脂联素通过AMPK调节HepG2细胞中支链氨基酸的代谢

目的:探讨脂联素(APN)对HepG2细胞支链氨基酸(BCAA)分解代谢的影响及其作用机制。方法:将培养的HepG2细胞系随机分为对照组、APN组、APN+腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)抑制剂(Compound C,CpC)组(APN+CpC)组和AMPK激动剂(AICAR)组。用Western blot检测AMPK、P-AMPK、BCKD E1α(BCAA分解代谢过程中的关键酶,磷酸化时为失活状态)及P-BCKD E1α蛋白的表达,用ELISA方法检测培养HepG2细胞上清中BCAA的含量。结果:与对照组相比,APN组和AICAR组均可以显著上调细胞P-AMPK的水平(P0.05,P0.01),显著降低细胞p-BCKD E1α及上清中BCAA的水平(P0.05,P0.01)。与APN组比较,APN+CpC组,其细胞内PAMPK水平显著下降(P0.01),P-BCKD E1α及上清中BCAA的水平明显上升(分别为P0.05及P0.01)。结论:APN可显著促进HepG2细胞BCAA的分解代谢,其作用机制与AMPK磷酸化作用的上调相关。     

高血容量血液稀释对老年患者围术期血流动力学的影响

目的:观察高血容量血液稀释(hypervolemic hemodilution,HHD)对老年患者围术期血流动力学的影响。方法:选取20名无心脏病史的麻醉手术患者;10名患者65周岁,10名55周岁。所有入试患者在术前接受相同的HHD处理(60 g/L羟乙基淀粉静脉输注,15 ml/kg)。在血液稀释后不同时间使用经食管多普勒超声监测(transesophageal Doppler monitoring,TDM)患者的血流动力学变化,同时监测患者血细胞比容(Hct)、血红蛋白、血气及心电变化。结果:所有患者手术期间均未发生任何并发症。两组患者间的一般资料、生化检查数据、Hct、血气等均无统计学差异。HHD后对照组(55周岁)的心排出量(cardiac output,CO)升高,老年组(65周岁)降低。对照组的心率(heart rate,HR)下降和心搏指数(stroke index,SI)升高(P0.05),而老年组HR无明显改变,SI轻微下降。血液稀释后对照组患者的外周血管阻力值有明显下降(P0.05),而老年患者出现了升高的趋势。结论:无心脏病史的老年患者并不能很好耐受术前急性高容量血液稀释。HHD可以导致由SI下降所致的CO下降。     

促发低氧性肺动脉高压的新机制--肺微动脉的血管胰岛素敏感性降低及其信号障碍

目的观察低氧诱导大鼠肺微血管内皮细胞（PMVEC）,是否同样存在肺血管的胰岛素敏感性变化？并探讨潜在的分子机制。方法：采用低压低氧法建立低氧性肺动脉高压（HPH）大鼠模型,14只雄性SD大鼠随机分为：正常对照组和HPH组（低氧4周）,每组7只大鼠（n=7）测定两组平均肺动脉压（mPAP）及胰岛素诱导的血管舒张效应。原代培养大鼠PMVEC,分为常氧（21％O2,37℃）和低氧（10％O2,37℃）处理,分别培养6 h、24 h、48 h和96 h收集细胞以Western blot检测Tribbles同源蛋白3（TRB3）、过氧化物酶体增殖物激活受体（PPAR^y）及胰岛素的磷脂肌醇3激酶／蛋白激酶B／内皮一氧化氮合酶（P13K／Akt／eNOS）信号通路蛋白水平,培养基上清检测一氧化氮（NO）生成量。结果：与正常对照组比较,低氧组mPAP明显升高,胰岛素诱导的肺动脉血管舒张作用明显减弱（P〈0．05,P〈0．01）。PMVEC在含胰岛素的内皮培养基培养不同时间,低氧组与常氧组相比,培养6 h NO量明显升高,培养24 h后有所下降,随低氧时间的延长下降幅度增大（P〈0．01）;随低氧时间延长,P13K-p85、p-Akt、p-eNOS表达逐渐下降,低氧时间越长下降幅度越明显,与NO生成相一致,p-ERKl／2随低氧时间延长表达明显升高;随低氧时间延长TRB3表达增加显著,而PPARY表达减少（P〈0．05,P〈0．01）。而不同培养时间常氧组间NO量及上述蛋白表达无显著性差异。结论：低氧可诱导大鼠PMVEC内TRB3的过表达从而负性调控PPARl,引起下游胰岛素信号通路受损,造成肺血管内皮功能异常,进而促进HPH发生。     

