人CD226基因SNP和启动子序列分析

目的 研究人CD226（PTA1）启动子及其5‘上游调控序列。方法 应用计算机软件预测启动子序列，并分析人CD226基因5‘上游调控序列以及通过RT－PCR的方法研究开放读框中的单核苷酸多态性。结果 CD226基因在－375bp处和－130bp处可能有两个启动子，含有AP－1，Ets-1,Spl,P300,PU.1,PEA3等转录因子结合序列，在编码胞浆区的序列中存在一个单核苷酸多态性位点。结论 CD226基因表达受到多种转录因子和5‘端上游调控序列的调控。     

三氧化二锑诱导急性早幼粒细胞白血病细胞凋亡的研究

目的 研究锑剂三氧化二锑（Sb2O3)对早幼粒细胞白血病细胞株NB4凋亡的诱导作用，以寻求早幼粒细胞白血病治疗的新方法。方法 采用细胞生长曲线，形态学及硝基四氮唑蓝（NBT）还原试验，判定NB4细胞的生长，分化及功能。采用细胞周期分析和DNA电泳研究细胞凋亡。结果 Sb2O3能诱导早幼粒白血病细胞凋亡，且具有时间，剂量依赖性。结论 Sb2O3能有效地诱导早幼粒白血病细胞凋亡，提示锑剂诱导细胞半亡的疗法，有望成为临床治疗早幼粒细胞白血病的新方法。     

低剂量γ射线辐照对血清一氧化氮及一氧化氮合酶水平的影响

目的：观察低剂量γ射线照射人离体外周血对血清中一氧化氮（NO）和一氧化氮合酶（NOS）水平的影响。方法：采集10份健康献血员全血，肝素抗凝，然后采用γ射线照射，照射剂量率为17Gy／min，总吸收剂量为1Gy，分别于照射前及照射后1h，2h采用分光光度法检测血清中NO含量和NOS活性。结果：经γ射线照射1h后，血清中NO及NOS水平与照射前比较明显升高（P〈0.01）；照射后2h，血清中NOS水平与照射后1h比较无统计学差异（P〉0、05），但是还明显高于照射前的水平（P〈0．01）；在照射后2h，血清中NO含量与照射后1h比较明显降低（P〈0.01），但仍明显高于照射前水平（P〈0．01）。结论：采用剂量为1Gy的γ射线照射外周血，可引起血清中NO水平及NOS活性的显著升高．从而为低剂量辐照自体血回输对肿瘤的辅助治疗提供了理论支持。     

Anterior tibial artery injury is not the contraindication of medial plantar flap: digital subtraction angiography evidence and clinical application

The medial plantar artery (MPA) is often sacrificed as the vascular pedicle of the medial plantar flap (MPF). However, for patients with ankle soft tissue defect caused by traffic accident, the anterior tibial artery (ATA) could be damaged and the blood supply of the distal foot would only come from the MPA and the lateral plantar artery (LPA). In this case, sacrificing the MPA for the MPF means that the LPA will become the mainly source of blood supply of the distal foot. Whether the blood supply of the distal foot is adequately guaranteed remains to be discussed. A total of seven patients with ankle soft tissue defect and ATA injury were enrolled in the study. The digital subtraction angiography (DSA) was performed to observe the hemodynamics of the ipsilateral foot. The MPF was harvested only when the foot arterial network consisting of the MPA, the LPA, the deep plantar arch, and the deep plantar artery of DPA, and the blood redistribution existed. DSA results showed the blood from the posterior tibial artery was redistributed to the ipsilateral foot and the MPA is not the dominant artery in the foot. Seven MPFs were harvested, and all flaps survived completely. No complications, such as pain, ulcer, and necrosis, occurred in the ipsilateral toes. The DSA could accurately and intuitively evaluate the hemodynamics of foot in patients with ATA injury. The DSA data and clinical practice proved that the ATA injury is not the contraindication of the MPF.     

病毒性肝炎的基因治疗及其伦理问题

病毒性肝炎迄今仍无特异有效的治疗药物和方法.而近年发展起来的基因治疗可能将是一种有效的治疗方法,并在体外和实验动物中取得了相当的成功,但若应用于人体还需解决很多问题尤其是伦理学问题.     

中药安迪粉针剂的放射增敏作用

目的 探讨安迪粉针剂(Andi)增强电离辐射生物学效应的作用机理。方法 以人食管癌细胞株(ECA l09)为观察对象，采用电镜、流式细胞仪分析、台盼兰染色等方法，分别观察对照、Andi、^60Co—γ线照射和Andi 照射4个组对ECA 109细胞的形态、细胞周期、细胞凋亡和坏死等的影响；并采用改良硫代巴比妥酸荧光法测定丙二醛(MDA)；羟胺法测定超氧化物歧化酶(SOD)。结果 在乏氧条件下，Andi能引起ECA 109细胞坏死(P＜0．05)，并增加MDA含量(P＜0．05)；而Andi 照射组的作用比单用Andi和单纯照射明显增强(F＝6．53，P＜0．01)；从Andi、照射、Andi照射3个组的光镜和电镜结果发现，ECA l09癌细胞明显变性、坏死、凋亡，但以Andi 照射组的改变更显著；电镜显示Andi组有较多ECA l09细胞存在糖原颗粒堆积。结论Andi可以引起乏氧ECA 109细胞的糖代谢障碍，增加细胞内自由基的产生，引起细胞坏死；Andi与^60Co—γ线合用能进一步促进乏氧细胞坏死，具有协同作用；Andi放射增敏作用的机理可能与其促进癌细胞内自由基产生或影响癌细胞糖代谢有关。     

