NAT2基因多态性与抗结核药物性肝炎的相关性

目前造成肝损害最常见的一线抗结核药物是异烟肼,其主要通过N-乙酰化酶代谢,后者由NAT2(N-acetylteansferase 2)基因编码.     

CD161流式细胞术对活动性肺结核诊断效能的评价

目的 探讨以淋巴细胞表面分子CD161为标识的流式细胞术对活动性肺结核的诊断价值。方法 回顾性研究2020年4—12月在该院住院的活动性肺结核患者268例,其中痰涂片结果为阳性的患者170例作为涂阳组,3次或以上痰涂片结果未见结核分枝杆菌(TB)的患者98例为涂阴组。另选取该院的体检健康者138例为对照组。采用流式细胞术检测各组淋巴细胞、单核细胞和CD161阳性淋巴细胞比例。基于流式细胞术建立深度学习网络模型对活动性肺结核进行诊断,并与GeneXpert、TB-DNA、酶联免疫斑点(Elispot)试验的诊断效能进行比较。结果 各组淋巴细胞、单核细胞和CD161阳性淋巴细胞比例及OR比较,差异有统计学意义(P<0.05);GeneXpert、TB-DNA、痰培养、Elispot在涂阳患者中的检出率分别为87.65%、81.18%、60.00%、85.29%,深度学习网络模型在涂阳结核、涂阴结核患者中的检出率分别为77.05%、71.42%;深度学习网络模型鉴别涂阳组和对照组的受试者工作特征曲线下面积(AUC)为0.87(95%CI 0.84～0.91),准确率为0.82,灵敏度为...     

全人源单克隆抗体安巴韦单抗-罗米司韦单抗对COVID-19患者的安全性与疗效：一项Ⅱ期临床试验

目的评估单次静脉输注安巴韦单抗和罗米司韦单抗组合在两个剂量水平下给药对我国新型冠状病毒感染(COVID-19)患者的安全性和有效性。方法本研究采用单臂、开放性设计(A组)和单盲、随机、安慰剂对照、平行组设计(B组)。A组纳入了患有重症COVID-19的成人受试者(n=8), 全部接受安巴韦单抗和罗米司韦单抗1 000 mg/1 000 mg单次给药。B组纳入了非重症COVID-19或无症状感染的成人受试者(n=43), 以1∶1的比例随机接受抗体联合方案500 mg/500 mg单次静脉输注(抗体组, n=21)或生理盐水(安慰剂组, n=22)给药, 其中抗体组2例、安慰剂组1例于给药前退出研究。主要研究终点为安全性评估, 包括不良事件及严重不良事件发生率(A组和B组), 和第8天鼻咽拭子中严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(SARS-CoV-2) RNA水平较基线水平的时间加权变化(B组)。次要终点包括病毒RNA阴转率、COVID-19相关症状的评估和临床转归。结果共有48例受试者进入研究入组并接受研究给药。A组5/8例受试者发生了12例次不良事件。B组抗体组和安慰组的受试者中不良事件...     

肠道病毒71型手足口病ELISA诊断试剂盒研制与临床应用

目的 研制早期快速检测抗肠道病毒71型(EV71)抗体的ELISA血清学诊断性试剂盒,评价其临床应用价值.方法 将表达纯化的EV71重组蛋白VP1作为包被抗原,建立EV71型手足口病间接ELISA的血清学检测方法 .通过与逆转录(RT)PCR方法 、EV71病毒分离试验和微量血清中和试验比较,评价抗.EV71 IgM和抗-EV71 IgG血清学诊断方法 在EV71型手足口病的诊断价值.结果 与RT-PCR比较,抗-EV71 IgM敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为83%、85%、81%和87%;抗.EV71 IgG敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为72%、74%、68%和77%.与EV71病毒分离方法 比较,抗-EV71 IgM敏感度、特异度分别为85%和97%;抗-EV71 IgG敏感度、特异度分别为75%和77%.通过直线相关分析发现,抗-EV71 IgG抗体滴度和中和抗体滴度呈显著正相关(r=0.72,P＜0.05).EV71型手足口病患儿恢复期血清抗IgG滴度较急性期升高(P＜0.01),但抗IgM滴度差异无统计学意义(P＞0.05).结论 利用VP1重组蛋白作为包被抗原,成功开发ELISA检测人血清抗-EV71 IgM和抗-EV71 IgG抗体的诊断试剂盒.     

