铁过载对斑马鱼的成骨影响的机制

目的 通过高通量转录组的方法测序高铁环境生存的斑马鱼与和野生型的斑马鱼,通过比较筛选出铁过载对于成骨影响的通道,通过在体以及离体的一系列实验证实铁过载对这些通道的作用。方法 通过在斑马鱼高铁环境下生存,造成斑马鱼铁过载,在4天后提取其RNA和野生型斑马鱼提取的RNA进行高通量转录组测序比较,筛选出成骨Bmp2通道,并用定量QPCR验证。在体实验中将Runx2a标记的转基因斑马鱼在高铁环境下与正常环境在第九天进行比较,观察其荧光的变化;离体实验中,用Bmp2a带标签的cDNA和Runx2a带标签的cDNA的细胞进行转染,进行荧光素酶报告基因实验,然后用铁干预,观察其变化。结果 通过高通量转录组测序发现高铁对于Bmp2抑制,并用定量验证发现铁过载后Runx2a, Runx2b,sp7等成骨基因均下调,观察发现Runx2a标记的转基因斑马鱼高铁环境下与正常环境相比基因表达明显下调,在细胞转染实验中,荧光素酶报告基因Runx2a在Bmp2a转染下大幅升高,转染铁后Runx2a下降。结论 通过高通量转录组测序,我们发现铁过载对于BMP2的抑制影响,运用在体以及离体的一系列实验证实铁过载对Bmp2的抑制作用从而导致成骨代谢的异常。     

青光眼患者眼压脉动振幅检查及意义

目的：观察青光眼患者眼压脉动振幅（OPA）变化,并探讨其意义。方法采用动态轮廓眼压计（DCT）检测127例青光眼患者（观察组）、90例正常人（对照组）及30例青光眼患者小梁切除术前后的OPA。结果观察组眼压值为（18．45±4．91）mmHg、OPA为（2．85±1．41）mmHg,对照组分别为（17．79±2．78）mmHg、（2．56±1．18）mmHg,P均＞0．05。观察组中,慢性闭角型青光眼（CACG）、可疑开角型青光眼（SOAG）、原发性开角型青光眼（POAG）、正常眼压性青光眼（NTG）患者OPA分别为（3．17±1．76）、（3．09±1．25）、（2．60±1．39）、（2．28±0．53）mmHg。 CACG、SO-AG患者OPA明显高于NTG患者和对照组,P均＜0．05;其余两两比较,P均＞0．05。早、中、晚期青光眼患者OPA分别为（2．60±1．19）、（3．36±1．52）、（2．83±2．16）mmHg,中期青光眼患者OPA明显高于早、晚期青光眼患者（P均＜0．05）。手术前后OPA分别为（4．09±1．97）、（2．20±1．39）mmHg,P＜0．05。 Pearson相关显示,OPA与眼压呈正相关（r＝0．635,P＝0．000）。结论 CACG、SOAG患者OPA升高,OPA对青光眼的分类及疗效判断有一定指导意义。     

斑马鱼中骨形态发生蛋白2a敲降对骨代谢的影响

目的通过显微注射吗啉环反义寡核苷酸(morpholino oligo,MO),使斑马鱼骨形态发生蛋白2a (bone morphgenetic protein 2a,BMP2a)基因敲降,观察BMP2a基因表达抑制后对斑马鱼骨代谢的影响。方法以受精后半小时斑马鱼受精卵为模型,将MO显微注射到受精卵(20个,对照组相同处理),对注射MO后及野生型(wild type,WT)的幼鱼于第9天分别进行茜素红染色,比较硬骨的形态差异,同时运用Image J软件对染色体积进行统计,比较差异。对注射MO后的幼鱼于第4天提取的c DNA采用实时荧光定量PCR(QPCR)方法检测Runx2a、Runx2b、Sp7、Alp骨形成相关基因和WT基因组的成骨下游基因表达的差异。对注射MO后第4天的斑马鱼予以成骨代表性的两个基因Runx2a进行原位杂交,比较WT幼鱼相关成骨基因表达部位的差异和信号强弱。结果与WT染色相比,注射抑制BMP2a的MO后第9天斑马鱼硬骨茜素红染色变浅,体积更小(MO vs. WT:3 276±153 vs. 4 768±231,P<0. 05)。QPCR检测显示,注射MO后第4天的斑马鱼成骨代谢基因表达量与WT斑马鱼对应基因相比均下调(Runx2a:0. 348±0. 002 vs. 1. 007±0. 032;Runx2b:0. 525±0. 021 vs. 1. 013±0. 021; Sp7:0. 483±0. 026 vs. 1. 124±0. 173; Alp:0. 136±0. 012 vs. 1. 233±0. 237; P<0. 05)。就Runx2a原位杂交而言,注射MO后第4天斑马鱼信号表达弱于同期WT斑马鱼。结论通过基因敲降技术使得斑马鱼BMP2下调,直观地观察到斑马鱼的骨发育迟缓,运用分子手段发现其基因下调造成一系列的成骨基因降低,用原位半定量方法靶向定位到斑马鱼蝶骨上,基因下调后造成斑马鱼的蝶骨信号消失。     

