白细胞介素-12基因再修饰基因瘤苗免疫小鼠的脾细胞过继治疗肝癌

目的　探讨白细胞介素 (IL) 2和B7 1双免疫基因转染肝癌细胞瘤苗免疫小鼠后获得的脾淋巴细胞经mIL 12基因修饰后治疗小鼠肝癌的可行性和疗效。方法　用 2 0 0PFU 细胞滴度的重组腺病毒载体 (Adv)将人IL 2和B7 1基因共同转染小鼠肝癌Hepal 6细胞株 ,经 80mg L丝裂霉素 (MMC)处理制备成肝癌细胞瘤苗 ,免疫同系小鼠后分离其脾淋巴细胞 (SLC) ,转染mIL 12基因 (Adv滴度 2 0 0PFU 细胞 )后注射入直径 1cm的小鼠皮下移植肝癌内 ,观察抗瘤效果。结果　转mIL 12基因SLC治疗组小鼠瘤体增加值最小 ( 0 .0 8± 0 .0 5 )cm3,与各对照组比差异有显著性 [(转染BGFP基因SLC、未转染SLC和生理盐水注射组分别为 ( 3 .46± 0 .15 ) ,( 3 .5 6± 0 .2 3)和( 8.12± 0 .5 4)cm3,P <0 .0 5 ]。结论　IL 2和B7 1双基因修饰肝癌瘤苗诱导小鼠产生的免疫脾淋巴细胞可能成为一种新的过继免疫治疗效应细胞及携带IL 12基因的载体细胞 ;基因治疗、特异性主动免疫和过继性细胞免疫治疗结合将有更优越的抗瘤效果。     

天花粉蛋白对荷人肝癌裸小鼠的抑癌作用

目的 探讨天花粉蛋白(trichosanthin,TCS)对荷人肝癌裸小鼠的抑癌作用。方法 采用人肝癌原位移植模型。将24只裸小鼠分为TCSⅠ组、TCSⅡ组、TCSⅢ组和对照组，TCS剂量分别为0．2mg／kg、0．4mg／kg、0．6mg／kg，对照组用生理盐水0．2ml／只腹腔注射，共10次。第21天称瘤重和裸小鼠体重，计算抑癌率。应用免疫组织化学技术，检测瘤组织中Ki67的表达。结果 对照组、TCSⅠ组、TCSⅡ组和TCSⅢ组平均瘤重分别为0．99g、0．81g、0．22g和0．20g。用药组瘤重与对照组相比有显著性差异(P＜0．05)。TCSⅠ组、TCSⅡ组和TCSⅢ组抑癌率分别为18．18％、77．78％、79．80％。对照组、TCSⅠ组、TCSⅡ组和TCSⅢ组平均鼠重增加为2．22g、1．22g、0．28g、一2．37g。用药组与对照组鼠重变化有显著性差异(P＜0．05)。对照组、TCSⅠ组、TCSⅡ组和TCSⅢ组Ki67蛋白阳性表达百分率分别为31．33％、29．92％、10．25％和9．67％。TCSⅠ组Ki67百分率与对照组相比无显著性差异(P＞0．05)。TCSⅡ组和TCSⅢ组Ki67百分率与对照组相比有显著性差异(P＜0．05)。结论 TCS对荷人肝癌裸小鼠的移植瘤有明显的抑癌作用。TCS抑制肿瘤细胞增殖可能是其抑癌的机制之一。     

α-干扰素治疗肝癌耐药性机制的研究

目的观察α-干扰素(IFN-α)治疗肝癌产生耐药性的过程,探讨其机制。方法裸鼠肝内原位接种裸鼠人肝癌高转移裸鼠模型LCI-D20肿瘤组织,随机分为7组,每组6只。其中治疗组于接种肿瘤后第2天皮下注射给予IFN-α(1．5×10~7 U/kg体重/d)20 d,治疗组A和B裸鼠于停药后第1和21天分别被处死；治疗组C和D于停药后第21天再次给予同剂量IFN-α(1．5×10~7 U/kg体重/d)联合格列卫(100mg/kg体重/d,灌胃)治疗20 d。对照组E～G分别在接种肿瘤后第28、48、68天被处死。观察裸鼠体重,肿瘤大小、体积,检测血清血管内皮细胞生长因子(VEGF)浓度、肿瘤组织微血管密度。抽提A、D、E、G各组总RNA做关于血管生成SuperArray基因芯片。结果A～G组肿瘤的大小分别为0．27、1．54、3．22、2．23、0．68、1．93、3．98 g,其中组A和组E,组D和组G相比,肿瘤大小差异有统计学意义(P＜0．05)。外周血VEGF浓度组A和组E,组C、D和组G相比差异有统计学意义(P＜0．05)。芯片结果提示在IFN-α治疗过程中,肝癌组织VEGF mRNA和裸鼠血清中的VEGF仍保持较低水平,而PDGF-AA mRNA的表达水平逐渐升高。组A微血管密度显著低于组E,而在组C和组G间差异无统计学意义。HE染色显示治疗组与对照组相比,异常核分裂象增多,肿瘤周围包膜变薄,纤维成分减少。结论肝癌可对IFN-α治疗产生耐药性,可能的机制为肝癌肿瘤血管生成由VEGF依赖转化为PDGF依赖。     

Simultaneous over-expression of insulin-like growth factor-II (IGF II) and IGF-II receptor (IGF-II R) genes in human primary cancer-implication of autocrine and paracrine mechanism in autonomous growth of hepatic cancer

This is first report about the simultaneous over-expression of both Insulin-like growth factor (IGF-II) and its receptor (IGF-II R) at mRNA level in human primary hepatic Cancer (PHC). In 10 PHC samples from China, IGF-II and IGF-II R were both over-expressed, whereas only a background signal was detected in normal liver. In 5 pairs of PHC and its non-tumorous adjacent liver tissues from South Africa, IGF-II and IGF-II R were also over-expressed in PHC. mRNA expression of IGF-II in all 5 cases and IGF-II R in 4 of 5 cases were higher in cancer than non-tumorous adjacent liver tissues. These results strongly implicate that an autocrine and/or paracrine mechanism might be involved in formation and progression of PHC.