乳化异氟醚预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注时海马CA1区神经元凋亡的影响

目的 评价乳化异氟醚预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注时海马CA1区神经元凋亡的影响.方法 健康成年雄性SD大鼠48只,体重250～300 g,月龄4～6月,采用随机数字表法,将大鼠随机分为6组(n=8),假手术组(S组)腹腔注射生理盐水10.5 ml/kg,24 h后只分离血管,不置入线栓;缺血再灌注组(I/R组)和乳化异氟醚预处理组(EI组)分别腹腔注射生理盐水或8%乳化异氟醚10.5 ml/kg(120 mg/ml);LY294002+乳化异氟醚预处理组(L+EI组)缺血侧侧脑室注射LY294002(磷脂酰肌醇-3激酶特异性抑制剂)25 mmol/L 5 μl,30 min后腹腔注射8%乳化异氟醚10.5 ml/kg;LY294002组(L组)和DMSO(LY294002溶剂)组缺血侧侧脑室注射LY294002 25 mmol/L(5 μl)或DMSO 5 μl.于给 药后24 h采用大脑中动脉缺血2 h恢复再灌注的方法制备局灶性脑缺血再灌注模型.于再灌注24 h时行神经功能缺陷评分,检测海马CA1区神经元凋亡情况和磷酸化丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(p-Akt)表达,观察海马CA1区病理学改变.结果 与S组比较,其余各组神经功能缺陷评分、凋亡细胞计数升高.p-Akt表达上调(P＜0.05);与I/R组比较,EI组神经功能缺陷评分、凋亡细胞计数降低,p-Akt表达上调(P＜0.05),L+EI组、L组、DMSO组上述各指标差异无统计学意义(P＞0.05);与EI组比较,L+EI组神经功能缺陷评分、凋亡细胞计数升高,p-Akt表达下调(P＜0.05).EI组病理学损伤程度明显轻于I/R组,L+EI组、L组、DMSO组与I/R组相似.结论 乳化异氟醚预处理可减少大鼠局灶性脑缺血再灌注时海马CA1区神经元凋亡,其神经元保护作用与PI3K/Akt通路激活有关.

Abstract：

Objective To investigate the effect of preconditioning with emulsified isoflurane (eISO) on neuronal apoptosis in hippocampal CA1 region induced by focal cerebral ischemia-reperfusion (I/R) injury in rats. Methods Forty-eight healthy adult male SD rats weighing 250-300 g were randomly divided into 6 groups (n = 8 each): sham operation group (group S); I/R group; eISO + I/R group (group EI); LY294002 (a specific PI3K inhibitor) + eISO + I/R group (group L+ EI); LY294002 + I/R group (group L) and DMSO (solvent for LY294002) + I/R group (group DMSO). Focal cerebral I/R was induced by 2 h middle cerebral artery occlusion ( MCAO). A nylon thread (0.26 mm in diameter) with rounded tip was inserted into internal carotid artery and advanced cranially until resistance was met (depth of insertion about 18-20 mm) . eISO 10.5 ml/kg (120 mg/ml) was injected intraperitoneally (IP) in groups EI and L+ EI. LY294002 (25 mmol/L) 5 pi was injected into cerebral ventricle on the ischemic side in group L + EI ( at 30 min before eISO) and group L. DMSO 5 μl was injected into the cerebral ventricle on ischemic side before MCAO in group DMSO. Neurologic deficit was assessed and scored (0 = normal, 4 = unconscious) at 24 h of reperfusion. The animals were then killed and their brains were removed for detection of neuronal apoptosis (by TUNEL) and p-Akt expression (by immuno-histochemistry) in hippocampal CA1 region. Results Cerebral I/R significantly increased the neurologic deficit scores, the number of apoptotic cells and p-Akt expression in group I/R as compared with group S. Preconditioning with elSO attenuated the I/R-induced increase in neurologic deficit scores and number of apoptotic cells but further increased p-Akt expression. The neuroprotective effect of eISO preconditioning against I/R-induced changes was counteracted by LY294002. Conclusion eISO preconditioning can attenuate focal cerebral I/R-induced neuronal apoptosis in rats by activating PI3K/Akt pathway.     

乳化异氟醚后处理对糖尿病大鼠心肌缺血-再灌注损伤的影响

目的 观察乳化异氟醚后处理对糖尿病大鼠心肌缺血-再灌注(IR)损伤的影响,并探讨可能的分子机制。方法 选择SPF级雄性SD大鼠45只,2月龄,体重240～260 g。采用随机数字表法分成五组：假手术组(S组,n=5)、心肌IR损伤组(IR组,n=10)、糖尿病+心肌IR损伤组(DM组,n=10)、糖尿病+心肌IR损伤+乳化异氟醚后处理组(EI组,n=10)和糖尿病+心肌IR损伤+钙/钙调蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)抑制剂(KN93)组(KN93组,n=10)。S组仅开胸穿线但不结扎左冠状动脉前降支(LAD);IR组穿线稳定后30 min阻断LAD,缺血45 min,再灌注2 h建立IR损伤模型;DM组接受腹腔注射2%链脲佐菌素溶液建立糖尿病模型,4周后建立心肌IR损伤模型;EI组建立糖尿病心肌IR损伤模型时,于再灌注前3 min微量输液泵给药8%乳化异氟醚2 mg/kg,持续8 min; KN93组建立糖尿病心肌IR损伤模型时,于缺血前30 min左心室心内局部注射KN93 5μg并平衡30 min。于再灌注2 h后,采用TTC染色法测定心肌梗死面积百分比,ELISA法测定血清CK-MB浓...     

