安神方的抗焦虑作用

目的观察安神方颗粒的抗焦虑作用,并研究其机制。方法 60只雄性Wistar大鼠随机分为6组(10只/组):正常对照组、模型组、地西泮组和安神方高、中、低剂量组。采用慢性情绪应激的方法建立焦虑大鼠模型,同时给予药物干预,以高架十字迷宫试验对其行为学进行评价。行为学观察后,麻醉处死正常对照组、模型组、地西泮组及安神方中剂量组大鼠,冰台上分离大鼠海马,冷冻离心后分离上清液,高效液相色谱法测定谷氨酸、γ-氨基丁酸(GABA)含量;用免疫组织化学法测定γ-氨基丁酸受体(GABAAR)、N-甲基-D-天冬氨酸受体1(NMDAR1)的表达。结果与正常对照组比较,模型组大鼠进入开臂的时间百分率、次数百分率明显减少;地西泮组与安神方高、中、低剂量组大鼠进入开臂的时间百分率、次数百分率较模型组显著上升,以安神方中剂量组上升最明显;模型组大鼠海马组织中谷氨酸的表达量较正常对照组显著上升,GABA的表达量明显下降;地西泮组和安神方中剂量组同模型组比较,大鼠海马组织中谷氨酸的表达量显著降低和GABA的表达量明显提高,安神方中剂量组与地西泮组比较差异不显著;模型组与正常对照组比较,GABAAR免疫阳性细胞表达减少,NMDAR1免疫阳性细胞表达表达增多;地西泮组和安神方中剂量组同模型组比较,NMDAR1的表达水平降低,GABAAR的表达水平提高,安神方中剂量组与地西泮组比较无明显差异。结论安神方具有抗焦虑的作用,可以提高中枢GABA的含量,增强GABAAR的表达,降低谷氨酸含量,减少NMDAR1的表达。     

柴胡疏肝汤对难治性癫痫大鼠脑电图及多药耐药蛋白 P-糖蛋白表达的影响

目的:探讨柴胡疏肝汤对锂-匹罗卡品致难治性癫痫模型大鼠脑电图变化以及多药耐药蛋白P-糖蛋白(P-gp)表达的影响。方法:将制备成功的50只SD难治性癫痫大鼠模型随机分为5组,模型组(B)、丙戊酸钠(VPA)组(C)、柴胡疏肝汤低(D)、中(E)、高(F)剂量组,每组各10只,另有空白对照组(A)10只。柴胡疏肝汤是以柴胡桂枝汤和四物汤为基础方加味煎煮浓缩而成,含生药1 g.mL-1。VPA组用量为0.2 g.kg-1,柴胡疏肝汤低、中、高浓度依次为4.5,9,18 g.kg-1,空白组和模型组给予等量生理盐水。各组均ig给药8周,给药结束后检测各组大鼠脑电图以及海马、颞叶皮层P-gp蛋白的表达。结果:脑电图:A组无痫性波出现,B组出现大量的痫性波,C,D,E,F组能不同程度的减少脑电图的痫性波,以F组最明显。在大鼠海马区、颞叶皮层,Western blotting检测各组P-gp表达,差异有统计学意义(P﹤0.01)。与A组相比,其余各组P-gp表达水平明显增强(P﹤0.01);与B组相比,C组表达水平增加(P﹤0.01),D,E,F组表达水平降低,以F组最明显(P﹤0.01)。结论:VPA明显增强难治性癫痫模型大鼠脑内海马、颞叶皮质P-gp蛋白的表达,柴胡疏肝汤低、中、高剂量均可以降低海马、颞叶皮层P-gp蛋白的表达以及脑电图的痫性放电,以高剂量组明显。     

小青龙汤对过敏性鼻炎豚鼠模型的干预作用

目的:探讨小青龙汤对过敏性鼻炎动物模型的干预作用.方法:以卵清白蛋白(OVA)滴鼻制备豚鼠过敏性鼻炎模型,随机分为6组,即正常组(A组)、模型组(B组)、氯雷他定组(C组)、小青龙汤高、中、低剂量组(D、E、F组),连续灌胃给药14天,于给药第7天及第14天动态观察并比较各组豚鼠擦鼻次数、打喷嚏次数及流涕程度.结果:用...     

