退火温度、Mg2+浓度及上、下游引物比例,并在PCR循环时采用四步法以消除引物二聚体的影响。优化完成后用不同浓度的精子cDNA为模板做标准曲线,以检测SYBR GreenI实时PCR的扩增效率。结果:定量检测CatSper1 mRNA的SYBR GreenI实时PCR体系适宜退火温度、Mg2+浓度及上、下游引物比例分别为63℃、3.0mmol/L和1∶1,四步法中采集荧光的温度为88℃。优化后用人和小鼠精子cDNA为模板做标准曲线分别为Y=-3.402log(X)+25.99和Y=-3.409log(X)+24.09,扩增效率分别为96.8%和96.5%,可定量检测人、小鼠成熟精子中的CatSper1 mRNA。结论:用普通的逆转录及PCR系统和试剂,建立了一种方便、廉价、可靠的SYBR GreenI实时荧光定量RT-PCR系统,可用于人、小鼠精子中CatSper1 mRNA定量检测。     

氯胺酮对荷包牡丹碱诱导PC12细胞内Ca2+浓度波动方式的影响

目的研究氯胺酮对荷包牡丹碱诱导PCI2细胞内Ca^2＋浓度波动方式的影响。方法使用含25ng／LNGF的DMED培养基在多聚赖氨酸包被的培养皿中培养PCl2细胞；与终浓度10gmol／L的Ca^2＋指示剂Fluo-3 AM ester共孵育30min洗涤后，加入终浓度50gmol／L荷包牡丹碱；在激光共聚焦显微镜选定多个细胞分别测定荧光强度的变化；随后加入氯胺酮，记录细胞荧光强度的改变。在试验结束前依次加入Triton X-100和EGTA分别记录单个细胞最大荧光强度（Fmax）和最小荧光强度（Fmin），以计算细胞内Ca^2＋的相对强度。结果氯胺酮不改变荷包牡丹碱诱导PCl2细胞内Ca^2＋浓度波动的基线，但抑制细胞内Ca^2＋浓度升高的幅度（P〈0．05），缩短相邻波峰间的时间间隙（P〈0．05）。结论氯胺酮不仅改变荷包牡丹碱诱导PCl2细胞内Ca^2＋浓度升高的幅度，而且改变Ca^2＋浓度波动的周期。