化浊解毒方含药血清对H2O2诱导的大鼠肝星状细胞氧化应激的影响

目的:研究化浊解毒方含药血清对H2O2诱导的大鼠肝星状细胞(HSC-T6)氧化应激的影响,以探讨化浊解毒方治疗肝纤维化的可能作用机制.方法:SD大鼠ig化浊解毒方不同剂量(0.3,0.6,1.2 g·kg-1),连续给药10 d,末次给药2h后取血,制备含药血清;常规培养活化的HSC-T6,采用0.1 mmol·L-1的H2O2制造HSC-T6氧化应激的模型,用不同浓度的含药血清进行干预,分为化浊解毒方组(高、中、低剂量组)、干扰素阳性对照组、模型组及空白对照组(不加任何药物的血清).干预72 h,放射免疫法检测细胞上清液中超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA),还原性谷胱甘肽(GSH),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量,用RT-PCR及Western blot法检测HSC-T6培养上清液中Ⅰ型胶原(COL Ⅰ)及Ⅲ型胶原(COLⅢ)基因及蛋白表达.结果:与空白对照组比较,经过H2O2处理的HSC-T6上清液中SOD和GSH-Px的活性明显减低(P＜0.05),MDA和GSH的含量明显增加(P＜0.05);经化浊解毒方含药血清干预72 h后,其高、中剂量组能够提高SOD和GSH-Px的活性(P＜0.05),并降低细胞上清液中MDA和GSH的含量(P＜0.05),以高剂量组作用明显(P＜0.05);与空白对照组比较,HSC-T6上清液中COL Ⅰ及COLⅢ基因表达及蛋白含量经过H2O2刺激后明显增加(P＜0.05),经过化浊解毒方干预后,其胶原基因表达及蛋白水平明显降低,尤其高剂量组降低明显(P＜0.05).结论:化浊解毒方可以减轻因H2O2刺激造成的HSC-T6氧化应激反应,减少氧化应激产物产生,其效果与剂量呈正相关;从基因水平,化浊解毒方能够降低胶原基因的表达,同时抑制其蛋白转录,从而降低细胞外胶原含量,达到抑制肝纤维化的目的.     

乳腺癌组织中MAGE-A4和P73蛋白的表达及其临床意义

目的：探讨黑素瘤抗原（melanoma-associated antigen,MAGE）-A4及肿瘤抑制基因 P73 在乳腺癌组织和相应癌旁组织中的表达及其临床意义。方法：选取60例河北医科大学第四医院2007年9月至2007年12月乳腺癌住院患者,采用免疫组织化学法检测乳腺癌组织及相应癌旁组织中MAGE-A4和P73蛋白的表达,并分析其与乳腺癌临床病理特征的相关性。结果：乳腺癌组织中MAGE-A4、P73蛋白阳性表达率为63.3%（38/60）、43.3%（26/60）,癌旁组织中MAGE-A4、P73蛋白阳性表达率为0（0/60）、85%（51/60）（均P<0.01）。乳腺癌组织中MAGE-A4蛋白的表达与P73蛋白的表达呈正相关（r=0316,P=0.014）。MAGE-A4蛋白的表达与乳腺癌患者的年龄、病理类型、组织学分级、临床分期、肿瘤大小、淋巴转移、雌激素受体（estrogen receptor,ER）表达、孕激素受体（progestrogen receptor,PR）表达均无相关性,但与C-erbB2蛋白的表达呈负相关（r=-0.259,P=0.046）。P73蛋白表达与乳腺癌患者的年龄、病理类型、组织学分级、临床分期、肿瘤大小、淋巴结转移、C-erbB2表达均无相关性,但与ER（r=0.274, P=0.034）和PR的表达呈正相关（r=0.262,P=0.043）。结论：乳腺癌组织高表达MAGE-A4和P73蛋白,且MAGE-A4与P73蛋白之间可能存在重要的相互调节机制。     

术前尿可溶性Fas表达在预测非肌层浸润性膀胱癌复发中的价值

目的：探讨术前尿可溶性Fas(soluble Fas,sFas)表达在预测非肌层浸润性膀胱癌(non-muscle invasive bladder cancer,NMIBC)复发中的作用。方法：采用前瞻性研究方法,选取2008年1月至2011年4月期间经手术病理确诊的128例NMIBC患者,采用ELISA法测定手术前尿sFas值。结合多项临床病理参数进行非参数统计分析,采用Kaplan-Meier生存曲线分析尿sFas水平与NMIBC患者复发之间的关系,采用Cox比例风险模型进行分析,筛选影响NMIBC预后的独立因素,构建计算预后指数(prognosis index,PI)的公式。结果：NMIBC患者尿sFas值随着病理分期、分级、欧洲癌症研究与治疗组织(EORTC)膀胱癌预后风险评分表评分的增加而增高(P<0.05),与年龄和性别无关(P>0.05)。Kaplan-Meier 生存曲线提示,与低sFas组比较,高sFas组的NMIBC复发率明显增高(P<0.001)。经Cox回归模型分析,尿sFas 值、EORTC评分是影响NMIBC预后的独立因素(P<0.05),计算得到PI公式为0.004×尿sFas值+1.179×EORTC评分。结论：检测尿液sFas表达是预测NMIBC复发的有用指标,值得深入研究。     

