附子不同炮制方法比较分析△

目的:采用高效液相色谱法分析附子不同炮制品中6个生物碱的含量,研究《中国药典》炮制法、蒸制法、炒制法之间的差异。方法:采用《中国药典》2010年版附子含量测定项下方法检测;运用SPSS17.0统计分析软件进行数据处理。结果:各成分分离良好;蒸附片、炒附片、黑顺片、白附片、淡附片、炮附片中双酯型生物碱的量都得到有效降低,但蒸附片和炒附片中单酯型生物碱的含量明显增加。结论:蒸制法、炒制法与《中国药典》炮制法一样,具有相同的炮制减毒能力,但蒸制法和炒制法又能增加毒性小、疗效好的单酯型生物碱类的量,优于《中国药典》炮制法。     

藏药“五味麝香丸”药效学实验研究

目的:观察五味麝香丸对模型动物的抗炎镇痛作用。方法:制造大鼠、小鼠炎症模型和疼痛模型,观察五味麝香丸的抗炎镇痛作用。结果:五味麝香丸0.021 g/kg和0.010 g/kg两个剂量对组织胺所致大鼠足趾肿胀有明显抑制作用,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);五味麝香丸0.030g/kg和0.015g/kg两个剂量组对二甲苯所致小鼠耳壳肿胀和冰醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增加有明显抑制作用,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。五味麝香丸0.030 g/kg和0.015 g/kg两个剂量组对冰醋酸所致小鼠扭体反应有明显抑制作用,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01);五味麝香丸0.030 g/kg剂量组对小鼠热板痛阈值有明显提高作用,其作用在给药后60分钟和90分钟时较明显,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:五味麝香丸具有明显的抗炎和镇痛作用。     

天舒胶囊对利血平致小鼠偏头痛的影响

目的:观察天舒胶囊对利血平致小鼠偏头痛模型的作用,并探讨其作用机制.方法:ICR小鼠背部皮下注射利血平0.1 mg·kg-1造模,共12 d,正常对照组注射0.9％氯化钠注射液,于造模第7天开始ig给予天舒胶囊,剂量分别为生药1.55,4.65 g·kg-1,连续6d,第12天测定小鼠痛阈值,次日摘眼球采血检测凝血时间,取脑部组织分别测定5羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NA)含量,阳性对照为佐米曲普坦片(0.66 mg·kg-1).结果:与模型组相比,天舒胶囊能明显提高小鼠痛阈值(P＜0.01),延长凝血时间(P＜0.01),提高脑部NA和5-HT含量(P ＜0.05,P＜0.01),与阳性药相比,天舒胶囊明显提高脑部5-HT的含量(P＜0.05).结论:天舒胶囊对利血平低化5-HT致小鼠偏头痛有明显的改善作用,其平衡神经递质释放、抑制偏头痛发作期血管过度扩张可能是作用机制之一.     

藏药前列宁胶囊中总黄酮成分提取工艺研究

目的:优选前列宁胶囊总黄酮提取工艺。方法:采用正交设计法,结合直观分析和方差分析综合优选前列宁胶囊的总黄酮提取工艺。结果:最佳提取工艺为8倍量50%的乙醇回流提取2次,每次2小时。结论:该提取工艺稳定、重复性好,可为该制剂的工业生产奠定实验基础。     

自体DC-CIK细胞治疗晚期肾细胞癌的疗效

目的：探讨自体树突状细胞（dendritic cell,DC）激活的细胞因子诱导的杀伤（cytokine-induced killer,CIK）细胞在晚期肾细胞癌（renal cell carcinoma,RCC）治疗中的临床效果与安全性。方法：采集22例2011年7月至2012年6月期间南京医科大学附属苏州医院肿瘤内科收治的22例RCC Ⅳ期患者\[男性12例、女性10例,中位年龄60.8岁（21~79岁）\]外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell,PBMC）,体外制备成DC-CIK细胞。流式细胞术分析DC-CIK细胞中CD3+T、CD8+T、CD4+T、NK（CD3-CD56+）和NKT（CD3+CD56+）细胞的比例,MTT法检测DC-CIK细胞对白血病K562细胞（对NK细胞敏感）和肾癌786-0细胞（对NK细胞不敏感）的杀伤活性。受试患者于常规治疗（手术+化疗+放疗/细胞因子治疗）结束后4周进行DC-CIK细胞治疗,每次静脉回输细胞数约（5.0±0.5）×108个,5次为1疗程,共3个疗程,分别于疗程开始前与结束后1周内监测患者外周免疫学指标（淋巴亚群、细胞因子谱）,严密观察并记录治疗过程中的不良反应。结果：DC-CIK细胞组成为CD3+细胞占（86.92±5.32）%、CD3+CD8+CD56+（NKT细胞）占（52.04±7.33）%、CD8-CD56+（NK细胞）占（785±315）%,DC-CIK细胞对786-0细胞和K562细胞的体外杀伤率相仿（效靶比为3∶1时,杀伤率分别为（16.5±1.7）%和（18.4±1.9）%,P=0.014）。患者接受DC-CIK细胞治疗后,外周血淋巴细胞亚群（CD3+T、CD4+T、CD8+T、CD3-CD56+NK细胞）比例无显著变化（P>0.05）;外周血中IL-2、IL-12和IFN-γ细胞因子水平较治疗前明显提升（均P＜0.05）,而TNF-α 和IL-10变化不明显（均P＞0.05）。2例患者发生一过性发热,持续4~6 h恢复,1例出现短期乏力。结论：DC-CIK细胞体外能有效杀伤786-0细胞和K562细胞。 输注后可提升部分RCC患者免疫水平,安全性良好,可作为晚期RCC患者辅助治疗之一。     

