冈田酸促进ATRA诱导NB4细胞的分化及增殖抑制

目的：研究蛋白磷酸酶抑制剂冈田酸（Okadaic acid，OKA）对全反式维甲酸（ATRA）诱导NB4细胞分化及增殖抑制作用的影响。方法：选用ATRA、OKA、ATRA＋OKA分别作用于NB4细胞，采用MTT法测定细胞增殖率，瑞氏染色法和NBT还原实验观察细胞形态的变化，流式细胞仪分析细胞表面CD11b的表达，丝／苏氨酸磷酸化酶试剂盒检测细胞内PP2A活性。结果：（1）MTT结果显示，OKA对NB4细胞增殖的抑制作用不明显；ATRA、ATRA＋OKA作用7天，对NB4细胞的增殖抑制率分别为25．1％、38．4％，ATRA＋OKA组与其他两组相比差异具有统计学意义（P〈0．05）。（2）细胞形态学、NBT及流式细胞仪结果显示，加入OKA能促进ATRA诱导的NB4细胞分化。（3）酶活性分析显示，ATRA诱导的NB4细胞分化过程中，PP2A活性较对照组明显下降，ATRA＋OKA作用后PP2A活性下降更加明显。结论：OKA促进ATRA诱导的NB4细胞增殖抑制作用，可能通过抑制PP2A活性参与细胞分化过程。     

控制性低中心静脉压在肝脏切除术中的应用

肝脏切除术中出血往往会增加患者围术期的输血需求、并发症发生率和死亡率。控制性低中心静脉压(CLCVP)可显著减少肝脏切除术的出血量,不影响患者术后重要脏器的功能,被广泛应用于临床。然而,有研究表明,CLCVP用于肝脏切除术尚存在不足,未能有效地降低术中出血量、减少术后并发症、改善患者远期生存率,且其控制程度无统一标准。本文旨在客观评估CLCVP在肝脏切除术中的优势和不足,以便临床医师更为合理地应用该项技术。     

腰椎关节突关节炎的研究进展

腰椎关节突关节炎（lumbar facet arthritis,LFA）是一种腰椎常见的退行性疾病,近年发病率呈上升趋势,症状严重时影响着患者的工作与生活质量。据最新报道,大约有15%~45%腰痛是属于关节突关节源性的[1]。1911年,Goldthwait最先认为部分腰痛可能由关节突关节病变引起。Ghormley则将源于关节突关节的腰腿痛命名为“小关节综合征”[2]。Badglay从病理方面证实关节突关节存在骨性关节炎,其病理特征是软骨下骨和关节边缘反应性增生,关节突关节软骨退变[3]。此后,大量学者从流行病学、解剖学和生物力学等方面,对腰椎关节突关节（lumbar facet joint,LFJ）骨性关节炎进行了深入研究[4~6]。现对LFA的研究进展综述如下。     

杂交手术治疗TASC D型下肢动脉硬化闭塞症的临床分析

目的 评价杂交手术治疗TASC D型下肢动脉硬化闭塞症的临床疗效.方法 回顾性分析2006年1月至2009年12月间采用杂交手术治疗的46例TASC D型下肢动脉硬化闭塞症患者(共48条患肢)的临床资料.其中男性32条患肢,女性16条患肢;年龄54～85岁,平均67岁.根据临床症状进行Fontaine分级,根据开放手术与腔内治疗部位的相对关系进行分组,采用Kaplan-Meier生存曲线比较不同分级、分组患者间一期通畅率的差异,分析影响一期通畅率的危险因素.结果 所有患者手术均获成功.术后41条患肢(85.4%)临床症状明显改善,平均踝肱指数0.63±0.18,高于术前的0.24±0.13(P＜0.05);平均间歇性跛行距离从术前(87±48)m提高至(247±62)m(P＜0.05).平均随访27.1个月,一期通畅率为79.2%,辅助一期通畅率为83.3%,二期通畅率为95.8%.生存分析显示FontaineⅡ级患者一期通畅率明显高于Ⅲ、Ⅳ级(P均＜0.05);当对开放手术治疗动脉段的远近端都进行腔内干预时,其一期通畅率要低于仅在其近端或远端一侧干预者(P值均＜0.05).Cox回归分析发现糖尿病和高血脂是影响术后一期通畅率的独立因素(P=0.013、0.008).结论 杂交手术是治疗TASC D型下肢动脉硬化闭塞症的有效方法,适用于高危重症患者.     

