成纤维细胞生长因子受体FGFR1真核表达质粒的构建及其在HEK293T细胞的表达

目的建立一个有效表达FGFR1的真核系统。方法从人胎盘组织提取总RNA,通过RT-PCR扩增得到FGFR1基因,并将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1上,构建成pcDNA3.1-FGFR1质粒表达载体,并在HEK293T细胞重组表达;将pcDNA3.1-FGFR1质粒转染HEK293T细胞,通过免疫印迹和免疫荧光检测FGFR1在细胞中的表达情况。结果扩增的FGFR1序列与数据库一致;通过构建表达载体和转染细胞实现了FGFR1c DNA在HEK293T细胞膜上的表达。结论成功扩增出FGFR1 c DNA基因,经过转染HEK293T细胞,实现了FGFR1在HEK293T细胞的高效表达。     

改善危重症患者气管插管安全的策略

危重症患者气管插管风险较大,反复或长时间气管插管可增加并发症发生概率。本文强调危重症患者困难气道问题和首次气管插管成功的重要性,分析预氧、氧合维持、血流动力学优化和工具选择对促进首次气管插管成功的作用,对气道管理的培训、处理流程和综合措施等进行阐述。     

自噬和PI3K-Akt-mTOR信号转导通路在缺氧预处理对高糖心肌细胞缺氧/复氧损伤保护中的作用

目的 探讨自噬和磷脂酰肌醇3激酶（phosphatidylinositol 3 hydroxy kinase, PI3K）-蛋白激酶B（protein kinase B, Akt）-雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin, mTOR）信号转导通路在缺氧预处理（hypoxia preconditioning, HPC）对高糖心肌细胞缺氧/复氧（anoxia/reoxygenation, AR）损伤中的作用及机制。 方法 将采用高糖培养基培养72 h的心肌细胞用随机数字表法分为5组：空白对照组（S组）、AR损伤对照组（AR组）、HPC组、渥曼青霉素＋HPC组（Wo＋HPC组）、雷帕霉素＋HPC组（Ra＋HPC组）。采用乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase, LDH）检测试剂盒检测心肌细胞LDH漏出率,Annexin V/PI双染流式细胞术检测心肌细胞凋亡情况,蛋白印迹法检测心肌细胞微管相关蛋白1轻链3（microtubulesas sociated protein light, LC3）-Ⅱ、Beclin-1、mTOR、PI3K表达和磷酸化（phospho, p）蛋白激酶B/蛋白激酶B（p-Akt/Akt）比值。 结果 与AR组比较,Wo＋HPC组LDH漏出率、早期和晚期凋亡率降低（P〈0.05）,LC3-Ⅱ和Beclin-1表达降低（P〈0.05）,mTOR、PI3K表达和p-Akt/Akt比值升高（P〈0.05）。HPC组各指标与AR组比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）。与HPC组比较,Wo＋HPC组LDH漏出率、早期和晚期凋亡率降低（P〈0.05）,Beclin-1表达降低（P〈0.05）,mTOR、PI3K表达和p-Akt/Akt比值升高（P〈0.05）。 结论 激活PI3K-Akt-mTOR信号转导通路抑制自噬可明显改善HPC对高糖心肌细胞AR损伤的保护作用。     

α7亚基烟碱能乙酰胆碱受体激动剂后处理减轻大鼠在体心肌缺血/再灌注损伤最佳干预时间的实验研究

目的观察α7亚基烟碱能乙酰胆碱受体（α7 subunit-containing nicotinic acetylcholine receptor，α7nAChR）激动剂后处理减轻大鼠在体心肌缺血/再灌注损伤（ischemia/reperfusion injury，I/RI）的最佳干预时间。 方法将60只SD大鼠采用计...     

亲环素在缺血/再灌注炎症性损伤中作用的研究进展

背景 亲环素(cyclophilin,Cyp)是一类具有肽基脯氨酰顺反异构酶活性的蛋白质家族,研究表明Cyp在心肌缺血/再灌注损伤(Ischemia/reperfusion injury,I/RI)过程中发挥着重要作用.目的 分析总结有关Cyp参与I/RI发生机制的文献资料.内容 简要描述Cyp家族的分子结构及生物学功能,重点阐述CypA在缺血/再灌注炎症性损伤过程中的作用机制.趋向 Cyp有可能成为防治心肌I/RI的一个新靶点,新型无免疫抑制作用的Cyp配体具有十分广阔的治疗前景.     

