成年大鼠骨骼肌干细胞的纯化与培养

目的:建立一种骨骼肌干细胞的纯化及培养方法。方法:取成年雌性SD大鼠前肢肱三头肌,用胶原酶和dispase进行消化,200目的筛网滤过。采用差速贴壁法纯化骨骼肌干细胞,用含20%胎牛血清的HamsF10培养基进行培养。以α-骨骼肌肌动蛋白免疫细胞化学染色进行细胞鉴定。结果:成功地分离培养了成年大白鼠的骨骼肌干细胞。结论:采用差速贴壁的方法可以成功分离、纯化骨骼肌干细胞,为未来以自体骨骼肌干细胞注射治疗压力性尿失禁打下了基础。     

原发性肝细胞癌根治术后肿瘤复发的影响因素及预后

目的 探讨原发性肝细胞癌(HCC)根治术后患者肿瘤早、晚期复发的影响因素及预后.方法 回顾性分析2003年1月至2006年12月华中科技大学附属同济医院收治的117例行HCC根治术患者的临床资料,以术后2年为界,≤2年肿瘤复发为早期复发,＞2年为晚期复发.分析AFP、AFP/肿瘤单位体积(AFP/V)、肿瘤直径、肿瘤数目、血管侵犯、肿瘤分化程度、肝硬化程度、肝功能分级、HBsAg、肝切除方式、术中输血等因素与术后肿瘤复发的关系,采用Kaplan-Meier生存分析法计算患者术后总体生存率和无瘤生存率,Log-rank法对生存率进行检验.结果 117例患者中有85例(72.6%)出现肿瘤复发,其中早期复发59例(50.4%)、晚期复发26例(22.2%).AFP、AFP/V、肿瘤直径、肿瘤数目、血管侵犯、肿瘤分化程度、术中输血是术后肿瘤早期复发的影响因素(x2=12.78,13.40,5.79,9.98,10.26,9.48,8.32,P＜0.05);AFP、肝硬化程度是术后肿瘤晚期复发的影响因素(x2=4.46,7.75,P＜0.05).AFP/V、肿瘤数目、血管侵犯是术后肿瘤早期复发的独立危险因素(RR=0.170,0.172,0.064,P＜0.05);肝硬化程度是术后肿瘤晚期复发的独立危险因素(RR=2.809,P＜0.05).本组患者术后1、3、5年总体生存率和无瘤生存率分别为82.6%、60.8%、54.9%和65.0%、38.5%、23.1%.AFP＜20μg/L、AFP/V＜14 μg/(L·cm3)、AFP/V14μg/(L·cm3)的患者总体生存率和无瘤生存率比较,差异有统计学意义(P＜0.05).肿瘤早期复发患者1、3、5年总体生存率分别为64.9%、23.0%、20.5%;肿瘤晚期复发患者1、3、5年总体生存率分别为100.0%、88.5%、72.5%,两者比较,差异有统计学意义(x2=26.918,P＜0.05).结论 AFP/V、肿瘤数目、血管侵犯是肿瘤早期复发的独立危险因素,肝硬化程度是肿瘤晚期复发的独立危险因素.HCC根治术后肿瘤早、晚期复发患者生存率存在差异.     

嗅鞘细胞移植在中枢神经损伤修复中的研究

成年哺乳动物的中枢神经系统（CNS）损伤后不能有效再生，CNS再生受阻并不是由于CNS轴突本身的缺陷引起的，主要是由于周围胶质细胞的抑制作用，而存在于嗅觉系统内的一种特殊类型的胶质细胞一嗅鞘细胞（olfactory ensheathing cells，OECs）是决定嗅神经元轴突再生的关键因素。OECs可分泌促进神经元损伤后存活和轴突再生的多种营养因子，并能形成穿越胶质瘢痕、利于再生轴突依附、延伸的支架桥梁，这是其它胶质细胞所无法比拟的。     

肾透明细胞癌中VHL基因改变和趋化因子受体CXCR4的表达及相关性

目的研究肾透明细胞癌（CCRCC）组织中VonHippel-Lindau（VHL）基因改变和趋化因子受体CXCR4的表达及其相关性，探讨VHL基因在CCRCC中的作用。方法分别采用聚合酶链反应-单链构象多态性分析、微卫星法、DNA甲基化特异性PCR和半定量逆转录PCR检测35例CCRCC和20例正常肾组织中VHL基因突变、杂合性缺失（LOH）、异常甲基化及CXCR4mRNA的表达。站杲VHL基因在CCRCC和正常肾组织中的改变率分别为74．29％、5．0％，二者的差异有统计学意义（x^2=24．45，P〈0．01）；VHL基因改变与CCRCC的临床分期、淋巴转移等密切相关（x^2-4．05、5．18，P均〈0．05），而与患者性别、年龄、病理分级、肿瘤大小等均无相关性（P〉0．05）。CXCR4 mRNA在CCRCC中的表达率为77．14％，显著高于正常肾组织的5．0％；CXCR4的表达与CCRCC的病理分级、淋巴转移密切相关（x^2-7．35、4．24，P均〈0．05），而与其他临床病理特征等均无相关性。相关性检验表明CCRCC中VHL基因改变与CXCR4的表达密切相关（x^2-3．89，P〈0．05）。站论VHL基因突变和LOH导致其失活是CCRCC发生的重要分子机制，VHL基因和CXCR4可作为判断CCRCC预后的重要参考指标，并可负向调节CXCR4的表达。     