共表达甲状腺转录因子1和p40的非小细胞肺癌3例临床病理学特征

目的探讨共表达甲状腺转录因子1(TTF1)和p40的非小细胞肺癌(NSCLC)的临床病理学特征、免疫表型及分子病理改变。方法收集上海交通大学医学院附属瑞金医院病理科诊断的3例共表达TTF1和p40的NSCLC, 总结其临床病理资料, 并复习相关文献。结果 3例中例1、例2为男性, 例3为女性;年龄分别为75、85、70岁;例1、例2有吸烟史;2例为外周型, 1例为中央型。显微镜下观察:3例均呈实性巢状结构, 伴片状坏死, 无腺样结构, 无角化珠及细胞间桥;瘤细胞卵圆形、短梭形或多角形, 胞质透明或嗜酸性, 核分裂象多见。例1、例3肿瘤细胞与细支气管黏膜上皮有移行, 背景伴炎性细胞浸润。免疫表型:3例均表达细胞角蛋白(CK)7、广谱细胞角蛋白、TTF1、p63、p40、CK5/6及波形蛋白;3例均为同一群肿瘤细胞弥漫性共表达TTF1和p40;例1表达CK20;Ki-67均高表达(阳性指数60%～80%)。分子改变:例1检测到TP53、Notch2及STK11突变;例2检测到TP53突变, AKT1拷贝数扩增;例3检测到ERBB2突变。结论共表达TTF1和p40的NSCLC具有独特的免疫表...     

神经丝轻链与脑卒中关系的研究进展

<正>脑卒中是全世界致死、致残的主要原因,我国40岁及以上人群的脑卒中人口标化患病率由2012年的1.89%上升至2019年的2.58%,至2019年我国40岁及以上人群现患和曾患脑卒中人数为1704万,现患人数高居世界首位^[1]。一半的脑卒中患者发病后第1年发生脑卒中后认知障碍,生活质量及生存时间受到严重影响,是目前脑卒中疾病负担的重要原因^[2]。     

影像学检查方法在糖尿病足微循环灌注评估中的应用与进展

糖尿病是以血糖升高为主的伴有多系统并发症的慢性代谢性疾病。糖尿病足(DF)是糖尿病严重的并发症,影响长期的生活质量。目前检查金标准是数字减影血管造影,同时可以进行血管内成形术,但是即使成功的血运重建后,部分患者仍然溃疡愈合失败而导致截肢。因此,运用影像学方法早期检测糖尿病足部灌注情况,评估组织愈合潜力对治疗DF具有重要指导意义。除常规检查方法外,越来越多的影像新技术运用到DF微循环的检查中,从而为临床进行早期预防和干预、制定诊疗计划、监测疾病发展、评估新型治疗技术如血管生成细胞治疗、干细胞移植等的功效。     

