肝癌发生过程中泛素-蛋白酶体途径介导P27蛋白的低表达机制初探

目的探讨HCC发生过程中P27蛋白低表达的调节机制．方法应用免疫组织化学方法检测正常肝组织、非癌周肝硬化、癌周肝硬化和肝癌各20例标本中P27、Cyclin E、Skp2和泛素的表达及定位,并用图像分析系统进行定量分析．结果P27、Skp2定位于胞核和／或胞浆,Cyclin E和泛素主要定位于胞核．P27蛋白胞核表达（从正常肝组织、肝硬化、癌周肝硬化到肝癌组阳性单位PU均值分别为30．1、30．5、27．3、21．6）在肝癌组中最弱,明显低于除癌周肝硬化外的其它各组（P〈0．05）．胞核中Cyclin E（PU：20．8、22．8、27．5、48．6）、Skp2（PU：15．8、23．7、29．5、48．2）和泛素（PU：33．1、38．1、37．5、51．7）三种蛋白的表达均以肝癌组最强,明显高于其它各组（P〈0．05）．Cyclin E、Skp2、泛素三种蛋白核表达之间互成正相关关系,P27蛋白与Cyclin E（r=-0．2718,P〈0．01）、P27蛋白与Skp2（r=-0．2739,P〈0．01）成负相关关系．Skp2胞浆表达、肝癌组与癌周肝硬化组及非癌周肝硬化组之间的差异有统计学意义（P〈0．05）．结论肝癌发生过程中泛素-蛋白酶体途径降解增强可能导致P27蛋白低表达,而其降解可能需要以Skp2蛋白核输入相关因子的作用发挥为前提,Skp2蛋白高表达可能是先于P27低表达发生的事件。     

膀胱癌细胞在尿液中适应性生存的研究

目的观察膀胱癌细胞是否能在尿液中存活及其存活时间．方法过滤除菌正常人中段晨尿,并行尿RT及生化检测．倒置显微镜观察在除菌尿液中培养的膀胱癌细胞．MTT法对比人膀胱癌细胞EJ、人肝癌细胞HepG2和人血管内皮细胞Ecv304分别在尿液、生理盐水和无血清1640中的存活情况．通过逐渐递加培养基中除菌晨尿,筛选高尿液适应性的膀胱癌细胞．结果除菌前后尿RT及生化无改变．EJ细胞在尿中12h贴壁,24h仍可见到存活细胞．经多元方差分析,在尿液中培养相同时间时,EJ较HepG2（P〈0．001）和Ecv304（P=0．014）的存活数日多;HepG2与Ecv304的差异无统计学意义（P=0．062）．高尿液适应性的膀胱癌细胞在尿液中,24h时有大量细胞存活,48h仍有细胞存活．结论膀胱癌细胞可以在尿液中存活,并且在尿液培养相同时间时较HepG2和Ecv304存活数目多．经尿液诱导后筛选出的膀胱癌细胞能在尿液中存活更长时间．     

胰岛素对ICR小鼠胚胎体外发育的影响

目的研究ICR小鼠胚胎体外培养时,添加胰岛素的作用、浓度及所需阶段．方法用添加不同浓度胰岛素的mKSOM培养基对小鼠胚胎进行体外培养及选择最适浓度对不同阶段鼠胚进行体外培养,观察囊胚发育率和囊胚细胞数的变化．结果所有添加胰岛素的浓度组,囊胚发育率均高于对照组,其中0．005μg／mL和0．05μg／mL浓度组囊胚细胞数显著高于对照组和其他各浓度组．2-细胞至4-细胞、4-细胞至桑椹胚前添加胰岛素囊胚率显著高于对照组和其他实验组．结论在ICR小鼠胚胎体外培养时添加胰岛素能够促进胚胎发育;胰岛素浓度增至μg／mL对在ICR小鼠胚胎无毒性作用;在ICR小鼠胚胎体外培养的适宜胰岛素浓度为0．005μG／mL和0．05μG／mL;2-细胞至4-细胞、4-细胞至桑椹胚前添加胰岛素更加重要．     