CXCL12-CXCR4趋化因子轴与卵巢癌关系研究

目的:探讨CXCL12-CXCR4趋化因子轴与卵巢癌的关系.方法:将转染质粒SKOV3/CXCR4、转染载体SKOV3/neg及未转染的SKOV3 3种卵巢癌细胞进行体外培养;将受试对象根据培养液的不同分为A、B、C、D4组,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法进行增殖实验,判断CXCL12及CXCR4拮抗剂对卵巢癌细胞株的作用;测量不同的卵巢癌细胞株所获得的肿瘤情况.结果:①SKOV3/CXCR4组中A、B组细胞的增殖数高于C、D组及对照组(P＜0.05),且B组高于A组(P＜0.05);SKOV3/neg与SKOV3两组中A、B、C、D各组的细胞的增殖数差异无统计学意义(P＞0.05).②SKOV3/CXCR4处理组的裸鼠体重差值小于对照组,移植瘤的重量小于对照组,生存时间长于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).③SKOV3/neg及SKOV3组的对照组与处理组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论:CXCL12-CXCR4趋化因子轴可促进卵巢癌细胞株的生长,是卵巢癌增值、转移的重要原因之一,而CXCR4拮抗剂可以抑制卵巢癌的生长.     

男性冠心病患者性激素水平与冠状动脉狭窄程度关系的研究

目的 探讨男性性激素水平与冠心病(CHD)患者冠状动脉狭窄程度的关系.方法 根据冠状动脉造影结果将135例男性患者分为CHD组和对照组,CHD组又分为单支病变组、双支病变组和多支病变组,并以病变支数和Gensini总积分表示冠状动脉狭窄程度.采用放射免疫法检测所有患者的静脉血性激素5项,包括雌二醇(E2)、睾酮(T)、孕酮(P)、脱氢表雄酮(DHEA)、硫酸脱氢表雄酮(DHEAS).比较各组间性激素水平并分析性激素水平与冠状动脉狭窄程度之间的关系.结果 CHD组的T、DHEA、DHEAS水平均低于对照组,T(18.6±8.6)nmol/L vs(29.7±11.5)nmol/L、DHEA(22.9±15.3)nmol/L vs(57.9±27.1)nmol/L、DHEAS(5.54±1.3)μmol/L vs(6.4±2.4)μmol/L(P<0.05);E2、P和E2/T在两组及不同支数病变组之间差异无统计学意义.病变支数越多,T及DHEA水平越低(P<0.05或<0.01);DHEA、DHEAS进入以Gensini积分为因变量的多元回归方程,标准回归系数分别为-0.229、-0.230.结论 男性冠心病患者雄激素水平较低;男性雄激素水平可能影响冠状动脉狭窄程度.     

膜型基质金属蛋白酶1在黏着斑激酶相关非激酶诱导肝星状细胞凋亡中的作用

目的应用黏着斑激酶相关非激酶（FRNK）表达质粒瞬时转染纤维连接蛋白（FN）刺激的肝星状细胞（HSC）,探讨膜型基质金属蛋白酶1（MT1-MMP）在FRNK诱导HSC凋亡中的作用。方法在体外,以FN刺激HSC增殖,采用脂质体介导的方法用FRNK表达质粒瞬时转染HSC,应用膜联蛋白／碘化丙啶双标记流式细胞术和透射电镜技术检测细胞的凋亡,蛋白免疫印迹及RT—PCR方法检测FRNK、FAK、p-FAK（Tyr397）、MTI-MMP蛋白及其inRNA表达。结果FRNK表达质粒成功转染HSC,在翻译后水平抑制FAK磷酸化。与空质粒组比较,FRNK表达质粒转染HSC48小时后,HSC凋亡率由（9．28±1．05）％增加至（25．37±1．92）％（P〈0．01）。FRNK抑制FAK磷酸化后在翻译和转录水平上调MT1—MMP表达,2．26±0．14VS1．09±0．15（P〈0．01）;1．58±0．18VS1．00±0．10（P〈0．01）。结论在脂质体介导下瞬时转染FRNK表达质粒可诱导HSC发生凋亡,上调MT1-MMP可能是其机制之一。     