肿瘤坏死因子拮抗剂治疗重症三氯乙烯药疹样皮炎

【摘要】 目的 观察肿瘤坏死因子拮抗剂在重症三氯乙烯药疹样皮炎治疗中的作用。 方法 5例以皮疹、发热、浅表淋巴结肿大和肝、肾损害为主要表现的重症三氯乙烯药疹样皮炎患者,在判断无肿瘤、结核及重症感染后,3例采用肿瘤坏死因子拮抗剂25 mg皮下注射,每周2次,联合糖皮质激素治疗;2例单独使用肿瘤坏死因子拮抗剂治疗。 结果 肿瘤坏死因子拮抗剂联合糖皮质激素治疗的3例患者体温在1周内降至正常,住院期间未发生感染、急性肝功能衰竭等,出院时皮疹消退,口腔、外阴等黏膜恢复正常,肝肾功能正常,平均住院时间36 d。单独使用肿瘤坏死因子拮抗剂的2例患者均治愈,临床疗效与联合糖皮质激素治疗的患者无明显差别,治疗后28周测得血清肿瘤坏死因子α水平降至正常。 结论 在重症三氯乙烯药疹样皮炎的治疗过程中尽早、足量使用肿瘤坏死因子拮抗剂有益于快速控制病情。     

凝集生长毛乳头细胞膜联蛋白A2的表达特性研究

目的 探讨膜联蛋白A2在毛乳头细胞（DPC）凝集生长中的表达特点。 方法 反转录PCR和Western印迹方法分别在基因和蛋白水平研究膜联蛋白A2在DPC凝集和非凝集生长状态下的表达特点。结果 在DPC凝集性生长状态下,膜联蛋白A2 mRNA表达水平显著高于非凝集生长状态,差异有统计学意义（0.50 ± 0.15比0.35 ± 0.19,t = 8.26,P < 0.05）。在蛋白质水平,膜联蛋白A2表现为相对分子质量为40 000的膜联蛋白A2异构体和分子质量为36 000的膜联蛋白A2两种形式,前者在凝集与非凝集生长的DPC均高表达,后者在凝集生长的DPC表达,在非凝集生长的DPC则不表达。 结论 膜联蛋白A2可能与DPC的凝集生长密切相关。     

强化护理干预对老年血管性痴呆患者功能恢复的影响

目的探讨强化护理干预对老年血管性痴呆的患者功能恢复的影响。方法将216例患者随机分为强化护理组（n=116）和一般护理组（n=100）,一般护理组予常规护理,强化护理组在此基础上给予功能康复训练、心理障碍以及认知障碍的康复护理。比较护理干预前及干预4周后两组简易智力状态量表（MMSE）、长谷川痴呆量表（HDS）、临床痴呆量表（CDR）、韦氏记忆量表（WMS-RC）、Blessed痴呆量表（IMCT）、简式Fugl—Meyer运动功能评分法（FMA）、社会功能活动调查表（FAQ）和日常生活能力量表（ADL）的评分结果。结果4周末强化护理组患者MMSE评分（19．86±3．15）,HDS评分（24．85±2．39）,WMS-RC评分（62．24±8．71）,IMCT评分（25．39±5．62）、FMA评分（68．71±14．18）,ADL评分（67．39±14．29：）,均高于一般护理组;CDR评分低于一般护理组,差异均有统计学意义（t=3．96,6．09,2．11,3．83,3．87,6．12,3．06,9．54;P〈0．01或P〈0．05）。强化护理组干预前后各项评分差异有统计学意义（P〈0．01）,而一般护理组差异无统计学意义（P〉0．05）。结论综合康复训练能改善患者的认知功能和日常生活自理能力,延缓病情发展。     

一个弥漫性表皮松解性掌跖角化病家系角蛋白9基因R162W突变

目的 研究1个弥漫性表皮松解性掌跖角化病(epidermolytic plamoplantar keratoderma,EPPK)家系中的基因突变情况.方法 收集1个弥漫性表皮松解性掌跖角化病家系的外周血标本,采取聚合酶链反应结合DNA直接测序的方法,检测了该家系中4例患者及3名表型正常者和100名无亲缘关系健康个体的KRT9基因突变情况.结果 该家系中患者存在KR79基因上第484位C突变成T,使得KRTY基因的第1外显子162位密码子由CGG突变成TGG,导致正常精氨酸被色氨酸所取代,而该家系的正常人对照及无关健康个体不存在此突变.结论 EPPK家系中患者KRT9基因存在错义突变(484C→T),这可能是导致EPPK发病的分子机制之一.