膀胱肿瘤BIU-87细胞耐药诱导及逆转的实验研究

目的诱导BIU-87细胞对羟基喜树碱（HCPT）产生耐药,检测多药耐药相关蛋白和交叉耐药,观察维拉帕米（VPM）逆转耐药性的效果.方法用间隙给药法诱导BIU-87细胞对HCPT产生耐药,MTT法测定交叉耐药性,细胞免疫组化染色检测P-糖蛋白（P-gp）、多药耐药相关蛋白（MRP1）、Bcl-2和生存素Survivin,MTT法和流式细胞仪测定VPM逆转耐药性的效果.结果耐药诱导5个月,BIU-87/HCPT细胞对HCPT、长春新碱（VCR）、丝列霉素（MMC）和顺铂（CDDP）的耐药性均有提高,其中HCPT为55倍,VCR为26.88倍,而对阿霉素（ADM）耐药性提高不明显.经检测P-gp和MRP1均为＋＋,Bcl-2和Survivin均为＋＋＋.VPM逆转耐药性有一定效果.结论BIU-87/HCPT细胞具有多药耐药性,对VCR的耐药指数最大,VPM能逆转其耐药性,但逆转效率低于文献报道,这些结果都可能与肿瘤细胞产生多药耐药的机制复杂和BIU-87/HCPT细胞的Bcl-2与Survivin的表达量比P-gp与MRP1高有关.     

输尿管子宫内膜异位症诊治8例报告

目的探讨输尿管子宫内膜异位症的诊断、治疗方法,提高输尿管子宫内膜异位症的诊治水平．方法回顾性分析8例输尿管子宫内膜异位症的临床特征、诊断、治疗方法．其中左侧3例,右侧5例．B超检查均发现输尿管中上段扩张、肾积水．IVU检查,8例均提示输尿管下段狭窄、输尿管上段扩张、肾积水．结果8例均行手术治疗,1例切除盆腔包块、松解输尿管并内置双J管;5例行输尿管狭窄段切除及输尿管膀胱再吻合;1例行输尿管狭窄段切除及输尿管端端吻合;1例行输尿管境检、置双J管术．术后病理检查均证实为输尿管子宫内膜异位症．随访8例,随访时间12月～7a,症状均消失,定期复查B超及IVU,肾积水均缓解．结论输尿管子宫内膜异位症缺乏典型临床表现,一旦发现,应尽早解除梗阻,保护肾功能．     

输尿管支架被动扩张在输尿管镜手术中的应用

目的总结输尿管支架被动扩张在输尿管镜手术中的应用经验．方法我科2002年3月至2009年3月共收治12例输尿管结石患者,中下段结石9例,上段结石3例．1～3岁3例,4～12岁5例,21～45岁4例,男8例,女4例．因结石下方输尿管粘膜水肿狭窄或管腔相对细小,输尿管镜手术困难,留置双J管1～4周后再次输尿管镜手术．结果1～4周后输尿管明显扩张、松弛,所有患者均成功行输尿管镜碎石取石,结石取尽或排尽,九并发症发生,手术成功率100％．结论输尿管支架对输尿管的被动扩张作用可增加输尿管镜手术成功率,降低输尿管损伤的风险,特别适用于小儿输尿管结石的治疗．     

胰岛素对不同时期ICR小鼠胚胎体外发育的影响

目的研究胰岛素对不同时期小鼠胚胎体外发育的影响.方法收集1-细胞、2-细胞、4-细胞及桑椹胚期鼠胚,分别在含0（对照组）、0.005、0.05、0.5、5、10μg/mL胰岛素的KSOM中培养.结果在1-细胞及2-细胞阶段添加系列浓度时,0.005μg/mL及0.05μg/mL胰岛素组不仅提高囊胚率、孵化率,而且提高囊胚细胞数.4-细胞阶段添加系列浓度时0.05μg/ml胰岛素组能够提高囊胚率、孵化率以及囊胚细胞数;而至桑椹胚阶段再添加系列浓度胰岛素时,囊胚率、孵化率以及囊胚细胞数均无统计学意义（P〉0.05）.结论在ICR小鼠胚胎体外培养时适宜的胰岛素浓度为0.05μg/mL;桑椹胚之前添加胰岛素对小鼠胚胎发育是必要的.在一定发育阶段内,随着胚胎的生长对胰岛素的需求也相应增加.     