不同培养方法对体外诱导分化Th17细胞的影响

目的:Th17细胞缺乏特异性表面标记,难以分离纯化活细胞,通过调整细胞因子浓度和不同培养方法,以获得高纯度Th17细胞亚群?方法:选用C57BL/6J 小鼠脾脏获得单个核细胞,磁珠分选获得CD4+?CD44-Naive T细胞?建立不同Th17诱导培养体系,通过流式细胞术检测获得Th17细胞的比例,荧光定量PCR方法检测ROR-γt?IL-17 mRNA表达水平,ELISA方法检测细胞培养上清中IL-17浓度,以寻找最佳培养条件?结果:TGF-β+IL-6+IL-23可诱导Th17细胞,但比例较低;加入TNF-α?IL-1β?anti-IFN-γ?anti-IL-2可进一步提高Th17比例,但后期培养呈衰减趋势;使用U型96孔板培养Th17细胞明显优于24孔板培养,细胞分化呈稳定上升趋势,培养第9天Th17细胞可达(91.85 ± 1.05)%?IL-17?ROR-γt mRNA与Naive T细胞相比明显上调(P < 0.001),IFN-γ?IL-4?Foxp3 mRNA表达量低(P < 0.001),细胞培养上清液中IL-17浓度明显升高(P < 0.001)?结论:调整细胞因子诱导方案?缩小培养面积可不同程度提高Th17细胞诱导比率,且培养面积的影响作用更为显著?     

甲状腺乳头状癌中央区淋巴结清扫的临床意义

[目的]探讨甲状腺乳头状癌行中央区淋巴结清扫的临床意义.[方法]2007年3月-2010年2月间行手术治疗的61例甲状腺乳头状癌患者中,因颈前区无痛性包块入院36例,颈淋巴结肿大入院5例,声音嘶哑就诊2例,体检发现甲状腺结节18例.行患侧叶、峡部全切、对侧叶大部切除术46例,甲状腺全切除术15例.传统根治性颈淋巴结清扫...     

术前精确定位指导肝内胆管囊腺瘤的治疗3例

目的 观察肝内胆管囊腺瘤的临床、影像、病理及外科治疗特点,探讨该病的临床诊疗方法.方法 对2005年1月～2009年1月收治的3例肝内胆管囊腺瘤病例的临床表现、影像特点、诊疗策略及效果进行回顾性分析.结果 3例患者中2例男性、1例女性,临床上均表现为上腹痛,黄疸等症状;通过B超、MRCP及ERCP等手段予以肿瘤的精确定...     

Antioxidant Vitamin C attenuates experimental abdominal aortic aneurysm development in an elastase-induced rat model

Background

We investigated the hypothesis that an antioxidant, Vitamin C, could attenuate abdominal aortic aneurysm (AAA) development in a rat model.

Methods

An AAA model induced by intraluminal infusion was created in 36 male Sprague Dawley rats, which were randomly distributed into three groups: Sham (saline infused, placebo treated), Control (elastase infused, placebo treated), and Vitamin C (elastase infused, vitamin C treated). Vitamin C and placebo were intraperitoneally injected, initiating 1 wk before the infusion and continuing throughout the study. The aortic dilatation ratio was measured, and aortic tissues were further examined using biochemical and histologic techniques.

