侵袭性感染高黏液性肺炎克雷伯菌毒力因子及分子特征研究

目的研究侵袭性感染高黏液性肺炎克雷伯菌(HMKP)与非高黏液性肺炎克雷伯菌(non-HMKP)的药敏结果、毒力因子及分子特征。方法收集2016年11月-2018年5月从侵袭性感染患者分离的肺炎克雷伯菌112株作为实验菌株,拉丝试验阳性的确定为HMKP;纸片法进行肺炎克雷伯菌产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的表型确证;采用聚合酶链反应(PCR)检测相关荚膜血清型和毒力基因;采用铬天青S(CAS)双层培养基检测细菌铁载体;用肠杆菌科基因间重复一致序列PCR(ERIC-PCR)对肺炎克雷伯菌进行同源性分析。结果 112株非重复肺炎克雷伯菌中HMKP 47株,检出率为41.96%。脓液标本检出率最高,为52.17%(12/23)。HMKP对抗菌药物的耐药率低于non-HMKP,有5株(10.64%)HMKP产ESBLs。HMKP荚膜血清型以K1型为主,HMKP的毒力基因检出率均高于non-HMKP,铁载体检出与aerobaction基因一致。ERIC-PCR指纹图谱结果显示HMKP可聚类为27个基因型。结论侵袭性感染患者HMKP分离率高,且携带多种毒力基因,并已出现多药耐药菌株,应引起临床高度重视,采取有效措施控制其传播。     

约氏疟原虫子孢子胞内游离钙的检测方法研究

目的　研究疟原虫子孢子的胞内Ca2 + 的检测方法。方法　应用共聚焦激光扫描显微镜 (CLSM )观察约氏疟原虫子孢子的胞内游离Ca2 + 分布、变化和检测的实验条件。结果　 3μmol/LFluo - 3/Am同时加入 1μl/ml2 5 %PluronicF - 12 7在37℃恒温下 ,孵育分离的子孢子 6 0min即可达到最佳的负载效果。Fluo - 3/Am浓度的提高和孵育时间延长只能增加背景染色 ,若降低孵育浓度和缩短孵育时间则难以达到最佳的负载效果。静息时子孢子胞内Ca2 + 分布均匀 ,均值为 71 2± 4 8nmol/L。结论　应用Fluo - 3/AM和PluronicF - 12 7结合CLSM技术是研究疟原虫子孢子胞浆内游离Ca2 + 的准确、灵敏的方法之一。     

大劣按蚊丝氨酸蛋白酶与疟原虫感染相关性研究

目的探讨大劣按蚊血淋巴中丝氨酸蛋白酶与约氏疟原虫感染的相关性。方法首先利用二维电泳分离感染约氏疟原虫的和吸食正常血的大劣按蚊血淋巴蛋白;然后进行Western blot,用丝氨酸蛋白酶抗体进行识别,并比较感染组与正常对照组间的区别;选择感染后不同时相点对大劣按蚊蚊胃和唾液腺进腺镜检,以观察蚊体内疟原虫情况。结果Western blot显示,正常对照组无阳性蛋白点,感染组有2个阳性蛋白点,分子质量单位分别为44ku和27ku,等电点分别为8.0和5.0;镜检显示,感染7d时可见卵囊颗粒样病变,11d时卵囊发育不同步且黑化明显,之后检出的卵囊数逐渐减少。蚊唾液腺内未见子孢子。结论大劣按蚊血淋巴中的丝氨酸蛋白酶与约氏疟原虫感染相关,可能参与蚊抗疟原虫感染的黑化包被反应。     

共聚焦激光扫描显微技术在寄生虫学研究中的应用

共聚焦激光扫描显微镜(confocal laser scanning microscope,CLSM)是新颖的分子细胞生物学分析仪器,较传统荧光显微镜有着不可比拟的优势。它的高分辨率、无损伤连续光学切片、三维图像重建等功能已广泛应用于医学、细胞生物学的研究,在寄生虫学领域中的应用也正在逐步开展。若结合其他的生物学技术,其应用范围将进一步扩大。因此。了解它的基本性能、特点将有助于更深入的应用。     