女性原位尿流改道控尿机制的基础研究及临床应用

目的探讨女性控尿解剖形态机制,并与女性原位尿流改道临床应用相结合,以进一步指导女性原位尿流改道的研究和临床推广工作。方法（1）对20具成人女性尸体进行盆丛及其分支,主要是尿道支、阴部神经及其尿道支的解剖。（2）解剖出完整的尿道及周围的肌肉等进行病理学HE染色、肌肉染色、结缔组织染色、银染等。（3）对20例正常控尿女性的下尿路、盆底的MRI矢状位、冠状位及横截位扫描,观察控尿有关的组织形态及其变化。（4）结合上述基础研究的结果,总结、分析40例女性原位尿流改道患者的控尿情况、并发症等临床问题。结果（1）盆丛分支有直肠丛、阴道丛、膀胱尿道丛,阴道丛分支到膀胱颈、尿道,在阴道、膀胱颈两侧走行,约在尿道的5、7点进入尿道;膀胱尿道丛量较少,紧帖盆侧壁几乎与尿道上缘平行走向尿道,距膀胱尿道连接部外约0．5—0．7cm,约在10～11、1～2点处进入尿道。阴部神经尿道支主要由其终末支发出,在耻骨联合下缘正对处的11、2点位置进入尿道。（2）病理结果表明,横纹肌主要位于尿道远端2／3,与盆底肌肉并不相连,主要包饶尿道,部分肌肉在远端还同时包饶阴道。对完整下尿路的大块组织切片HE染色、肌肉染色、结缔组织染色、银染等显示：神经分布在尿道的肌肉之间,横纹肌分布于尿道中外2／3的尿道,内中1／3交界处与平滑肌混杂存在,在外1／3有横纹肌包饶阴道。（3）MRI可清楚显示与控尿有关的盆底肌肉;正常控尿女性膀胱颈子宫口位于齿尾线以上。（4）上述基础研究与40例临床应用相结合表明,女性控尿主要由横纹括约肌完成,此肌肉主要由阴部神经支配,术中注意该肌肉的保护,女性同样可以获得理想的控尿效果。结论女性控尿的主要因素是受阴部神经尿道支和盆丛分支?     

32例主动脉夹层MRI诊断

目的探讨不同MRI检查方法对主动脉夹层（AD）诊断的价值。方法收集我院临床诊断为主动脉夹层患者32例。患者行MRI不同方法检查（平扫、增强、电影成像及血管造影）,4名经验丰富的放射学医师分别对所有图像进行分析,并与CT、DSA及手术结果对比研究。结果MRI共显示主动脉夹层32例（Ⅰ型6例,Ⅱ型4例,Ⅲ型22例）。结论MRI扫描较其他检查对AD及其合并症的诊断、分型及临床治疗具有重要价值。     

手术后经空肠造口管早期肠内营养病人的耐受性分析

目的:分析影响腹部手术后病人经空肠造口管EEN耐受性的相关因素.方法:对63例腹部术后病人经空肠造口管行EEN支持,观察其耐受性,并用Logistic多因素回归分析,探讨影响病人对EEN耐受性的相关因素.结果:63例病人中有45例(71.4%)能耐受EEN支持,18例(28.6%)不能耐受EEN支持.Logistic多因素回归分析显示:APACHE-Ⅱ评分、术后血清ALB、术中失血量和输血量,是影响病人术后EEN耐受性的因素(P<0.05).结论:腹部手术后病人经空肠造口管EEN耐受性良好.EEN支持的耐受性除与喂养方式有关外,还与疾病状态及其严重程度、血清ALB水平、术中失血量和输血量等因素相关.