制霉菌素悬液在治疗心脏术后并发口腔溃疡患者中的应用效果

由于心脏手术患者病情的特殊性和严重性,术后口腔护理难度较大,口腔溃疡的发生率高。而传统方法对该种口腔溃疡治疗效果不佳。我科于2008年开发出一种制霉菌素悬液并将其应用于临床。对心脏术后患者口腔溃疡治疗有较好的效果。     

心脏成纤维细胞的旁分泌功能

心脏成纤维细胞（cardiac fibroblasts,CFs）是心脏正常功能和感受心脏应激和损伤的重要成分。越来越多的证据表明,CFs不仅可以生成心肌细胞生存的基质,而且对于心脏的电生理特性、收缩都有重要的作用。更为重要的是,CFs还在病理和生理的重构中担当重要角色。CFs可以通过旁分泌机制影响心肌细胞。因此,更好地了解细胞间的相互作用有助于寻找诸如心衰这类疾病的治疗靶点。     

弧形牵张成骨重建人体下颌骨颏部节段性缺损的三维有限元研究

目的:建立下颌骨颏部节段性缺损弧形牵张成骨的三维有限元模型,研究弧形牵张成骨重建下颌骨颏部节断性缺损过程中,不断变化方向的牵张力对新骨组织形成的影响。方法:建立颏部节段性缺损的三维有限元模型,并把简化后的弧形牵张器有限元模型置入截断后的下颌骨,模拟弧形牵张成骨,并测量在弧形牵张成骨过程中下颌骨整体位移及其von Mises应力分布。结果:在未考虑唇颊侧软组织作用的前提下,弧形牵张成骨形成的新骨向舌侧生长,重建的下颌骨弧度较原下颌骨弧度变小。von Mises应力主要集中于牵张器在下颌骨的固位处。结论:在弧形牵张成骨重建下颌骨缺损过程中,牵张力本身就促使新骨组织向舌侧生长,从而使重建的下颌骨弧度较正常时小。此项研究为临床上如何克服弧形牵张成骨所形成的下颌骨弧度较小的不足,提供了一定的理论依据。     

计算机辅助设计与辅助制作种植体上部全瓷冠的六年临床随访

目的:对Cerec3计算机辅助设计与辅助制作(CAD-CAM)系统制作的种植体上部全瓷冠进行6年随访,评价其远期效果,以期为临床提供参考。方法:使用Cerec3 CAD-CAM系统对植入36例患者的缺牙区的40颗种植体进行上部全瓷冠的CAD-CAM修复,定期随访,末次随访时参照改良美国加州牙科协会评价标准对CAD-CAM全瓷冠进行评价,同时对患者进行满意度问卷调查,并进行Kapl an-Mei er生存率分析。结果:除7件CAD-CAM全瓷冠失败外,其余33件CAD-CAM全瓷冠随访70个月-80个月。除费用外,患者对其余指标的满意度达100%。Ka-pl an-Mei er生存率分析显示,CAD-CAM全瓷冠的6年留存率为82.5%。结论:Cer ec3 CAD-CAM系统制作的种植体上部全瓷冠可在口腔环境中长期保存并行使功能。     

