免疫组化技术背景的非特异性着色

免疫组化技术是利用免疫反应以定位组织中某类抗原成分分布的一门新兴技术,借助于荧光素、酶、肢体金等标记抗体与组织切片中的相关抗原相结合,是一项特异、敏感和简便的技术,广泛地应用于生物医学的理论研究和临床诊断。背景的非特异性着色显著是技术操作中存在的突出问题,直接影响观察和结果的判断。我们在实际操作中对减少和消除非特异性着色有些体会,报告如下: 一、免疫荧光细胞化学方法常见的非特异性荧光及其消除方法。 非特异性荧光是指特异性荧光以外细胞或组织内的某些物质在荧光显微镜下呈现的各种颜色的荧光(俗称背景深)。原因:1.细胞和组织内某些物质的自发荧光:如组织固有的自发荧光,维生素A、甲醛固定后冰冻切片;心肌色素,嗜银细胞颗粒;脂褐素;弹力纤维;红细胞,或其它杂质污染等。多数发出兰、白、     

脑胶质瘤颅外转移复发一例报告并文献复习

目的探讨脑胶质瘤颅外转移复发的机制、临床特点及治疗方法。方法对1例肿瘤切除后颅外转移复发的脑胶质瘤病例分析其临床特征、影像学特点、手术所见、病理学结果及治疗方法。结果右颞顶少突胶质细胞瘤切除术25年后切口附近皮下异位复发，切除术后9个月后再次复发，并向腮腺、头颈部多发淋巴结转移。经手术、放疗和化疗等综合治疗，肿瘤部分缓解。结论脑胶质瘤可发生颅外转移复发，涉及机制复杂，应尽量手术治疗，并辅以放疗。     

TβRⅡ、MMP-7和TIMP-2表达与大肠癌临床病理关系的研究

目的 探讨转化生长因子βⅡ型受体(TβRⅡ)、基质金属蛋白酶-7(MMP-7)及金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)蛋白在大肠癌中的表达水平和相互关系,分析三者与大肠癌临床病理的关系.方法 应用免疫组化SP法检测60例大肠癌和8例正常大肠组织TβR Ⅱ、MMP-7、TIMP-2的表达水平,分析两组间表达差异.结果 TβR Ⅱ、MMP-7、TIMP-2蛋白在大肠癌中的阳性表达率依次为76.7%(46/60)、73.3%(44/60)和40.0%(24/60);其表达与肿瘤侵犯深度和转移密切相关,TβR Ⅱ和MMP-7的表达呈正相关.TIMP-2与TβR Ⅱ和MMP-7表达呈负相关.结论 TβR Ⅱ、MMP-7和TIMP-2表达与大肠癌的侵袭转移和预后密切相关.可作为判定大肠癌预后的指标.     

大鼠心肌梗死后的原癌基因表达

目的本实验旨在探讨心肌梗死后左心室重构的分子生物学机制。方法用地高辛标记的原位杂交方法观察了大面积心肌梗死后存活心肌细胞的原癌基因c-myc。c-fos及c-jun的mRNA水平的动态变化，并用巯甲丙脯酸进行干涉。大鼠随机分为三组：（1）单纯心肌梗死组；（2）梗塞给药组；（3）假手术组。梗塞给药组于手术前3d开始饲以巯甲丙脯酸（2g／L）。结果左室非梗塞区心肌的c-myc，c-fos及c-jun的mRNA水平手术后24h达峰值，c-myc于手术后10d，c-jun于手术后7d恢复到假手术组水平，但c-fos于术后持续高表达。在梗塞给药组，c-myc，c-fos于手术后7d、10d，c-jun于手术后各时间点其mRNA水平达假手术组程度。结论上述基因在非梗塞区心肌均有过量表达，持续时间较长，转换酶抑制剂对其有所抑制。     

常规石蜡包埋组织的电镜制样及结果观察

透射电子显微镜技术不仅需要有高分辨率、高放大倍数的电子显微镜，还需要超微结构保存良好、厚度适合、反差适中的电镜观察样品。电镜制样由于步骤繁多、操作复杂，组织和细胞结构的形态很可能发生变化，因此各操作环节都要备加小心。电镜样品取材要求很严格，有4大要点：①组织要新鲜；②取材刀要锋利；③取材块小，约1mm^3④固定要及时（2．5％戊二醛）。但在临床上，     