尿激酶联合黄芪对环孢素A大鼠慢性肾纤维化组织中核因子-κB表达的影响及意义

目的探讨尿激酶（uPA）联合黄芪（AM）对环孢素A（CsA）大鼠慢性肾纤维化组织中核因子-κB（NF-κB）表达的影响及意义。方法采用1：7服灌胃CsA（25mg·kg^-1·d^-1）制备大鼠慢性肾纤维化模型,将大鼠随机分为5组：对照组、模型组、uPA组、AM组及联合治疗组,4周末取标本。HE染色观察肾脏组织结构变化;采用试剂盒测定肾组织羟脯氨酸的含量;应用免疫荧光观察P-p65的表达及定位;采用Western印迹法检测大鼠肾组织P—065、p65、IκBα和IκBβ的蛋白表达水平。结果与对照组相比,模型组肾小管损伤程度加重,羟脯氨酸含量增加,肾组织中NF-κB活化显著增强,p65由细胞质转移至细胞核,P-p65表达显著上调,IκBα降解明显增加（P均〈0．05）。与模型组相比,各治疗组肾小管损伤程度减轻,羟脯氨酸含量减少,P-p65表达被显著抑制,IκBα降解减少（P均〈0．05）,且联合组的治疗效果更显著。IκBβ的蛋白表达水平各组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论NF-κB信号通路介导了肾脏纤维化的发生发展,uPA与AM能减轻肾脏纤维化,这可能与其能抑制NF-κB通路激活有关。     

柴胡皂苷a对难治性癫痫大鼠痫性发作的影响

目的探讨柴胡皂苷a（SSa）对匹罗卡品致难治性癫痫模型大鼠痫性发作的影响。方法将制备成功的48只SD难治性癫痫大鼠模型随机分为模型组（B）、丙戊酸钠组（C）、柴胡皂苷a低剂量组（D）和高剂量组（E）4组,每组各12只,另有空白对照组（A）12只。A、B组给予等量生理盐水,C组用量为200mg/kg,D、E组用药浓度依次为1.09mg/kg、2.18mg/kg,A、B、C组灌胃给药,D、E组腹腔注射给药。分别观察给药4周、8周后痫性发作次数、平均发作时间及发作级别的变化。结果痫性发作方面,A组无痫性发作,B组大鼠痫性发作明显（P〉0.05）,C、D、E组大鼠痫性发作均有不同程度的减轻（P〈0.05）,E组大鼠痫性发作减轻最明显。结论柴胡皂苷a能减轻难治性癫痫大鼠的痫性发作,有明显的抗癫痫作用。     

中医证侯血浆蛋白质双向凝胶电泳方法的建立及优化

目的建立中医证侯血浆蛋白质双向凝胶电泳（2-DE）方法并对其进行优化。方法以正常人血浆样品为研究对象,对白蛋白/IgG球蛋白去除后血浆样品、全血浆和热SDS法全血浆样品进行pH梯度2-DE分离,凝胶经硝酸银染色后,利用PDQuest软件对2-DE图谱进行重复性分析,并对不同处理方法的全血浆2-DE图像的结果进行比较。结果与全血浆直接上样2-DE凝胶图谱比较,白蛋白/IgG球蛋白去除后血浆上样双向电泳蛋白有所增多,但由于白蛋白/IgG球蛋白去除过程中的非特异性吸附,造成了同一样品在蛋白质图谱上的明显差异;与全血浆直接上样和白蛋白/IgG球蛋白去除后血浆样品上样2-DE凝胶图谱比较,热SDS法处理血浆样品可以得到更多的蛋白质,且重复性好（P〈0.05）,凝胶硝酸银染色显示蛋白质点染色深、分散清楚。结论热SDS法全血浆上样2-DE分析法具有蛋白丢失少、操作简便、重复性好的特性,是证侯血浆蛋白质组学研究的有效手段。     

公务员亚健康中医体质特征分析

目的 调查分析公务员亚健康中医体质特征,为制定针对性的干预措施提供依据.方法 采用现场调查,应用<亚健康自评量表>、<中医体质量表>对广东省公务员进行大样本的整群随机抽样的流行病学调查研究.结果 (1)亚健康者和健康者的偏颇体质分布差异有统计学意义(P＜0.01).亚健康人群较易具有偏颇体质的倾向.偏颇体质频数以气虚体质居首位;(2)亚健康公务员中医体质分布以单一体质为多(36.4%),以气虚质比例(12.9%)居首位,但复合体质也不少(27.3%).复合体质以2种复合体质多见(6.4%).从亚健康公务员复合体质的频数来看,各种中医体质均容易与气虚质合并.按复合体质分布由大到小排序,排前三位的复合体质为气虚兼阳虚质(2.5%)、气虚兼气郁质(2.1%)和气虚兼痰湿质(1.3%).结论 进行亚健康状态中医体质辨识和分类研究,掌握亚健康中医体质特征,将为系统化干预亚健康提供一定的借鉴.     

