SSH技术及其在肿瘤研究中的应用

随着人类基因组计划的完成，人们已经把越来越多的目光投向不同细胞或者不同生理和病理状态下基因的差异性表达（differential display）。这些基因的选择性表达决定了机体的整个生命过程，基因表达的改变正是处于控制生物学调节机制的中心位置。对于肿瘤来说，其发生发展涉及多种基因的相互作用，这些基因的差异性表达也决定了肿瘤的多样性表型。目前分离并且克隆差异性表达基因成为了功能性基因研究的热点。对肿瘤差异基因的分离克隆不但有助于我们理解肿瘤发生发展的分子机制，而且对肿瘤的早期诊断、靶向治疗和有效预防都具有重要的生物学和临床意义。分离差异表达基因的方法有很多，我们比较熟悉的经典方法有：差异显示技术（DD-PCR）、在此基础上发展起来的代表性差异显示技术（RDA—PCR），     

复合型食管癌一例报告

1、病例报告。患者男，68岁，因进行性吞咽困难半个月来我院就诊，院外食管钡餐检查提示，食管中段癌，我院食管钡餐检查提示，食管平T1-T2平面可见菜花状充盈缺损，管腔扩张，钡剂通过明显受阻，该处管壁僵硬，黏膜破坏，病变长约11cm，贲门未见异常。     

重组人内皮抑素腺病毒抗肿瘤实验研究

目的肿瘤生长具有血管依赖性。内皮抑素为胶原X羧基末端裂解片段,是重要的内源性血管抑制因子。实验中利用重组人内皮抑素腺病毒(recombinanthumanendostatinadenorirus,Ad-hEndo)在肿瘤局部给药以探索其抗血管基因治疗的可行性。方法以Ad-hEndo感染体外培养肿瘤细胞,观察重组蛋白表达及其对培养的血管内皮细胞的抑制效应;在裸鼠A549肺癌模型中瘤内注射重组病毒,观察肿瘤抑制效应、剂量依从效应和毒副反应。结果不同感染复数的Ad-hEndo感染肿瘤细胞均表达重组内皮抑素蛋白,并能抑制血管内皮细胞的生长。动物实验中Ad-hEndo治疗组肿瘤体积及肺转移结节数明显低于对照组,且转移数与治疗剂量负相关。结论以腺病毒为载体的肿瘤局部血管基因治疗能抑制肿瘤新生血管形成进而有效抑制肿瘤生长和转移,其效应具有剂量依从性。     

血管靶向及抗血管生成联合放射治疗的研究进展

肿瘤的生长必须依赖足够的血供，切断肿瘤的血供则可抑制肿瘤生长，甚至造成肿瘤细胞坏死。以肿瘤血管内皮细胞为靶点，从而影响肿瘤血供的治疗方法是近几十年来肿瘤学研究中一个相当热门的领域。其治疗作用具有：①高效性，一根血管可供应较多的肿瘤细胞，药物易于到达作用部位；②广谱性，肿瘤都需要血供；③不易耐药，内皮细胞不易发生突变等优点。具体又分为血管靶向和抗血管生成两种策略，前者针对已有的肿瘤血管，后者着眼于抑制肿瘤新生血管生长。二者既有区别又联系紧密，有时难于完全区分。     

氟脲嘧啶代谢相关酶的药物遗传学研究进展

5-氟脲嘧啶（5-FU）是临床广泛运用的肿瘤化疗药物，尤其在消化道肿瘤、乳腺癌、头颈肿瘤治疗中发挥重要作用。但以氟脲嘧啶为基础的化疗方案，在治疗效果和毒副反应方面存在着很大的个体差异。药物遗传学在代谢酶、转运蛋白及受体等方面的研究进展，使得提高5-FU疗效，降低毒副反应，实现个体化治疗成为可能。本文重点阐述氟脲嘧啶代谢酶及其作用机制的研究进展。     

白介素-2联合长春瑞滨、顺铂治疗晚期非小细胞肺癌的观察及护理

非小细胞肺癌(non smallcelllungcancer, NSCLC)约占全部肺癌的80%,对化疗的敏感性远不 如小细胞肺癌。近年来随着新化疗药物的应用,晚期 NSCLC的联合化疗取得较好效果,但化疗的同时往往 伴有严重的骨髓及免疫抑制。我科从2001年12月至 2004年6月采用白介素 2配合长春瑞滨(盖诺)和顺 铂治疗晚期NSCLC共72例,疗效较好,副反应能够 耐受,现将观察结果及护理经验介绍如下。 1　临床资料 1.1　病例选择　由组织学或细胞学证实的晚期 NSCLC;近1月内未接受抗肿瘤治疗;Karnofsky评分 ≥70分;治疗前肝肾功能、血象正常,ECG正常;预计 生存期…     