血清胆碱酯酶水平对危重症病情判断的意义

目的了解危重症患者血清胆碱酯酶（CHE）的变化情况,探讨血清CHE水平下降的原因及对病情严重程度和预后判断的作用。方法观察2007年5月至2008年3月入北京协和医学院整形外科医院ICU病房的42例危重症患者。用APACHEⅡ评分系统评价病情的危重程度,分析血清CHE浓度变化与APACHEⅡ评分的相关性,同时观察患者肝功能的变化情况。结果患者血清CHE浓度较发病前降低[（187．83±78．18）U／L比（270．43±91．66）U／L,P〈0．01],其中23例低于正常参考值。死亡患者CHE浓度显著低于存活患者[（140．26±54．81）U／L比（208．84±69．96）U／L,P〈0．01]。血清CHE水平与APACHE Ⅱ评分呈显著负相关（r=-0．43,P〈0．01）。血清总胆汁酸（TBA）发病前后无显著差异。死亡组与存活组丙氨酸转氨酶与门冬氨酸转氨酶无显著差异。结论ICU中危重症患者血清CHE浓度下降明显,APACHEU评分越高,CHE下降程度越大。患者CHE下降不是由肝实质损害引起。测定血清CHE可作为判断ICU危重症患者病情和预后的一个有意义的指标。     

迷走神经电刺激后处理对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的影响

目的 评价迷走神经电刺激后处理对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的影响.方法 雄性SD大鼠40只,体重250 g～350 g,采用计算机产生的随机数平均分为4组(每组10只):假手术组(S组)、缺血/再灌注组(IR组)、缺血预处理组(IPC组)和迷走神经电刺激后处理组(POES组).除S组外,其余各组均结扎冠状动脉左前降支30...     

小儿应用Trachlight光索引导气管插管的临床观察

Trachlight(laerdal medical corporation,美国)是在传统光索基础上加以改进的新型光导气管插管工具,具有光亮度强、硬度适中的特点,特有的可移动管芯既能减少导管置入时的气道损伤,还能避免光索退出时将导管带出声门[1];同时还有三种不同型号可以适用于新生儿至成人.目前,有关成人应用Trachlight光索引导气管插管的研究较多[1,2],但小儿的报道较少.本观察探讨小儿应用Trachlight光索引导气管插管的临床效果.     

iNOS在瑞芬太尼预处理对大鼠产生延迟性心肌保护效应中的作用

Objective To evaluate the role of inducible nitric oxide synthase (iNOS) in the delayed cardioprotection induced by remifentanil preconditioning in rots. Methods Thirty-six adult male Wistar rats,weighing 250-300 g, were randomly divided into 6 groups (n = 6 each). Myocardial ischemia was induced by 5 min, repeating 3 times at 5 min intervals. In greup Ⅱ rots were treated with iv SMT (a selective iNOS inhibitor)10 mg/kg at 10 min before myocardial ischemia. In group Ⅲ iv SMT 10 mg/kg was injected following the infusion with iv SMT 10 mg/kg at 10 min before myocardial isehemia. In group Ⅵ iv SMT 10 mg/kg was injected following the infusion of remifentanil. HR and MAP were recorded before ischemia and every 15 min during ischemia period and every 30 min during reperfasion period. The rote-pressure product (RPP) was calculated. The blood samples from right internal carotid artery were obtained for determination of plasma activity of CK-MB immediately before ischemia, at 30 min of ischemia and at 120 min of reperfusion. The animals were then killed and heart,s removed to measure the left ventricle area (LVA), the myocardial infarct area (IA) and the area at risk (AAR), and AAR/LVA, IA/LVA and IA/AAR were calculated. Results There were no significant differences in HR, MAP,RPP and AAR/LVA at every measurement point during the experiment among all groups. As compared to group Ⅰ ,Ⅱ and Ⅲ, plasma activity of CK-MB, IA/LVA and IA/KAR were significantly decreased at 30 min of ischemia and 120 min of reperfusion in group Ⅳ and Ⅵ . There were no significant differences in plasma activity of CK-MB,IAJLVA and IA/AAR between group Ⅰ,Ⅱ and Ⅲ . Plasma activity of CK-MB, IA/LVA and IA/AAR were significantly higher at 30 min of ischemia and 120 min of reperfusion in group Ⅴ than in group Ⅳ . Plasma activity of CK-MB, IA/LVA and IA/AAR were significantly lower at 30 min of ischemia and 120 min of reperfusion in group Ⅵ than in group Ⅴ . Conclusion iNOS is involved in the delayed cardioproteetion induced by remifentanil preconditioning in rats, and it is a mediator but not a trigger.