自拟三小汤加味配合常规治疗慢性阻塞性肺病急性期临床观察

目的：观察自拟三小汤加味治疗慢性阻塞性肺病急性期的临床疗效。方法：60例慢性阻塞性肺病急性期患者随机分为观察组和对照组,每组各30例。对照组常规西医治疗,观察组在常规西医治疗的基础上服用自拟三小汤加味,14d后评价治疗效果。结果：观察组有效率93.33%,对照组有效率73.33%,2组疗效比较,有统计学差异（P〈0.05）。讨论：西药联合自拟三小汤治疗慢性阻塞性肺病急性期优于单纯西药治疗。     

早期痛风肾病的临床干预研究

目的：观察补肾痛风颗粒剂治疗早期痛风肾病的疗效。方法：60例早期痛风肾病患者按简单随机法分为补肾痛风颗粒剂治疗组和别嘌醇对照组。结果：治疗组总有效率为90．0％，对照组为56．6％，两组比较有统计学差异（P〈0，01）。两组均能降低血尿酸（UA）、24h尿尿酸，但组间比较无统计学差异（P〉0．05）；在降低尿＆微球蛋白（β2-MG）、视黄醇结合蛋白（RgP）、尿微量白蛋白（U-Alb）方面治疗组前后比较有统计学差异（P〈0．01），而对照组前后比较无统计学差异（P〉0．05）。结论：补。肾痛风颗粒剂治疗早期痛风。肾病疗效较好，值得进一步研究。     

运用抑制性消减杂交技术构建2型糖尿病肾阴虚证的相关基因文库

目的：运用抑制性消减杂交技术构建2型糖尿病肾阴虚证DNA消减文库，为制定2型糖尿病的一、二级康复预防提供理论参考。方法：选择2004—08南方医科大学南方医院内分泌科就诊的汉族2型糖尿病患者1例．符合中医肾虚证诊断标准中关于典型肾阴虚证的诊断，肝肾功能正常，无急慢性感染。以同时期、同性别、年龄相当的自愿者1名作为正常人对照。参照Maxim方法采用硅胶法抽提2例观察对象血白细胞DNA，用RsaⅠ酶切基因组DNA成大小不等的片段，分别与两种不同的接头连接，进行两次消减杂交及两次抑制性聚合酶链反应，将聚合酶链反应产物与U／A载体连接，经蓝白斑筛选及菌液聚合酶链反应筛选出阳性重组质粒，构建糖尿病肾阴虚证DNA消减文库。测定抽提基因组DNA的纯度及含量；基因组DNARsaⅠ酶切产物；消减杂交产物扩增结果；蓝白斑筛选阳性克隆；聚合酶链反应方法筛选重组质粒。结果：用抑制性消减杂交技术筛选出了糖尿病肾阴虚证的差异DNA片段．基因组DNA经过RasⅠ酶切消化后．所得DNA片段主要集中在200～2000bp；消减杂交产物经两次聚合酶链反应扩增后，产物明显增多，内含数条隐约可见的条带．主要集中在0．2～1．5kb；蓝白斑q互补筛选出含有外源插入片段的阳性克隆，结果正向消减杂交产物得到286个克隆．反向消减杂交产物得到262个克隆；随机挑取92个阳性克隆，经聚合酶链反应分析证实86个克隆的质粒内均载有差异性DNA片段，大小为200～1000bp，从而成功构建了糖尿病肾阴虚证特异的DNA消减文库。结论：抑制性消减杂交技术能够快速有效地分离差异DNA片段以构建糖尿病肾阴虚证DNA消减文库，为进一步筛选和克隆糖尿病肾阴虚证相关基因奠定了基础。