人乳腺癌多西他赛耐药细胞株MCF7/Docetaxel的建立及其生物学特征

目的 建立人乳腺癌多西他赛耐药细胞株MCFT/Doeetaxel,探讨其生物学特征.方法 采用多西他赛中等浓度、间歇作用法建立耐药细胞株MCF7/Docetaxel,采用噻唑蓝(MTT)比色法测定其对Doeetaxel的耐药指数,观察冻存、撤药对耐药性的影响,比较耐药细胞株与亲本细胞株生长曲线、群体倍增时间及贴壁率的不同,流式细胞仪检测细胞周期,软琼脂实验检测细胞的恶性增殖能力,罗丹明实验检测其对药物的摄入、排出能力.结果 人乳腺癌耐药细胞株MCF7/Docetaxel的耐药指数为16.2,冻存对耐药性无明显影响,撤药培养可使耐药性降低,MCF7/Docetaxel与MCF7细胞的群体倍增时间分别为(39.89±0.43)、(27.51±0.55)h(P＜0.05),耐药细胞株倍增时间延长,生长缓慢,G2、M期细胞比例增加(39.50±3.83)%、(23.59±2.51)%(P＜0.05),克隆形成率明显高于亲本细胞67%、23%(P＜0.05),对罗丹明的摄入减少,排出增多.结论 成功建立人乳腺癌多烯紫杉醇耐药细胞株MCF7/Docetaxel,生长及耐药性稳定.

Abstract：

Objective To establish a docetaxel-induced human breast carcinoma drug-resistant cell line MCF7/Docetaxel and study its biological characteristics. Methods The drug-resistant cell line MCF7/Docetaxel was established in culture by exposing MCF7 parent cells to moderate concentration of docetaxel over a period of 11 months. The resistance index to docetaxel was determined by methyl thiazol tetrazolium (MTT) assay. Cell growth curve was drawed and the doubling time was accounted. Flow cytometry (FCM) was performed to determine cell cycle. Fluorescence activated cell analysis (FACS) was employed to determine the concentration of fluorescence dye of rhodamine 123 ( Rh123) in the cells for the evaluation of drug-absorptive and expelling capacity. Results The resistant index of MCF7/Docetaxel was 16. 2. When MCF7/Docetaxel was stored with docetaxel at - 196℃ for 3 months and then went back to the normal environment, its characteristic of anti-tumor drug resistance was still maintained. But after being cultured in RPMI 1640 without docetaxel for a period of 1 month, MCF7/Docetaxel showed a decrease in the resistant index. As compared with the parent cells, MCF7/Docetaxel exhibited a prolonged doubling time [(39. 89 ±0. 43 vs 27. 51 ±0. 55 h,P＜0. 05] and lower growth rate. The percentages of cells in G2 and M phases were significantly increased in MCF7/Docetaxel in comparison with those in MCF7 [(39. 50 ± 3. 83) % vs (23. 59 ± 2. 51) % , P ＜ 0.05]. In soft agar growth test, MCF7/Docetaxel cells formed more cell clones than MCF7 cells (67% vs 23% ,P ＜0. 05). Finally, the concentration of Rh123 in MCF7/Docetaxel was lower than that in MCF7. Conclusion The newly established stable cell line MCF7/Docetaxel possesses typical drug-resistant characteristics and its drug-resistant phenotype is stable.     

延续性健康管理对冠状动脉支架植入术后患者预后的影响

目的探讨延续性健康管理对冠状动脉支架植入(PCI)术后患者预后的影响。方法将298例PCI术后患者随机分为两组。管理组150例,实施延续性健康管理1年;对照组148例,给予常规出院健康指导。结果管理组出院6、12个月血压、血糖、血脂达标率显著高于对照组,心绞痛、心肌梗死发生率显著低于对照组(P0.05,P0.01)。结论延续性健康管理可提高PCI术后患者遵医依从性,减少危险因素、降低心脏不良事件的发生。     

肾癌合并Ⅱ、Ⅲ型下腔静脉瘤栓11例手术疗效分析

目的探讨经皮球囊导管阻断在合并Ⅱ、Ⅲ型下腔静脉瘤栓的肾癌患者的手术疗效。方法回顾性分析河南省肿瘤医院普外科自2006年7月至2011年3月治疗的11例合并Ⅱ、Ⅲ型下腔静脉瘤栓的肾癌患者的临床病理资料、手术方法及疗效。结果 11例患者的平均年龄为48.4岁(36～66岁),所有患者均经术前CT、MRI或彩超明确肿瘤及瘤栓情况。所有患者术前在DSA下经颈内静脉预置球囊导管在瘤栓附近,术中充盈球囊阻断下腔静脉后再切除肾脏及瘤栓。手术时间为(67.3±12.3)min,手术出血量为(762.3±125.5)ml,术后住院时间为(12.6±1.8)d,无手术或围手术期死亡。术后1年生存率为81%,3年生存率为54%。结论经皮球囊导管阻断法在肾癌合并Ⅱ、Ⅲ型下腔静脉瘤栓手术中是安全有效的预防瘤栓脱落方法,具有一定的临床推广价值。     

维持性血液透析患者的舒适护理实践

目的探讨舒适护理在慢性肾衰竭患者维持性血液透析护理中的应用效果。方法便利抽取维持性血液透析患者70例,随机分为对照组和观察组各35例。对照组给予常规护理,观察组在对照组的基础上给予生理、心理、社会和环境的整体舒适护理干预。采用自制舒适度评分和护理满意度问卷于干预前和干预3个月后对患者进行评估。结果干预后观察组舒适度评分和护理满意度与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论舒适护理模式的应用可提高血液透析患者的舒适度,充分体现了以人为本的护理内涵。     