硒蛋白S过表达载体的构建及其在肝癌细胞SMMC7721中的表达鉴定

目的构建硒蛋白S基因(SELS)真核表达载体pCMV-SELS,转染肝癌SMMC7721细胞,实现SELS在SMMC7721中的成功过表达。方法通过基因克隆技术将SELS基因的完整ORF插入真核表达载体pCMV-3tag-3a(+),得到阳性真核表达质粒pCMV-SELS,将其瞬时转染到肝癌SMMC7721细胞中,利用RT-PCR与Western blot方法验证SELS的过表达水平。结果成功构建了真核表达质粒pCMV-SELS,将其瞬时转染SMMC7721细胞后24 h,收集细胞进行RT-PCR和Western blot检测,结果显示:与阴性对照组pCMV-3tag-3a(+)转染组相比,实验组pCMV-SELS细胞中SELS的mRNA和蛋白表达水平均有显著升高,两组比较具有统计学差异(P<0.05)。结论成功构建真核表达载体pCMV-SELS,并实现了SELS基因在SMMC7721细胞中的过表达。     

禽流感病毒感染K-562和HL-60肿瘤细胞系的实验研究

目的选择代表不同骨髓细胞分化阶段的血液肿瘤细胞株K-562、HL-60作为研究对象,选取低致病性禽流感病毒H3N2/H4N6作为病原体,探讨禽流感病毒感染骨髓的机制。方法应用流式细胞术检测K562等细胞表面禽流感病毒受体;收集感染病毒的细胞培养上清,红细胞凝集实验检测染毒细胞释放的子代病毒;收集感染病毒的细胞免疫荧光检测病毒NP,判断病毒吸附、进入细胞并在细胞内增殖、复制情况。结果所检测细胞表面均有禽流感病毒SAα2,3-Gal和SAα2,6-Gal连接的唾液酸寡糖受体的表达。在H3N2感染的K-562细胞培养上清中检测到病毒HA,且随培养时间的延长,病毒的血凝滴度增大。在H4N6感染的K-562细胞的培养上清中病毒HA检测阳性,第三天,K-562细胞上清的病毒血凝滴度即达4,第四天达16;HL-60细胞,只在第三、四天达2;随后荧光显微镜下观察可见,染毒细胞培养0h时,胞膜、胞浆内即可见病毒分布,H4N6感染的细胞荧光强度大于H3N2感染的细胞;H3N2和H4N6感染的细胞中,K562细胞的荧光强度大于其他细胞。随着培养时间的延长,K562细胞表面的病毒增多,而HL-60细胞无明显变化。结论 K-562、HL-60细胞表面均表达禽流感病毒SA-α2,3Gal和SA-α2,6Gal连接的唾液酸寡糖受体。同一病毒H3N2或H4N6的吸附、繁殖和复制及释放情况存在较大差异。     

中药正肝化瘀方对肝纤维化大鼠肝组织胶原代谢的影响

目的:观察正肝化瘀方对肝纤维化大鼠肝组织胶原代谢的影响。方法:采用四氯化碳+高脂低蛋白饮食制备大鼠肝纤维化模型,治疗组以正肝化瘀方灌胃,正常组、模型组予以等量生理盐水灌胃,6 w后取材检测。用Jamall氏法测定各组大鼠肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量,Western blot法检测各组大鼠肝组织α-SMA、Ⅰ型、Ⅳ型胶原蛋白的表达。结果:与模型组比较,治疗组大鼠肝组织Hyp含量及α-SMA、Ⅰ/Ⅳ型胶原蛋白表达均降低(P<0.05,P<0.01)。结论:正肝化瘀方的抗肝纤维化机制与减少肝组织胶原合成与沉积有关。     