Results

Vitamin C attenuated the development of AAA, decreasing maximal aortic diameter by 25.8% (P < 0.05) and preserving elastin lamellae (P < 0.05). Vitamin C also decreased 8-hydroxyguanine (a marker of oxidative damage to DNA) and 8-isoprostane content (a marker of oxidative stress) in aortic tissues (P < 0.05, respectively). The proteins of matrix metalloproteinase (MMP)-2, MMP-9, and interleukin 6 were markedly downregulated (P < 0.05, respectively), accompanied with notably reduced messenger RNA expression of tumor necrosis factor-α, MMP-2/9, and interleukin 1β (P < 0.05, respectively). However, messenger RNA of tissue inhibitors of metalloproteinase-1 and tissue inhibitors of metalloproteinase-2 were both significantly upregulated in Vitamin C group. Vitamin C treatment had no significant effect on systolic blood pressure (P > 0.05).

Conclusions

Vitamin C attenuated AAA development in an elastase-induced rat model via crucial protective effect, which was mediated by an increased level of antioxidant in cooperation with preserving elastin lamellae, inhibiting matrix-degrading proteinases and suppressing inflammatory responses.     

重组人生长激素对裸鼠胃癌移植瘤生长及血清VEGF浓度的影响

目的:研究重组人生长激素(rhGH)对裸鼠人胃癌移植瘤生长及血清VEGF水平的影响。方法:取60只雄性裸鼠进行实验,通过免疫细胞化学染色法检测胃癌细胞株SGC-7901及MKN-45生长激素受体(GHR)的表达状况,将GHR阳性表达的胃癌细胞株SGC-7901及GHR阴性表达的胃癌细胞株MKN-45分别接种于4只裸鼠皮下,制作裸鼠胃癌皮下移植瘤模型,3周后取出移植瘤制成组织匀浆,接种于剩余52只裸鼠。依据接种细胞种类不同分为移植瘤GHR阳性表达和GHR阴性表达裸鼠,不同GHR表达的裸鼠进一步分为对照组(C组:予0.9%NaCl,0.2 ml.d-1)、rhGH低剂量组(L组:予rhGH0.5 U.kg-1.d-1)、rhGH高剂量组(H组:予rhGH2.5 U.kg-1.d-1),连续给药14 d,观察并记录各组裸鼠体重和肿瘤体积变化,酶联免疫吸附法测定血清VEGF含量。结果:SGC-7901为GHR阳性表达的人胃癌细胞株,MKN-45为GHR阴性表达的人胃癌细胞株。对于接种GHR阳性表达的人胃癌细胞株的裸鼠,rhGH给药组皮下移植瘤体积较对照组增大(P<0.05),且H组促增长效应显著(P<0.05),3组...     

TIM2基因修饰的H22细胞体内成瘤作用的研究

目的观察小鼠TIM2基因修饰的H22肝癌细胞在小鼠体内的成瘤作用，初步研究TIM2基因在肿瘤生物治疗中的作用。方法构建TIM2基因的真核表达载体pIRES2-EGFP—TIM2，脂质体法转染H22细胞，体外筛选得到稳定表达TIM2基因的阳性单克隆H22细胞株，用以建立小鼠肝癌移植瘤模型，同时以转染了pIRES2-EGFP空载体的H22-EGFP细胞和H22细胞做为对照，观察不同处理的H22细胞对小鼠的成瘤情况。结果重组真核表达载体pIR3ES2-EGFP—TIM2转染H22细胞后，经体外筛选和鉴定，得到稳定表达EGFP和TIM2基因的阳性单克隆细胞株H22-TIM2，免疫接种小鼠后可明显抑制小鼠肿瘤的发生和发展，小鼠肿瘤组织块的体积明显小于接种H22-EGFP细胞和H22细胞组。此外。接种H22-TIM2细胞组小鼠的生长情况也明显好于其他各组。结论TIM2基因转染H22细胞后可显著降低小鼠H22肝癌细胞的成瘤性，抑制小鼠体内肿瘤的生长。本研究为进一步探讨TIM2在肿瘤生物治疗中的作用提供了初步的实验依据。