人工心脏腱索应用技术的探讨

1995年 1月至 2 0 0 0年 5月 ,我们在三尖瓣腱索缺如、二尖瓣退行性变性所致的瓣膜脱垂、腱索断裂引起的严重关闭不全 ,而无法保留自体腱索的瓣膜置换术中应用了人工腱索技术 ,连续 30例效果满意 ,现总结如下并作简要讨论。临床资料　本组 30例中男 2 0例 ,女 10例 ;年龄 3～ 5 8岁 ,平均 36 6岁。其中先天性三尖瓣前叶腱索缺如 3例 ,二尖瓣腱索断裂 18例 ,瓣下结构病变严重的瓣膜置换 5例 ,腱索变性冗长瓣膜脱垂置入人工腱索 4例。心功能 (ＮＹＨＡ)分级ＩＩ级 2例、ＩＩＩ级 2 6例、ＶＩ级 2例。Ｘ线胸片示心胸比率0 5 0～ 0 80 ,平均 …     

静脉输液治疗小组与护理质量持续改进

<正>静脉输液护理技术是临床医疗和护理的主要日常工作,随着医学的发展和进步,临床治疗对静脉输液的护理技术要求越来越高,如微量泵持续输注,定时治疗;特殊药物对血管刺激与损伤;医患对静脉保护重视程度的提高;一些新技术在临床的广泛应用(超声引导下穿刺、改良塞丁格等辅助置管技术、新式设备材料)等,使静脉输液的方法、手法、内涵也不断发生变革[1-2]。PICC,CVC等不同类型中心静脉通路的已在临床广泛使用。新的静脉输液技术和方法虽然满足了临床治疗要求,但     

肾必宁对大鼠系膜增生性肾小球肾炎肾小球细胞凋亡及bax、bcl-2表达的影响

目的：探讨中成药肾必宁对慢性血清病性系膜增生性肾炎肾小球细胞凋亡与调控基因bax、bcl—2表达的影哨。方法：应用大鼠慢性血清病性系膜增生性肾炎模型；造模第4周起，灌服中成药肾必宁，以等量生理盐水为对照；24h定量测定尿蛋白；TUNEL法检测实验大鼠肾小球细胞凋亡；免疫组化SABC法观察bax、bcl—2表达的改变。结果：肾必宁治疗组肾小球细胞凋亡率较病理组升高(P＜0．01)，bax表达增强(P＜0．01)，bcl—2表达下降(P＜0.01)。结论：肾必宁可能通过影哨凋亡调控基因bax、bcl—2的表达，诱导肾小球细胞凋亡，进而抑制系膜增生性肾小球肾炎系膜细胞增殖。     

流行性乙型脑炎患者血清IgG抗体对乙脑病毒蛋白的识别

目的：了解流行性乙型脑炎病毒各蛋白成分在刺激机体免疫应答方面所起的作用，给亚单位疫苗研制提供理论依据，进行该项研究。方法：建立乙脑病毒免疫转印方法，应用该法检查乙脑病人血清IgG抗体对乙脑病毒蛋白的反应情况，分析正常人群中筛选出的乙脑病毒隐性感染者血清IgG对乙脑病毒蛋白的反应性，并比较二者的差异。结果：经检测，绝大部分病人血清IgG可识别E蛋白，部分病人尚可识别NS5，NS3，NS1蛋白，而隐性感染者血清IgG对98kd（NS5）乙脑病毒蛋白的反应性显著低于乙脑患者。结论：研究结果显示，E蛋白是乙脑病人血清IgG识别的主要蛋白，在免疫保护方面起着主要作用。隐性感染者对NS5蛋白的反应机率明显低于显性感染者，提示NS5蛋白在乙脑病毒的致病过程中起重要作用。     

血清高密度脂蛋白及其亚型胆固醇与肝功能关系的探讨

本文了测定了45例失代偿期肝硬化及24例慢性活动性肝炎（包括早期肝硬化）患者血胆固醇含量，血甘油三酯和高密度脂蛋白及其亚型胆固醇含量，结果表明失代偿期肝硬化患者血清高密度脂蛋白胆固醇（HDLch)，高密度脂蛋白3胆固醇（HDL3ch），血总胆固醇（Tc)与正常对照组及慢活肝组之间存在非常显著的差异（P＜0．001），而其高密度脂蛋白2胆固醇与后二者尽管也存在显著差异，但其敏感性较差（P＜0．01），提示HDLch,HDL3ch可以作为判断肝功能状态敏感的指标。     

河南省人免疫缺陷病毒流行株的基因亚型分析

目的　研究流行于河南省献血员中的人免疫缺陷病毒（ＨＩＶ） 外膜蛋白（ｅｎｖ） 基因亚型。方法　提取ＨＩＶ 感染者外周血单个核白细胞（ＰＢＭＣ） 的ＤＮＡ,经套式聚合酶链反应（ＮｅｓｔｅｄＰＣＲ） 扩增ｅｎｖ 基因片断,对Ｃ２Ｖ３ 区３５０ ～４５０ 核苷酸顺序进行测定和分析。结果　２０ 份样品的ｅｎｖ 基因序列与Ｂ亚型最为接近,基因离散率为８ ．３４ ％ ,与其它国际亚型的基因离散率在２０ ％ 以上;与流行于云南的Ｂ 亚型毒株基因离散率为４ ．１８ ％ ;样品间的基因离散率为３ ．４ ％ 。结论　流行于河南省献血员中的ＨＩＶ 属Ｂ亚型,并与云南的流行株密切相关;其在河南的流行时间在３ ～６ 年间。