生长激素促分泌素参与大鼠小肠平滑肌运动的双相调节

目的探讨生长激素促分泌素（ghrelin）对大鼠小肠平滑肌舒缩活动的影响及其机制。方法制备迷走神经切断大鼠模型,腹腔注射不同浓度ghrelin（0、20、40和80μg／kg）,每种浓度6只大鼠,观察其对小肠转运的影响。体外实验观察在50nmol／L卡巴胆碱（Cch）存在时,不同浓度的ghrelin（0．01、0．1、0．5、1．0μmol／L）对肌条舒缩活动的影响,免疫荧光方法检测ghrelin受体（GHS．R1a）在小肠肌层中不同类型细胞的分布。结果0、20、40和80Ixg／kg4种浓度的ghrelin能够剂量依赖性地增加小肠转运率,分别为（25．4±1．0）％、（33．7±1．9）％、（39．3±2．4）％和（44．7±2．1）％,组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。体外应用0．01、0．1、0．5和1．0μmol／L4种浓度的ghrelin能剂量依赖增强Cch引起的肌条收缩[（67．0±2．4）％、（149．5±3．3）％、（187．1±4．7）％、（213．5±3．4）％]和舒张[（35．3±1．1）％、（62．9±3．8）％、（79．6±2．7）％、（94．6±2．2）％]效应,组问比较差异均有统计学意义（均P〈0．05）。免疫荧光检测显示,ghrelin受体主要分布在肠内肌层中的神经细胞膜上,平滑肌细胞膜上无分布。结论ghrelin可通过直接作用于小肠肌层神经丛中的神经细胞而增强胆碱能神经递质引起的小肠平滑肌的舒缩活动。     

右美托咪啶和咪达唑仑复合瑞芬太尼用于内镜黏膜下剥离术中镇静的比较

100例行内镜黏膜下剥离术的患者分别行咪达唑仑＋瑞芬太尼、右美托咪啶＋瑞芬太尼清醒镇静下手术.咪达唑仑＋瑞芬太尼组患者术中心率、呼吸频率变化较大（P＜0.05）,且麻醉医师满意度明显低于右美托咪啶＋瑞芬太尼组（P＜0.05）.     

雷米芬太尼复合丙泊酚和七氟醚麻醉苏醒期恢复情况比较

目的观察雷米芬太尼/丙泊酚静脉复合麻醉与雷米芬太尼/七氟醚静吸复合麻醉在妇科腹腔镜手术时使用后的恢复情况。方法 86例择期腹腔镜手术女性病人随机分成雷米芬太尼/丙泊酚静脉复合麻醉（P组,n=43）与雷米芬太尼/七氟醚静吸复合麻醉（I组,n=43）。手术结束后停止麻醉药物静脉注射和吸入。记录并比较患者苏醒期恢复情况和并发症的发生率。结果 P组病人停药后的拨管时间、睁眼时间、应答名字时间、应答生日时间均小于I组（P〈0.05）。两组在麻醉恢复室内停留的时间相近（P〉0.05）。P组烦躁的发生例数明显高于I组（P〈0.05）。两组病人围术期其它不良事件发生的频率比较差别无显著性（P〉0.05）。结论丙泊酚与雷米芬太尼复合静脉全麻比雷米芬太尼/七氟醚静吸复合麻醉有更快更好的短期恢复效果,适合于妇科腹腔镜手术中应用。     