4,4′-二异硫氰基芪-2,2′-二磺酸对内质网应激诱导心肌细胞损伤的影响

目的探讨氯离子通道阻滞剂4,4′二异硫氰基芪2,2′-二磺酸(DIDS)对衣霉素诱导心肌细胞损伤以及内质网应激标记性分子糖调节蛋白78(GRP78)和CCAAT增强子结合蛋白样同源蛋白(CHOP)的影响。方法取乳鼠心肌细胞培养后,应用衣霉素构建心肌细胞内质网应激模型,随机分为对照组、衣霉素组、衣霉素+DIDS组、DIDS组。应用100ng/ml衣霉素处理24、48、72、96 h;另用DIDS 25、50、75和100μmol/L处理72 h,噻唑蓝法检测心肌细胞存活率,Western blot法检测GRP 78和CHOP蛋白表达水平。结果与对照组比较,衣霉素组48、72和96 h心肌细胞存活率明显降低(P<0.05);与衣霉素组比较,DIDS 50、75和100μmol/L处理明显增加心肌细胞存活率(P<0.05)。与对照组比较,衣霉素组GRP78和CHOP蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与衣霉素组比较,衣霉素+DIDS组GRP78和CHOP表达水平明显下调(P<0.05)。结论 DIDS可以抑制衣霉素诱导的大鼠心肌细胞损伤,其机制可能与拮抗GRP78和CHOP的表达,减轻内质网应激有关。     

小型猪体外循环动物模型建立及麻醉管理

目的:探讨小型猪体外循环(CPB)实验模型的建立和麻醉管理。方法: 小型猪12头,全麻诱导插管后,应用全血冷灌方法建立中低温阻闭升主动脉的体外循环模型,并于围CPB期进行动、静脉血氧饱和度(SaO2、SvO2)、血细胞比容(Hct)及乳酸水平(Lac)测定,同时监测围CPB期血流动力学变化。结果: 转流过程中SaO2、SvO2均在正常范围,Lac水平随CPB时间延长,显著升高,Hct在CPB后呈中度稀释,平均血压在CPB后自主循环恢复后经过较短时间恢复到正常范围内。结论: 全血冷灌法建立的小型猪CPB模型,可做为CPB条件下开展研究的动物模型。     

经导管主动脉瓣置换的动物实验方法

目的:建立经导管主动脉瓣置换（transcatheter aortic valve replacement,TAVR）的动物实验方法,确定适合于TAVR的实验动物模型及主动脉根部造影的最佳投照体位。方法:选用健康绵羊15只（体质量40～45 kg）,于颈中、下1/3处到胸骨上窝区间,通过超声心动图和血管超声分别测量绵羊主动脉瓣环直径和颈总动脉直径。分离绵羊颈总动脉,于直视下测量其直径。穿刺颈总动脉,送入猪尾巴导管,行左心室造影,确定主动脉根部最佳投照体位并进行影像学分析。行颈总动脉横切口,依次置入20F和24F介入式大动脉支架（主动脉覆膜支架）输送鞘,观察能否顺利通过。分别在置入前后,经胸超声心动图（TTE）测量主动脉瓣有效瓣口面积（effective orifice area,EOA）、返流百分比、心率,经心导管测量主动脉收缩压（aortic systolic pressure,ASP）、主动脉舒张压（diastolic aorticpressure,DAP）、平均主动脉压（mean aortic pressure,MAP）、左心室收缩压（left ventricular systolic pressure,LVSP）、左室舒张末压（left ventricular end diastolic pressure,LVEDP）。结果:用超声心动图测得收缩期主动脉瓣环直径为（24.98±2.41）mm,舒张期主动脉瓣环直径为（19.82±2.14）mm。用血管超声测得颈中、下1/3处颈总动脉直径为（5.61±0.50）mm,颈总动脉胸廓入口处直径为（9.16±0.84）mm。解剖直视下测得的颈中、下1/3处颈总动脉直径为（5.90±0.64）mm。15只绵羊均可经颈总动脉成功置入20F输送鞘,13只绵羊可成功置入24F输送鞘。造影结果显示,右前斜位2.5°±3°、头足位7.1°±6°,可清楚显示绵羊左、右冠脉的开口及主动脉根部的解剖形态。术后存活绵羊（14只）主动脉瓣的EOA、返流百分比、心率、ASP、DAP、MAP、LVSP、LVEDP与术前测量值差异均无统计学意义。结论:经绵羊颈总动脉可建立逆行TAVR实验模型,右前斜位2.5°±3°、头足位7.1°±6°,可获得良好的主动脉根部影像,满足应用介入瓣膜输送系统进行TAVR动物实验研究的需要。