应用血管回声跟踪技术对2型糖尿病患者股动脉血管弹性及血流动力学的研究

目的探讨2型糖尿病患者股动脉血管弹性及下肢血流动力学的变化。方法 应用血管回声跟踪（echo-tracking,ET）技术,采集30例正常人和54例2型糖尿病患者的股动脉的二维超声图像,测量双侧股动脉内中膜厚度（IMT）;应用脉冲多普勒技术（PW）测量股动脉血流阻力指数（RI）、搏动指数（PI）;应用ET技术检测弹性指标β。结果按照IMT是否〈1.0mm分组后显示：糖尿病IMT〈1.0mm组及糖尿病IMT≥1.0mm组的股动脉血流动力学参数RI、PI及弹性指标β均较对照组差异有统计学意义（P〈0.05）;糖尿病IMT≥1.0mm组的股动脉血流动力学参数RI、PI及弹性指标β较糖尿病IMT〈1.0mm组差异有统计学意义（P〈0.05）。结论糖尿病患者下肢动脉在动脉粥样硬化的形态学改变出现之前,血管壁弹性功能已降低,且影响血流动力学,有可能造成外周组织血液供应不良。     

pN0期胸段食管鳞癌患者术后失败模式及其对术后放疗指导作用分析

目的 探讨pN₀期胸段食管鳞癌（TESCC）患者单纯手术治疗后失败模式及失败原因,并据此讨论患者术后放疗的可行性。方法 对2007年1月至2010年12月在本院胸外科接受手术治疗且符合入组条件的473例食管癌患者进行回顾性分析,通过分析患者术后治疗的失败模式及其原因,探讨pN₀期TESCC患者单纯手术治疗后辅助性放疗的可行性及意义。结果 全组患者出现胸腔内-区域性复发57例（12.1%）,其中多数出现在胸腔内（52例）;远处转移42例（8.9%）。复发合并远处转移13例。总失败率为20.9%。胸上段食管癌患者胸腔内-区域性复发率显著高于胸中段和胸下段患者（χ²=7.469,P<0.05）,而远处转移率差异无统计学意义（P>0.05）。T分期越晚的食管癌患者其复发率及远处转移率均显著高于T分期早者（χ²=10.247、7.886,P<0.05）。单因素分析结果显示,不同病变部位、食管瘤床与周边组织器官的黏连程度和术后残端情况为影响胸腔内-区域性复发率的显著性因素（χ²=14.232、9.486、7.546,P<0.05）;患者性别、吸烟史和术前体重减轻≥ 5 kg为影响患者远处转移率的显著性因素（χ²=10.823、10.275、6.065,P<0.05）;而T分期对胸腔内-区域性复发率及远处转移率均有显著性影响（χ²=15.994、12.885,P<0.05）。多因素分析结果显示,T分期和术后残端为影响胸腔内-区域性复发的独立性因素（P<0.05）,既往吸烟史为影响远处转移的独立性因素（P<0.05）。结论 pN₀期TESCC患者单纯术后仍有较高的胸腔内-区域性复发率,对于胸上段食管癌患者、T分期较晚、食管瘤床与周边组织器官的黏连程度较重和术后残端阳性患者建议术后辅助性放疗。男性患者、有吸烟史和术前体重减轻≥ 5 kg者远处转移高。     

浆膜腔积液细胞块免疫化学染色鉴别增生的间皮细胞与腺癌

目的探讨几项细胞块免疫化学染色鉴别浆膜腔积液中增生的间皮细胞和腺癌细胞。方法收集腺癌、间皮增生的浆膜腔积液66例,制成细胞块切片,进行HE及癌胚抗原(CEA)、钙视膜蛋白(Calretinin)、波形蛋白(vimen-tin)免疫化学染色。结果普通涂片发现浆膜腔积液中转移性腺癌46例,间皮细胞增生20例,CEA在46例转移性腺癌中,32例阳性,14例阴性,阳性率69.57%;20例增生的间皮细胞中2例阳性(均为弱阳性),18例阴性,阳性率10.00%。46例转移性腺癌中calretinin 1例阳性,45例阴性,阳性率2.17%;20例增生的间皮细胞17例阳性,3例阴性,阳性率85.00%。46例转移性腺癌中vimentin阳性表达2例,44例阴性,阳性率4.35%;20例增生的间皮细胞中18例阳性,2例阴性,阳性率90.00%,差异有统计学意义(P<0.01)。结论细胞块免疫化学染色对鉴别浆膜腔积液中增生的间皮细胞及腺癌细胞有重要参考价值。     

基于网络药理学联合GEO芯片分析百合乌药汤治疗胃癌的分子靶点及作用机制

目的:基于网络药理学联合GEO芯片差异基因分析的方法,分析百合乌药汤治疗胃癌的分子靶点和作用机制.方法:在TCMSP数据库检索中药药物信息,获得百合乌药汤的活性成分和分子靶点.在GEO芯片数据库通过检索“gastric cancer”分析筛选后获得GSE118916芯片数据,通过R软件分析得出差异基因,并绘制热图和火山...