深圳市无偿献血者结核分枝杆菌潜伏感染初步调查

目的 了解深圳市无偿献血者结核分枝杆菌潜伏感染的情况和流行特点,分析其流行病学特征,为无偿献血者的招募、输血安全以及控制献血和输血结核分枝杆菌传播提供科学依据。方法 应用外周血单核细胞酶联免疫斑点法（Peripheral blood mononuclear cells enzyme-linked immunospot assay, PBMCs-ELISPOT）检测合格献血者的新鲜血样中的γ-干扰素,对检测符合阳性判定标准的血液标本相关信息进行回顾性统计学分析。结果 2020年6—8月,对220名合格献血者新鲜血液标本应用单核细胞酶联免疫斑点法检测外周血γ-干扰素,γ-干扰素释放试验阳性44例,潜伏感染率为20.0%（44/220）,合格献血者与结核分枝杆菌潜伏感染者的γ干扰素释放试验阳性率在不同性别、户籍、年龄组、文化程度、血型组之间的差异均无统计学意义（P>0.05）,献血者与M.tb潜伏感染者在不同年龄组、文化程度、血型组构成比差异均无统计学意义（P>0.05）。结论 合格的无偿献血人群作为相对健康的群体,但仍存在结核分枝杆菌潜伏感染,建议考虑增加无偿献血人群结核分枝杆菌潜伏感染常规筛查等防控措施,确保献血安全和临床用血安全。     

甲胎蛋白表达缺失的人肝癌HepG2细胞株的构建

目的：建立甲胎蛋白（AFP）表达缺失的HepG2细胞株。方法：选择AFP的RNA干涉靶序列,体外合成两段互补的寡核苷酸,与线性化的pll3．7连接,扩增纯化得到所需质粒。鉴定后将质粒用慢病毒包装、纯化得到病毒粗提液,与HepG2细胞共培养,转染后用RT—PCR和Westernblot实验检测细胞AFP的表达情况。结果：RT-PCR和Westernblot实验显示,干扰后HepG2细胞AFP基因和蛋白的表达显著减少。干扰效率达84％。所得细胞株传代后仍仅能检测到微量AFP表达。结论：成功构建稳定的AFP表达接近缺失的HepG2模型细胞株。     

原发性肝癌不同中医证型患者舌色的光谱测色及其色度学比较研究

目的：应用光谱测色法检测原发性肝癌不同证型患者的舌色资料,并进行其舌色的色度学比较研究,探讨原发性肝癌不同辨证分型的舌色特点以及舌色和证型之间的关系。方法：应用光谱测色法采集133名原发性肝癌患者的舌色数据资料,根据临床特点辨证为肝郁脾虚、湿热蕴结、肝肾阴虚、气滞血瘀4类证型,观察各证型色度坐标、主波长分布、兴奋纯度的变化特点和CIELAB均匀色彩空间分布特点,比较各型色度角、彩度的区别,并分析不同证型之间总色差、明度差、色度差、饱和度差、色相差等参数的区别。结果：原发性肝癌患者不同证型舌色的色度坐标分布不同;气滞血瘀型的主波长分布明显不同于其他3个证型;兴奋纯度值在肝郁脾虚、湿热蕴结、肝肾阴虚型肝癌患者呈现为逐渐增加的特点（P〈0．01）;不同证型舌色于CIELAB三维色空间分布区域不同;色度角结果提示气滞血瘀型为负值,与其他3型明显不同（P〈0．01）;肝郁脾虚、湿热蕴结、肝肾阴虚型的彩度值呈现为逐渐增加的特点（P〈0．01）,与兴奋纯度的结果一致;色差比较中,以人眼观察能力为衡量方式的结果量化了不同证型舌色的各矢量差别。结论：原发性肝癌不同证型患者的舌色存在着明显色差,与临床舌色的特点相符,这将为原发性肝癌中医辨证分型标准的统一提供客观参考,有利于舌诊度量的标准化与规范化。     

四种HBV DNA 荧光定量PCR试剂比较及其结果分析

目的 评价3种国产HBV DNA荧光定量PCR试剂的特异性和灵敏度.方法 采用德国QIAGEN公司的Artus HBV DNA荧光定量PCR试剂(A)和国内生产的3种HBV DNA荧光定量PCR试剂(B、C、D)对203例HBV感染者血清标本进行平行检测,分析3种国产试剂与Artus试剂检测结果的差别及其相关性.结果 4种试剂检测203例血清标本HBV DNA的结果分别是A (5.78±1.78)、B(5.70±1.34)、C(5.51±1.96)、D(5.60±1.52),3种试剂与Artus试剂的相关系数分别为B:0.860、C:0.954、D:0.922. 对于HBV DNA载量高于106拷贝/ml的标本,3种国产试剂检测结果的均值与Artus无明显差异,但试剂B与Artus相关性明显不如试剂C和试剂D;对于HBV DNA载量在103～106 拷贝/ml的标本,试剂B和试剂C的均值水平与Artus试剂存在明显差别,试剂C和D与Artus试剂的相关性要优于试剂B;而对于30～103 拷贝/ml的标本,试剂B和试剂D的均值与Artus结果存在显著差异,且3种国产试剂与Artus试剂相关性很差.在26例30～103拷贝/ml样本中,3种国产试剂分别漏检8例(30.8%)、8例(30.8%)和11例(42.3%),7例<30拷贝/ml样本中3种国产试剂无一检出.结论 3种国产试剂的敏感性均较Artus试剂差,尤其是病毒载量低于103拷贝/ml的标本.在3种国产试剂中,试剂C与Artus试剂检测的结果相关性最好.     

基于CD161的流式检测技术在艾滋病合并结核诊断效能的评价

目的 评价基于CD161的流式检测技术在艾滋合并结核感染中的应用价值。方法 用流式检测技术分别检测58例结核病患者（TB）,55例艾滋病合并结核病患者（HIV+TB）,122例艾滋病患者(HIV)及138例健康对照（HC）全血中CD161的表达水平;同时比较CD161流式检测技术、GeneXpert、TB-DNA、γ-干扰素释放试验（IGRAs）和AFB在TB-HIV中的检测阳性率。结果 TB外周血中淋巴细胞和CD161的表达水平显著低于HC,相反TB中单核细胞和OR值高于HC,但不受HIV感染影响。当OR阈值＞0.45时,分辨HC与TB-HIV时,AUC为0.91,灵敏度92.73%,特异度84.06%。在分辨TB和HC时,AUC为0.86,灵敏度74.14% ,特异度82.61%。平行比较AFB、TB-DNA、GeneXpert、IGRAs、CD161检测方法的HIV-TB阳性率,分别为20%、40 %、54.5%、38.1%和92.7%。当HIV-TB的CD4＜100 个/μL时上述5个检测技术的阳性率分别为26%、39.1%、60.8%、30.4%和82.6%。CD4≥100 个/μL患者组检出率分别为15.6%、37.5%、50%、43.7%和100%。结论 流式CD161技术在检测活动性结核及合并艾滋病中具有很好的临床诊断应用价值。