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471.
樟柳碱在Beagle犬血清中的药动学研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的建立高效液相色谱-质谱联用(LC-MS)测定Beagle犬血清中樟柳碱的分析方法。方法采用沉淀及萃取相结合的方法提取样品,LC-MS分析方法,选择负离子测定模式,测定Beagle犬单剂量iv樟柳碱0.2mg/kg后樟柳碱的血药浓度。结果该方法线性、回收率和重现性良好,批内、批间变异系数均在10%以内,样品提取后24h内稳定,灵敏度可达到1ng/mL,出峰时间为3.1min,Cmax为(145.07±32.63)ng/mL,tmax为(0.04±0.06)h,AUC(0-t)为(361.10±26.01)mg·h/mL,CL为(5.56±0.41)L/h,t1/2为(1.67±0.34)h,Vd为(13.39±3.05)L。结论此方法简便、快速,专属性强,灵敏度高,能够准确测定血中氢溴酸樟柳碱,有实际意义。 相似文献
472.
幽门螺杆菌基因分型及耐药检测寡核苷酸芯片的制备及鉴定 总被引:3,自引:0,他引:3
目的探讨应用寡核苷酸芯片简单快速检测幽门螺杆菌(HP)感染并对其致病性相关的基因型及耐药性同时进行检测的方法,并进行鉴定。方法根据Hp的致病性将其分为cagA 和cagA-两种基因型,通过检测23SrRNA基因是否发生点突变判断其对克拉霉素的耐药性。应用寡核苷酸芯片技术对临床标本的Hp进行基因分型和耐药性检测,并制备相应的寡核苷酸芯片。通过构建的野生型模板和突变模板证实制备的寡核苷酸芯片的准确性。结果制备的寡核苷酸芯片可准确地将Hp分为cagA 和cagA-两种基因型,并能够通过检测23SrRNA基因中4种常见的、与克拉霉素耐药性密切相关的点突变,判断幽门螺杆菌对克拉霉素的耐药性。结论应用寡核苷酸芯片可快速检测Hp感染并同时对其致病性相关的基因型及耐药性进行检测。 相似文献
473.
474.
475.
研究目的:Ⅱ号药(6-硝基吲唑类化合物)是放射所药物室合成的一种放射增敏剂,经体内外实验证明,有很好的放射增敏作用。为了临床安全用药,我们用Ames试验、CHO—K细胞染色体畸变试验及小鼠微核试验对本化合物的致突变性进行了研究。材料与方法:Ⅱ号药由放射医学研究所药物室合成,淡黄色结晶,纯度大于98%,熔点192~194℃Ames菌株为组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌TA97、TA98、TA100、TA102。CHO.k细胞为中国仓鼠卵巢细胞。实验动物选用纯系615小鼠。Ames试验:采用平板掺入法.分别在加与不加代谢活化物(S9mix)两种条件下进行测试。5个剂量组的受试物剂量分别为5000μg/皿、500μg/皿、50μg/皿、5μg/皿和1μg/皿,同时设自发回变组、阴性对照组(溶媒对照)和阳性对照组,后者分别采用敌克松(Dexon)和2.氨基芴(2-AF)。每组3个平皿,做2次独立测试,实验结果以回变菌落数表示。 相似文献
476.
研究目的:9401号药是以烟酰胺为母体化合物合成的烟酰胺基酸类化合物,经研究发现,9401号药对体外培养的恶性肿瘤细胞有明显的放射增敏作用。本文采用动物肿瘤模型将进-步观察9401号药的放射增敏效应。材料与方法:动物及模型:选用ICR小鼠,鼠龄7—8周,体重18—20克,雌雄各半。瘤株为移植性实验肿瘤肝癌(H22)。常规方法将瘤体从荷瘤小鼠体内取出,制成瘤细胞悬液,按细胞数1×10^6接种于小鼠右腿外侧皮下,每鼠0.2毫升,待肿瘤生长至250±50mm3时开始分组试验,一般移植后7—10天即可。药物:9401号(N-烟酰基-亚氨基二乙酸),为白色粉状晶体,含量大于99%,熔点182-191℃。由中国医学科学院放射医学研究所药物室合成。动物给药剂量为1000mg/kg体重(半数致死量的四分之一),药物浓度为100mg/ml,于照射前2—3小时-次腹腔给药。照射方法:照射采用。Coγ射线垂直照射,剂量率81.79cGy/min。一个剂量点一次照射4只小鼠,将小鼠放入特制的有机玻璃模型内固定,仅照射荷瘤后腿,其它部位用铅块保护。 相似文献
477.
478.