模拟失重状态下大鼠小肠黏膜光镜及电镜的形态学改变

目的 以尾部悬吊大鼠模型模拟失重的影响,探讨模拟失重是否可引起小肠黏膜的改变. 方法 用光学显微镜和扫描电镜,观察了对照(CON)、尾部悬吊14 d(SUS-14 d)和尾部悬吊21 d(SUS-21 d)大鼠小肠绒毛的超微结构改变. 结果 光镜下SUS-21 d组和SUS-14 d组大鼠小肠黏膜的绒毛高度降低、宽度增加、隐窝变浅,与CON组比较差异有显著性(F=294.24、60.05、328.63,P<0.05);电镜下SUS-21 d组和SUS-14 d组大鼠小肠黏膜的微绒毛高度减低、表面积缩小,微绒毛间的间距增宽,微绒毛糖衣厚度减小,与CON组比较差异有显著性(F=234.90、138.07、104.69、195.35,P<0.01). 结论 模拟失重14 d和21 d,光镜和电镜结果 均提示小肠黏膜可出现绒毛和微绒毛的变稀少,变短、变宽,表面积减小等改变.本工作还提示小肠黏膜微观结构的改变可能是造成航天员在航空飞行中出现腹泻、腹胀等消化和吸收不良症状的重要原因之一.     

非何杰全氏淋巴瘤流式细胞术分析及其临床意义探讨

应用流式细胞术(FCM)对86例非何杰金氏淋巴瘤(NHL)石蜡包埋组织细胞DNA含量进行分析.结果表明,86例 NHL中的28例为异倍体(32.6%),其余为二倍体.高度恶性(HG)及中度恶性(IG)组异倍体发生率明显地高于低度恶性(LG)组(P<0.01).但是,HG、与 IG组间差异不显著(P>0.05).异倍体发生率与分期及患者年龄、性别无关.HG、IG和 LG三者间S期比率差异显著或极显著.S期比率>18%病人 2年存活率显著低于 S期比率≤18%者(P<0.01).     

何杰金病中EB病毒感染和bcl—2蛋白的表达

目的探讨Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒ（ＥＢ）病毒与ｂｃｌ－２基因的关系。方法利用免疫组织化学ＬＳＡＢ法检测了６４例何杰金病ＥＢ病毒的潜在膜蛋白－１（ＬＭＰ－１）和ｂｃｌ－２蛋白的表达。用原位杂交方法检测了４１例何杰金病组织中的ＥＢＥＲ。又用双重染色的方法检测了７例ＥＢＥＲ和ｂｃｌ－２蛋白双阳性的何杰金病例。结果ＬＭＰ－１和ＥＢＥＲ的阳性率分别为３９％和４４％,所有ＥＢＥＲ阳性的病例ＬＭＰ－１均为阳性。ｂｃｌ－２蛋白的阳性率为２３％,其中仅有７例ＬＭＰ－１和ｂｃｌ－２蛋白同时阳性。双重染色结果为,在７例双阳性病例中ｂｃｌ－２阳性的细胞只有约５０％ＥＢＥＲ阳性,约４０％ＥＢＥＲ阳性的肿瘤细胞ｂｃｌ－２阳性。结论研究结果提示,在本组研究的病例中Ｒ－Ｓ细胞的ｂｃｌ－２蛋白的表达与ＥＢ病毒的存在与否无明显相关性。     

钙磷脂结合蛋白Ⅰ及其相关基因蛋白在子宫内膜增殖症、不典型增生和子宫内膜腺癌中的表达和意义

目的：研究钙磷脂结合蛋白Ⅰ（Annexin-Ⅰ，AX－Ⅰ）在子宫内膜病变中的表达及在交界病变鉴别诊断中的意义。方法：收集37份子宫内膜不同病变标本，经HE染色，在光镜下按国内及国际妇产科联合会（FIGO）标准分类，AX－Ⅰ、 雌激素受体、孕激素受体、表达生长因子受体、胰岛素样生长因子－Ⅰ受体与c-erbB-2的免疫组织化学染色采用LSAB法。结果：腺囊性子宫内膜增殖症12例、子宫内膜不典型增生（ATH）10例、子宫内膜癌（EC）15例。免疫组织化学AX－Ⅰ在腺囊性增殖症中，除，除1例弱阳性外，均为阴性，在不典型增生组9组为强阳性，1例弱阳性；内膜癌则7例弱阳性，8例阴性；内膜鳞化或鳞癌区呈强阳性。c-erbB-2蛋白在不典型增生组9例为阳性。1例阴性。表皮生长因子受体（EGFR）均呈强阳性，胰岛素样生长因子－Ⅰ受体的表达弱且无规律，P53表达在EC组较ATH组略强。结论：AX－Ⅰ基因蛋白可能在肿瘤的发病初期起作用，癌变后其表达下降，甚至消失；AX－Ⅰ强阳性对ATH与EC鉴别具有一定价值。另外，c-erbB-2与AX－Ⅰ的表达似乎存在一种平行的关系。     

子宫颈原发性恶性黑色素瘤1例

患者 女,40岁.因发现宫颈口肿物1年半,阴道出血20天入院.妇科检查:宫颈口可见紫黑色组织物堵塞,于宫颈左侧上下唇及左侧缘致密粘连,质硬,触及出血.