他汀类降脂药对急慢性脑血管病的远期疗效及卒中再发风险的影响

目的：观察他汀类降脂药对急慢性脑血管病的远期疗效及卒中再发风险的影响。方法选取2009年5月～2010年5月我院就诊的急慢性脑血管病患者215例,随机分为研究组107例及对照组108例,观察IMT及动脉粥样硬化斑块面积的变化及血脂改变、心脑血管不良事件发生情况。结果治疗组患者治疗后与对照组TG、TC、LDL-C及HDL-C比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。两组患者12、18、24个月时两组IMT值比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;对所有患者随访2年,研究组致死性脑卒中、非致死性脑卒中、冠状动脉事件发生率及死亡率皆显著低于对照组,两组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论阿托伐他汀安全、有效、耐受性好,不良反应少,可作为伴有颈动脉粥样硬化患者的常规用药。     

酶联免疫斑点试验检测技术（Elispot）在诊断结核性脑膜炎及Ⅲ型肺结核中的应用价值

目的评价酶联免疫斑点技术（Elispot）检测外周血结核杆菌抗原特异性r干扰素（IFN-r）水平在结核脑膜脑炎及Ⅲ型肺结核患者诊断中的应用价值。方法利用Elispot技术分别对383例结核病人（包括73例结核性脑膜炎患者、310例Ⅲ型肺结核患者）、97例健康人外周血结核杆菌抗原特异性r干扰素（IFN-r）水平进行定量检测。结果Elispot技术在结核病中诊断敏感性为81．46％,特异性为85．57％;结核脑膜脑炎组Elispot阳性率为61．64％;Ⅲ型肺结核患者组Elispot阳性率为86．13％;健康对照组Elispot阳性率为10。31％;各组间比较差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论Elispot技术在结核病诊断中具有良好的辅助诊断价值,在Ⅲ型肺结核中的诊断价值优于结核性脑膜脑炎。     

假病毒技术在抗H5N1禽流感病毒中药筛选中的应用及评价

目的：建立基于假病毒技术的抗H5N1禽流感病毒中药筛选方法,利用血清药理学的方法系统评价攻下方、解毒方、凉血方和扶正方4类中药复方体外对H5N1禽流感病毒活性的影响及其机制。方法：构建整合H5N1禽流感病毒血凝素（hemagglutinin,HA）蛋白的假病毒,雄性Wistar大鼠25只灌胃不同中药制备复方中药血清。采用犬肾（Madin-Darby canine kidney,MDCK）细胞和人胚肾细胞293T为研究对象,将不同浓度药物血清分别与假病毒或靶细胞体外培养后,观察药物血清对假病毒活性的直接抑制作用,通过流式细胞术检测药物血清对H5N1禽流感病毒HA蛋白表达的影响。结果：HA蛋白特异性中和抗体2B4在50μL（抗体总量500μg）、25μL（抗体总量250μg）及12.5μL（抗体总量125μg）的剂量条件下均可以有效抑制假病毒的感染活性,从而证实利用假病毒技术筛选药物的方法的可行性。与对照血清相比,4种复方中药含药血清体外对假病毒均无明显抑制作用（P〉0.05）,也不能有效预防假病毒感染（P〉0.05）,不能抑制H5N1流感病毒HA蛋白的表达。结论：假病毒技术是一种安全、高效、精确的筛选抗H5N1禽流感病毒中药的方法;4类复方中药含药血清并不含有作用于H5N1假病毒HA蛋白及唾液酸α-2,3半乳糖苷受体的有效成分或单体。