目的探讨肿瘤细胞经X线照射后线粒体DNA 4 977bp缺失率与存活分数的潜在关系。方法选用人宫颈癌细胞系(Hela细胞)、人肝癌细胞系(HepG2细胞)、人食管癌细胞系(EC-9706细胞)和人前列腺癌细胞系(PC-3细胞)4种肿瘤细胞系,经0Gy到8Gy X线照射后,采用克隆形成法测得存活分数,巢式PCR法检测线粒体DNA 4 977bp缺失率。结果肿瘤细胞放射敏感性由高到低依次是Hela细胞、HepG2细胞、EC-9706细胞和PC-3细胞。Hela细胞经1Gy X线照射后,HepG2细胞、EC-9706细胞和PC-3细胞经2Gy X线照射后均检测到线粒体DNA 4 977bp缺失。1Gy X线照射后,4种细胞线粒体DNA 4977bp缺失率比较,差异无统计学意义(P>0.05);2Gy X线照射后,Hela细胞线粒体DNA 4 977bp缺失率高于其余3种细胞(P<0.01);4Gy和8Gy X线照射后,Hela细胞线粒体DNA 4 977bp缺失率高于其余3种细胞(P<0.05),HepG2细胞和EC-9706细胞线粒体DNA 4 977bp缺失率高于PC-3细胞(P<0.01)。Hela细胞、HepG2细胞和EC-9706细胞的存活分数和缺失率之间呈负相关(r=―0.951,P<0.05;r=―0.976,P<0.01;r=―0.986,P<0.01)。结论线粒体DNA 4 977bp缺失可能是一个反映肿瘤细胞放射敏感性的生物标记。 相似文献
479.
目的:研究职业X射线照射对人类非肿瘤性疾病的影响及其规律。方法:采用队列研究的方法对我国医用诊断X射线工作者(放射组)及非放射科室医务工作者(对照组)的非肿瘤死因进行了随访观察和对比研究。结果:放射组非肿瘤死亡危险明显高于对照组,RR=1.18,P<0.01,危险显著的非肿瘤死因有:冠心病,RR=1.39(<0.01),脑血管病,RR=1.36(P<0.01),再生障碍性贫血,RR=10.35(P<0.01),神经系统疾病,RR=2.06(P<0.01),及皮肤、皮下组织疾病,RR=3.23(P<0.05)。结论:受到长期职业照射的X射线工作者非肿瘤病因死亡危险显著增高,其中冠心病 、脑血管病、再生障碍性贫血等死因危险可能与这种职业照射有关。 相似文献
480.
人造血增效因子在大肠杆菌中的表达及其生物学作用 总被引:2,自引:0,他引:2
目的研究人造血增效因子(hHSF)在大肠杆菌(E.coli)中的表达及其动员恒河猴外周血造血干/祖细胞的作用.方法应用重叠PCR方法合成编码hHSF的DNA片段,克隆测序证实其序列正确后,重组到表达载体pET30a中,转入E coli BL21(DE3),并用IPTG诱导表达,目的蛋白用凝胶过滤和阳离子交换层析法进行分离纯化和复性.用飞行时间质谱仪和氨基酸测序仪分别测定纯化的目的蛋白相对分子质量、N端氨基酸序列以及氨基酸组成.选用恒河猴8只,随机分为两组,每组4只一组为单次皮下注射重组hSCF 500μg/kg,另一组为皮下注射rhG-CSF 10μg·kg-1·d-1 4 d后,单次注射rhHSF 500μg/kg.观察恒河猴外周血CD34+细胞、CFU-GM数目以及血常规.结果测序证实合成的hHSF序列与设计一致,构建的重组表达载体pET30a-hHSF在E.coli中获高效表达,目的蛋白占菌体总蛋白的30%左右,主要以包涵体形式存在.目的蛋白纯度达95%以上,N端前10个氨基酸序列分析结果与预期一致;相对分子质量为7540;氨基酸组成分析结果与理论值基本一致.恒河猴实验结果表明,单次皮下注射重组hHSF后外周血CD34+细胞、CFU-GM和中性粒细胞数分别在用药后3 h,1 h和45 min达高峰,动员幅度分别为用药前检测值的16.3倍、1.9倍和4.4倍.与G-CSF联用,动员外周血干细胞作用更加明显,CD34+细胞、CFU-GM和中性粒细胞数分别为基值的25.8倍、8.7倍和8.3倍.结论合成的hHSF基因在E.coli中获高效表达,重组hHSF具有动员恒河猴外周血干/祖细胞和中性粒细胞的作用,并与G-CSF有明显协同作用. 相似文献