宫颈液基细胞学与巴氏涂片在宫颈病变检查中的应用研究

目的：探讨与分析宫颈液基细胞学（TCT）与巴氏涂片在宫颈病变检查中的应用价值。方法：选择2009年3月～2011年3月来我院妇科予以常规细胞学筛查的255例患者为研究对象,其中130例患者予以宫颈液基细胞学检查作为TCT组,125例患者予以巴氏涂片检查作为对照组,比较两组诊断差异。结果：TCT组的灵敏度、特异度、诊断符合率分别为92．59％、81．63％、88．46％,而对照组则为77．03％、49．02％、65．60％,两组经比较均P〈0．01。TCT组检查CIN的灵敏度、特异度、诊断符合率分别为81．25％、92．68％、88．46％,而对照组则为42．86％、76．32％、63．20％,两组经比较均P〈0．01。TCT组检查SCC的灵敏度、特异度、诊断符合率分别为100％、100％、100％,而对照组则为50％、98．37％、97．60％,两组经比较均P〉0．05。结论：TCT检查宫颈病变优于巴氏涂片检查,是筛查宫颈病变的最有效方法,值得临床推广运用。     

基于FTIR离散平稳小波特征提取的SVM应用于中药材紫花地丁与同属植物的鉴别研究

目的 探索基于FTIR-DSWT结合支持向量机分类法的中药紫花地丁的质量控制新模式。方法 采用衰减全反射傅里叶变换红外光谱法（ATR-FTIR）直接快速地测定了中药紫花地丁与同属植物多花堇菜和戟叶堇菜的FTIR,运用基于离散平稳小波变换进行特征向量的提取,通过分析比较后选取第3、4层分解层的特征向量用于支持向量机的训练与验证。结果 通过对不同产地的90个样本的验证,紫花地丁与同属植物多花堇菜和戟叶堇菜的识别率达100%。结论 表明了基于FTIR-DSWT结合支持向量机分类法的中药紫花地丁与同属植物多花堇菜和戟叶堇菜的分类鉴别方法具有非常好的效果。     

人血清CYFRA21-1化学发光免疫分析方法的初步建立及应用

目的:建立人血清CYFRA21-1化学发光免疫分析方法并在临床检测中的应用。方法:使用CY-FRA21-1定量测定试剂盒（化学发光法）检测308例临床血清标本,并与CYFRA21-1电化学发光全自动免疫分析方法进行对比。结果:灵敏度0.04μg/L,线性范围（1.5～100）μg/L,与NSE及CEA无交叉反应,样本中抗凝剂量的柠檬酸钠、肝素、EDTA-Na₂对测定结果没有影响。添加回收率和稀释回收率为90%～110%,分析内和分析间变异系数均<10.0%。该方法正常参考值为（0～3.4）μg/L（95%可信限）。ECLA测定结果与本法相比,临床总符合率为96.65%。结论:该方法灵敏度高、特异性好、稳定性强,检测范围宽,有良好的准确性和重复性,完全可替代进口化学发光试剂用于临床样本的检测。     

人血清透明质酸夹心化学发光免疫检测方法的建立

目的建立人血清透明质酸夹心化学发光免疫检测方法。方法用透明质酸结合蛋白分别进行固相载体包被和与辣根过氧物酶偶联,建立定量测定人血清透明质酸的夹心化学发光免疫检测法,并对该方法进行方法学和临床应用性评价。结果所建立血清透明质酸化学发光免疫检测法灵敏度为0.66μg/L,线性范围在1.8~1000μg/L,批内变异系数低于7.05%,批间变异系数低于8.0%,平均添加回收率为103.1%,稀释回收率为106.8%,与肝纤维化其他血清标志物IV型胶原、III型前胶原和层黏连蛋白的交叉反应率分别只有0.19%、0.16%和0.17%,样本中添加的抗凝剂及胆红素、胆固醇、甘油三酯等物质对检测结果没有影响。辽宁抚顺市传染病医院用该方法检测737份样本的临床总符合率为98.64%;检测197份样本透明质酸含量的结果与美国Corgenix试剂盒检测结果的相关性为y=0.855x+26.874(r=0.9877)。结论该方法灵敏度高、特性好、线性范围宽,有良好的准确性和重复性,完全可用于临床样本的肝纤维化检测。     

体内移植羊膜对家兔肌腱损伤模型肌腱愈合的影响

研究的目的在于观察羊膜体内移植对肌腱损伤修复的影响。60 只跟腱损伤家兔动物模型采用同体对照动物实验方法,大体观察伤口愈合、肌腱粘连及肌腱肥大情况,并分别于术后第 2、4、6 周等3个时间点取跟腱,HE染色观察损伤区域炎细胞浸润和成纤维细胞数量,免疫组化染色观察胶原纤维排列塑形状况,拉伸试验测定肌腱弹性模量。另取 4 只家兔不做肌腱切断术作为正常对照,在第 0周 测定肌腱弹性模量。全部实验动物皮肤切口在术后 1 周 内基本愈合,未发生伤口感染情况。羊膜实验组跟腱粘连动物数量和肌腱断裂区域肥大程度低于阴性对照组(P<0.05)。术后第 2 周,两组动物炎症反应均达到最高值,但羊膜实验组炎细胞（包括中性粒细胞和单核细胞）浸润数量低于阴性对照组(P<0.05)。两组实验动物样本中成纤维细胞数量和胶原纤维积累数量无明显差异（P >0.05）,但羊膜实验组成纤维细胞和胶原纤维排列更具有序性,尤其是在术后第 6 周,明显好于阴性对照组。术后第 2 周和第4 周,羊膜实验组肌腱弹性模量均优于阴性对照组(P <0.05)。羊膜具有促进肌腱早期愈合和抗炎、抗粘连作用。