缺血预处理减轻沙土鼠脑缺血再灌注损伤与海马CA1区p-p38MAPK表达的关系

目的:研究脑缺血预处理减轻沙土鼠脑缺血再灌注损伤与海马CA1区磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)含量之间的关系?方法:采用双侧颈总动脉夹闭造成前脑缺血的动物模型?动物随机分为假手术组(SH组)?预缺血组(IA组,前脑缺血3 min)?缺血再灌注组(IR组)?预处理组(IP组)?后3组末次缺血后再分为再灌注15 min?2 h?6 h?1 天和5 天时间点,每时间点8只动物?前4亚组用免疫组化法测定海马CA1区p-p38MAPK含量?再灌注1 天?5 天2亚组观察行为学变化和海马CA1区形态学存活细胞数目?结果:IA组?IR组?IP组沙土鼠海马CA1区再灌注15 min?2 h?6 h和1 天 p-p38MAPK表达均多于SH组,差异有统计学意义(P < 0.01 );IR组沙土鼠海马CA1区再灌注15 min?2 h?6 h和1 天 p-p38MAPK表达均多于IA组,差异有统计学意义(P < 0.01 );IP组沙土鼠海马CA1区再灌注15 min和2 h p-p38MAPK表达多于IA组,差异有统计学意义(P < 0.05),再灌注2 h?6 h和1天 p-p38MAPK表达较IR组下降,差异有统计学意义(P﹤0.05)?IA组与SH组沙土鼠行为学改变无统计学意义(P > 0.05);IR组沙土鼠再灌注1天和5天探索活动均较IA组增多,差异有统计学意义(P < 0.01);IP组沙土鼠再灌注1天?5天探索活动均少于IR组,差异有统计学意义(P < 0.01 )?IR组沙土鼠海马CA1区再灌注1天和5天存活神经元少于IA组,差异有统计学意义(P < 0.01);IP组沙土鼠海马CA1区再灌注5天存活神经元多于IR组,差异有统计学意义(P < 0.01 )?结论:3 min预缺血可引起海马CA1/3区p-p38MAPK水平轻度升高,但能降低24 h后5 min缺血再灌注引起的海马CA1区p-p38MAPK水平的上升程度?同时缺血预处理减少海马CA1区神经元死亡,并改善沙土鼠行为学变化?     

丙泊酚复合不同浓度芬太尼对定量药物脑电图α1频段的影响

目的观察相同镇静程度下丙泊酚复合不同浓度芬太尼对定量药物脑电图(quantitative pharmaco-EEG,QPEEG)α1频段的影响。方法 40例全身麻醉下行下腹部择期手术的患者随机分为两组,Ⅰ组:丙泊酚复合芬太尼(2 ng/mL);Ⅱ组:丙泊酚复合芬太尼(4 ng/mL)。两组均维持脑电双频指数(BIS)值在45~55范围内。分别记录两组在麻醉诱导前(T0)、诱导后(T1)、气管插管后1 min(T2)及切皮后1 min(T3)时的BIS、HR、MAP及QPEEG。利用功率谱分析技术计算QPEEGα1频段的相对功率百分比。结果与麻醉前相比,麻醉诱导后两组患者的MAP都降低,HR减慢,大多数脑区α1频段功率百分比均降低(P<0.05);与T1相比,T2时Ⅰ、Ⅱ组MAP、HR均升高(P<0.05),α1频段功率百分比均增加(P<0.05),且组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。T3时Ⅰ组MAP、HR、α1频段功率百分比均升高(P<0.05),Ⅱ组MAP、HR、α1频段功率百分比均无明显变化(P>0.05),组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论相同镇静程度下,QPEEGα1频段功率百分比的增加与伤害反应密切相关。QPEEGα1频段有望成为反映疼痛的有效指标。     

右美托咪定预处理对急性肺损伤大鼠的保护作用

目的探讨Akt信号通路在右美托咪定预处理对抗脂多糖(LPS)致急性肺损伤(ALI)中的作用。方法成年SD大鼠24只,随机分为对照组(T0组)、LPS注射后1h(T1组)、3h(T2组)和6h组(T3组),检测肺组织中Akt和p-Akt的含量。大鼠54只随机分为对照组(C组)、ALI 6h组(ALI组)和右美托咪定+ALI 6h组(D+ALI组),检测p-Akt表达、肺泡灌洗液(BALF)蛋白浓度、细胞凋亡指数,观察肺组织病理变化。大鼠40只随机分为ALI组和D+ALI组,观察48h生存率。结果与T0组比较,T1、T2和T3组p-Akt表达依次减少(P<0.05)。与ALI组比较,D+ALI组p-Akt表达明显升高(P<0.05),但仍低于C组(P<0.05),BALF蛋白浓度,细胞凋亡指数均降低(P<0.05),但仍高于C组(P<0.05);D+ALI组病理损伤较ALI组减轻。D+ALI组48h生存率明显高于ALI组(P<0.05)。结论右美托咪定可能通过增加ALI组织中p-Akt的浓度发挥保护作用。     

心理行为干预对食道癌患者术前应激反应的影响

食道癌及手术治疗对患者是一种严重的心理和生理应激源 ,均会产生不同程度的心理与生理的应激反应。我们在术前对患者进行系统地心理行为干预 ,取得较好的临床效果。现报告如下。对象与方法一、研究对象选取相同时间入院、病情分级 (ＡＳＡ)Ⅰ～ＩＩ级、无精神病史的食管癌患者 1 2 0例 ,随机分成干预组 (60例 )和对照组 (60例 ) ,见表 1 ,术前平均住院日 4天。表 1　病人一般资料组别男女 文化水平小学初中高中 年龄 (岁 )干预组 3 72 3 3 519658.63± 8.11( 50～ 65)对照组 3 12 93 3 19859.41± 8.75( 51～ 65)　　二、方法1 .术前准备　…