荧光素钠阳离子脂质体的制备及向金黄色葡萄球菌转运的效率

目的　制备向革兰阳性细菌内有效转运药物的阳离子脂质体。方法　以荧光素钠为标志检测对象 ,以大豆磷脂、胆固醇、阳离子脂质为原料 ,依次进行旋转蒸发 -薄膜水化、超声分散、过膜挤压、冻干 ,制备荧光素钠阳离子脂质体。测定该脂质体的包封率和体外释药规律 ,流式细胞术 (FASC)检测该脂质体向金黄色葡萄球菌内转运的效率。结果　所得脂质体水合后粒径均匀 ,形态完整、规则 ,粒径范围 2 0～ 5 0nm ;3批脂质体的平均包封率为 19.4 2 %± 0 .31% ;体外释药呈现一级动力学规律 ,释药方程为Q =2 .82 93+2 .70 92T(r=0 .9839) ;FASC结果表明所制备的阳离子脂质体向细菌内转运率达 30 .1%± 12 .5 %。结论　制备的阳离子脂质体能够有效地向革兰阳性细菌内转运 ,可作为向细菌内递药的良好载体     

VEGF-C在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的检测血管内皮生长因子C(VEGF-C)在乳腺癌、乳腺良性肿瘤及正常乳腺组织中的表达,探讨VEGF-C与乳腺癌淋巴结转移及预后的关系。方法选用10例正常乳腺组织、30例乳腺良性肿瘤及60例乳腺恶性肿瘤标本,以免疫组织化学及半定量反转录PCR(RT-PCR)检测VEGF-C的表达。结果在乳腺恶性肿瘤组织中,VEGF-C阳性表达率为46.7%,明显高于正常乳腺(10.0%)和乳腺良性肿瘤组织(13.3%)(P<0.01);乳腺癌中VEGF-C的阳性表达率为48.2%,明显高于乳腺叶状囊肉瘤(25.0%)(P<0.01);在伴有淋巴结转移的乳腺癌组织中,VEGF-C的阳性表达率(55.0%)明显高于没有淋巴结转移的乳腺癌组织(30.0%)(P<0.01)。结论VEGF-C在乳腺癌组织中表达明显增高,并与乳腺癌的淋巴结转移显著相关,可作为乳腺癌转移、复发的预测指标之一。     

RNAi载体构建及其对PLC/PRF/5细胞突变p53基因抑制作用的实验研究

目的利用RNA干扰(RNA interference，RNAi)技术，以突变p53基因为靶基因，构建干扰载体，并观察载体对肿瘤细胞生长周期的影响，为下一步探索肿瘤基因治疗的新途径奠定基础。方法设计具有小发夹结构的两条DNA序列，经退火成为互补双链，再克隆至干扰载体中，转化TOP10菌株，提取质粒行酶切鉴定，稳定转染PLC／PRF／5细胞，Western blot检测p53蛋白，MTT法观察细胞生长曲线，流式细胞仪分析细胞周期变化。结果成功构建针对突变p53的特异性RNA干扰载体，此干扰载体转染PL／PRF／5细胞后，p53蛋白表达水平降低，肿瘤细胞生长速度减慢，G1期细胞分布明显增多。结论成功构建针对突变p53的RNA干扰载体，此干扰载体可以有效降低p53蛋白表达水平，导致突变p53基因沉默，进而延缓PLC／PRF／5细胞生长速度，阻滞肿瘤细胞停滞于G1期。     

异氟醚预处理对大鼠脑缺血/再灌注损伤细胞内游离钙的影响

目的:观察异氟醚对缺血再灌注大鼠活体脑片细胞内游离钙的影响,探讨异氟醚脑保护作用的机制。方法:采用线栓法阻闭大鼠大脑中动脉造成局灶性脑缺血,并于缺血2h后拔出栓线给予再灌注。利用细胞内钙离子荧光探针Fluo-3/AM在激光共聚焦显微镜下观察再灌注2h后大鼠脑片细胞内荧光强度。比较异氟醚预处理1h对缺血再灌注大鼠活体脑片额顶叶皮质及纹状体区域Ca2 浓度的影响。结果:缺血再灌注损伤大鼠缺血侧脑片皮层及纹状体Ca2 荧光强度明显升高。脑缺血前给予异氟醚预处理1h可抑制缺血侧大脑皮层细胞内Ca2 含量的增加,对纹状体细胞内Ca2 含量的影响无统计学差异。结论:缺血前给予异氟醚预处理可有效减轻额顶叶皮层细胞内的钙超载,对纹状体区域脑细胞内游离钙水平影响较小,提示异氟醚的脑保护作用在不同脑区存在差异。