金标免疫渗滤法检测斯氏狸殖吸虫病患者血清IgM的评价

目的为寻求简便、可靠的方法,用于斯氏狸殖吸虫病早期诊断及疗效考核。方法建立检测斯氏狸殖吸虫病患者血清IgM抗体的金标免疫渗滤法(DIGFA),并对53例患者在治疗前和治疗后血清中特异抗体水平的动态变化进行研究。结果斯氏狸殖吸虫病患者经有效药物治疗后3个月、6个月、1年、1．5年连续采血,经DIGFA检测连续观察的结果表明,IgM抗体出现较早,阴转较为明显和迅速,治疗后3个月的阴转率就达47．2％(25／53),1年的阴转率可达86．8％(46／53);而IgG抗体则出现较晚,阴转缓慢,治疗后1．5年的阴转率仅为15．1％(8／53)。结论DIGFA检测斯氏狸殖吸虫病患者血清IgM抗体可作为早期诊断及疗效考核的有效方法。     

天然溶瘤新城疫病毒Italien株HN基因真核表达载体的构建和表达

目的 构建天然溶瘤型新城疫病毒(NDV)Italien株血凝素-神经氨酸酶(HN)基因的真核表达载体并进行产物表达.方法 采用RT-PCR法从病毒RNA中克隆HN cDNA,并构建HN的真核表达载体pcDNA3.1-HN,脂质体法转染CHO-K1,G418筛选稳定表达克隆.用Western blot、免疫荧光法检测HN蛋白的表达.结果 经限制性酶切鉴定及DNA测序分析,证实真核表达载体pcDNA3.1-HN构建正确.Western blot和免疫荧光分析表明HN基因在CHO-K1中成功表达.结论 天然溶瘤型NDV Italien株的HN cDNA被成功克隆,所构建的真核表达载体pcDNA3.1-HN可以在CHO-K1细胞中稳定表达.     

通过分层次教学提高老年医学教学质量

为提高老年医学教学质量,在教学过程中将传统教学与分层次教学结合起来。一方面注重全部学生整体思维、国际视野、科学精神和人文关怀等共同理念的培育,另一方面区分本科生、研究生、进修生三个不同的学习群体进行分层次教学。根据不同层次学习群体的特点,设定不同的教学目标和教学内容,采用不同的教学方式和考核评价方式,尽可能做到因材施教,提高教学针对性,激发学生学习潜能,从而提高教学质量。     

人体寄生虫学实验课参与式教学的研究与实践

参与式教学是通过设置问题，建立学习激励机制，调动学员主动学习的一种实验课教学方法。经教学实践证明，参与式教学可以极大地调动学员的学习积极性，其方法新颖灵活，每次课都有新的内容和目标，学员在学习中参与意识强，收获大，整个教学过程既愉快又充满挑战性。     

雌二醇对大鼠垂体前叶细胞影响的体内外实验

0　引言　催乳素腺瘤是分泌催乳素 (PRL )的垂体腺肿瘤 ,在人类发病率较高 ,发病原因尚不清楚 .早在 2 0世纪 30年代已经发现给予雌激素能使垂体催乳活性增强 [1 ] ,我们以苯甲酸雌二醇 (β- E2 )诱发大鼠垂体催乳素瘤 ,研究雌激素在体内和体外对大鼠垂体前叶 (AP)的影响 .1　材料和方法1.1　材料　胰蛋白酶、MTT,DAB,ABC试剂盒均购自美国Sigma公司 ;兔抗鼠抗 PRL抗体购自 Santa Cruz公司 ;β- E2购自上海市第九制药厂 .1.2　动物实验　 SD雄性大鼠 2 0只 (体质量 15 0～ 180 g)随机分为 2组 ,每组 10只 .给药组 :每只皮下注射含…     

寄生虫的半胱氨酸蛋白酶

半胱氨酸蛋白酶在寄生虫的生物特性中起多种不可缺少的作用 ,除分解代谢与蛋白处理过程外 ,可能是寄生虫免疫逃避、脱包囊 /包囊形成、脱鞘和组织细胞入侵的关键物质。寄生虫半胱氨酸蛋白酶可作为血清学诊断的标记物、化学疗法和疫苗的靶分子。本文突出介绍半胱氨酸蛋白酶的生物学特性和功能以及作为抗寄生虫药物的靶目标的研究内容。