热、化疗联合治疗晚期非小细胞肺癌初探

背景与目的晚期非小细胞肺癌化疗有效率低,而热、化疗联合已在多种实体瘤的治疗中取得良好效果。本研究旨在探讨热疗与化疗联合治疗晚期非小细胞肺癌的可行性及近期疗效。方法51例晚期非小细胞肺癌患者入选,其中热化疗组(HC组)22例,单纯化疗组(C组)29例,均给予NP(长春瑞滨 顺铂)或GP(吉西他滨 顺铂)方案化疗2个周期。热化疗组使用13.8MHz局部射频热疗机同步进行热疗,每周2次,共12次。结果热化疗组有效率为22.7%,单纯化疗组为13.8%(P>0.05);热化疗组临床受益率为68.2%,而单纯化疗组为34.5%(P<0.05)。两组患者治疗前后KPS评分的变化无统计学意义。结论初步观察到热、化疗联合治疗晚期非小细胞肺癌有良好的耐受性和较好的近期疗效,值得进一步研究。     

小细胞肺癌相关神经系统副肿瘤综合征诊断及治疗的研究进展

神经系统副肿瘤综合征（paraneoplastic neurologic syndromes，PNS）是指在无转移性、感染性或代谢性并发症时与肿瘤有关的神经系统损害。其发病机理目前尚未完全清楚，但研究表明肿瘤抗原和正常神经系统抗原导致的交叉免疫反应是致病的重要因素。小细胞肺癌（SCLC）较常伴发PNS，其病变种类较多，临床症状复杂。某些PNS还可在短时期内导致患者死亡，因此对其及时的诊断和治疗愈显重要。PNS可分为中枢神经系统PNS及周围神经系统PNS，     

婴儿双歧杆菌/胞嘧啶脱氨酶肿瘤靶向性基因治疗系统的构建(英文)

目的构建婴儿双歧杆菌/胞嘧啶脱氨酶靶向性基因治疗系统。方法 PCR 扩增 CD 基因,EcoR Ⅰ,BamH Ⅰ对 CD 基因和 pGEX-1LamdaT 质粒同时进行双酶切,获得4.9 kb、1.3 kh 两个 DNA 片段。T4 DNA 连接酶连接这两个片段构建重组的CD/pGEX-1LamdaT 质粒,然后用电穿孔法将重组质粒转染婴儿双歧杆菌。从阳性转染的婴儿双歧杆菌中提取重组质粒,双酶切后检测切取片段长度,采用 Sanger 双脱氧链终止法对提取的重组质粒中的插入片段进行测序。结果从阳性转染的婴儿双歧杆菌中获得了6.2 kb大小的重组质粒,该质粒经双酶切后,得到了4.9 kb 和1.3 kb 两个长度的片段,其长度分别与 pGEX-1LambdaT 及 CD 基因的长度相同。测序结果显示,提取的重组质粒中插入的基因片段全长及核苷酸序列与 CD 基因完全相同。结论外源性 CD 基因被准确插入 pGEX-1LambdaT 质粒并转入婴儿双歧杆菌中,婴儿双歧杆菌/胞嘧啶脱氨酶靶向性基因治疗系统被成功构建。     

EBV-LMP1与HSP90真核双表达质粒的构建及体外表达

目的从鼻咽癌组织中克隆EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)与热休克蛋白90β(HSP90β)基因,构建其真核双表达质粒pIRES-LMP1-HSP90β,并检测其在体外的表达。方法提取鼻咽癌组织总RNA,逆转录PCR获得LMP1基因片段和HSP90β基因片段,将二者连接于真核双表达质粒pIRES中,测定序列后,用脂质体包裹转染COS细胞,采用RT-PCR和Westernblot检测LMP1和HSP90β的表达。结果核酸序列测定证实本实验所构建的质粒正确,该双表达质粒在体外转染COS细胞后可表达LMP1和HSP90β分子。结论实验所构建的pIRES-LMP1-HSP90β双表达质粒能在体外同时表达LMP1和HSP90β分子。