他克莫司对周围神经损伤后脊髓组织中肝细胞生长因子表达的影响

[目的]探讨他克莫司对大鼠周围神经损伤后脊髓组织中肝细胞生长因子 (HGF) 表达的影响.[方法]成年雄性大鼠 50 只,随机分为正常组、损伤组和治疗组,后两组行双侧坐骨神经切断.术后治疗组颈后皮下注射他克莫司 (1 mg/kg),损伤组注射生理盐水.术后不同时间点取 L4～6脊髓,应用 Western blotting 技术及免疫荧光标记对脊髓组织中HGF 的表达变化进行定量和定位检测.[结果]HGF 在脊髓灰质前角、中间带和后角的各类神经元中均有表达;损伤组与正常组大鼠脊髓组织中 HGF 的表达之间无显著性差异 (P>0.05),治疗组大鼠脊髓组织中 HGF 的表达在术后 7、14 d 时明显高于损伤组 (P< 0.05).[结论] (1) 周围神经损伤本身并不能使脊髓组织中 HGF 的表达上调;(2) 他克莫司能诱导周围神经损伤后内源性 HGF 的高表达,从而保护相应神经元,促进轴突生长.     

Aurora-A激酶在肾癌组织中的表达及其意义

Aurora-A激酶是丝/苏氨酸激酶蛋白激酶,被认为是一个新的致癌因子,参与调控细胞有丝分裂中中心体的成熟与分离,纺锤体的组装、稳定,染色体的浓集、中板聚合和稳定等多种事件[1].阐明Aurora-A激酶表达在肾癌组织中的意义,可能有助于寻找治疗肾肿瘤的新方法.现就近年来研究Aurora-A激酶与肾癌的关系作一综述.     

血红素加氧酶-1在心脏移植急性排斥反应中的表达及意义

目的 探讨血红素加氧酶-1(HO-1)在心脏移植急性排斥反应中的表达及意义。方法建立小鼠颈部异位心脏移植模型。实验分为同系移植组(C57BL／6小鼠→C57BL／6小鼠)和同种移植组(BAILB／c小鼠→C57BL／6小鼠)。免疫组织化学和RT-PCR方法观察HO-1在心肌组织的表达；普鲁士兰染色法观察铁在心肌组织的沉积情况。结果 HO1主要在浸润的炎性细胞中表达，铁在浸润的巨噬细胞中表达，二者随急性排斥反应的加重表达上调。结论 HO-1参与了心脏移植急性排斥反应的病理过程；HO-1在炎性细胞的过表达，可作为心脏移植急性排斥反应的监测指标。     

Aurora-A激酶在肾癌组织中的表达及其意义

Aurora-A激酶是丝/苏氨酸激酶蛋白激酶,被认为是一个新的致癌因子,参与调控细胞有丝分裂中中心体的成熟与分离,纺锤体的组装、稳定,染色体的浓集、中板聚合和稳定等多种事件[1].阐明Aurora-A激酶表达在肾癌组织中的意义,可能有助于寻找治疗肾肿瘤的新方法.现就近年来研究Aurora-A激酶与肾癌的关系作一综述.     

肝细胞癌VEGF、uPA和ICAM-1蛋白的表达及意义

转移和复发是肝癌患者术后主要的死亡原因 ,也是影响患者长期存活和治疗效果的主要障碍。我们通过检测血管内皮生长因子 (VEGF)、尿激酶型纤溶酶原激活物 (uPA)、细胞间黏附分子 1(ICAM 1)蛋白及增殖细胞核抗原 (PCNA)在肝癌中的表达 ,探讨与肝癌转移、复发有关的分子生物学机制。一、材料与方法1.组织标本 :12 3例选自同济医院病理科保存的肝外科中心 1998年 1月～ 1999年 12月肝癌患者手术标本。其中 ,临床无转移肝癌 (A组 ) 4 2例 ,肝内转移肝癌 (B组 ) 5 0例 ,伴门静脉主干癌栓肝癌 31例 (门静脉癌栓原发灶标本为C组 ,癌栓标本…     

恶性胶质瘤组织中Bcl-xL mRNA和蛋白的表达及其与临床病理的关系

目的探讨恶性胶质瘤组织中bcl-xLmRNA和蛋白的表达及其与临床组织病理的关系。方法用免疫组化染色SP法和RT-PCR分别检测44例间变星形细胞瘤、45例胶质母细胞瘤和26例Ⅰ级星形细胞瘤组织中bcl-xLmRNA和蛋白的表达。结果bcl-xL蛋白表达的阳性率在间变星形细胞瘤中为86.40%,胶质母细胞瘤中为91.1%,与Ⅰ级星形细胞瘤的38.5%相比,差异显著(P<0.01)。bcl-xLmRNA相对含量在间变星形细胞瘤和胶质母细胞瘤中分别为0.89±0.26和0.93±0.21,与Ⅰ级星形细胞瘤的0.63±0.23相比,差异显著(P<0.01)。结论bcl-xLmRNA和蛋白表达与胶质瘤临床病理分级呈显著正相关,其高表达可能与胶质瘤的恶性进展密切相关。