降脂颗粒对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肠黏膜免疫屏障的保护机制研究

目的:基于肠道树突状细胞(DC)研究降脂颗粒对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肠黏膜免疫屏障的保护机制。方法:40只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、降脂颗粒组和益生菌组,每组10只。除正常组外,采用高脂饲料结合葡聚糖硫酸钠(DSS)的方法构建NASH大鼠模型。造模同时,益生菌组大鼠灌胃给予100 mg/kg双歧杆菌三联活菌胶囊溶液,降脂颗粒组大鼠灌胃给予0.828 g/kg降脂颗粒溶液,正常组与模型组大鼠灌胃给予等体积0.9%NaCl溶液,连续12周。末次给药后,采集血液,生化分析仪检测各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)水平;分离肝脏和结肠组织,HE染色和油红O染色后光镜下观察组织形态学变化。分离、提取并纯化肠系膜淋巴结树突状细胞(MLN-DCs),流式细胞术检测MLN-DCs表面CD80、CD86和MHC-Ⅱ表达。将各组提取的MLN-DCs与正常大鼠CD4~+T细胞进行共刺激培养,流式细胞术检测IFN-γ~+CD4~+T细胞和IL-4~+CD4~+T细胞的占比情况。结果:①与正常组相比,模型组大鼠血清ALT、AST、TC、TG、LDL水平均显著升高(P0.01),HDL水平明显降低(P0.05)。与模型组相比,益生菌组和降脂颗粒组大鼠血清ALT、AST、TC、TG、LDL水平均显著降低(P0.05,P0.01),HDL水平明显升高(P0.01)。②模型组大鼠肝组织可见大量脂肪变性,肝细胞肿大呈不同程度的气球样变,同时伴有较多炎症细胞浸润;结肠组织可见大量中性粒细胞和淋巴细胞浸润,黏膜层损伤明显。与模型组相比,益生菌组大鼠仍可见大量脂肪变性,但肝脏炎症反应明显减轻;降脂颗粒组大鼠脂肪变性、肝细胞气球样变及炎症浸润均显著改善;两组大鼠结肠组织的炎症细胞浸润均明显减少,且黏膜组织较为完整。③与正常组相比,模型组MLN-DCs表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ表达水平均显著增高(P0.01)。与模型组相比,益生菌组和降脂颗粒组CD80、CD86、MHC-Ⅱ表达水平均显著降低(P0.05,P0.01)。降脂颗粒组MHC-Ⅱ表达水平明显低于益生菌组(P0.05)。④与正常组相比,模型组IL-4~+CD4~+T细胞占比显著升高(P0.01),IFN-γ~+CD4~+T细胞占比显著降低(P0.01)。与模型组相比,益生菌组和降脂颗粒组IL-4~+CD4~+T细胞占比显著降低(P0.01),IFN-γ~+CD4~+T细胞占比显著升高(P0.01)。降脂颗粒组IL-4~+CD4~+T细胞占比明显低于益生菌组(P0.05)。结论:降脂颗粒能够有效改善NASH大鼠肝功能,显著减轻肝脏和结肠组织病变,其机制可能是降低MLN-DCs表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ的表达,促进初始T细胞向Th1型分化,进而保护肠黏膜免疫屏障。     

白藜芦醇对急性肝损伤小鼠NLRP3炎性体表达的影响

目的观察白藜芦醇对急性肝损伤(acute liver injury,ALI)小鼠Nod样受体家族3(Nod-like receptor 3,NLRP3)炎性体表达的影响,探讨白藜芦醇对ALI的保护作用及其机制。方法本实验采用四氯化碳制作ALI小鼠模型。将雄性ICR小鼠随机分成正常对照组、模型组、白藜芦醇低、中、高剂量组及阳性对照组,每组7只。白藜芦醇低、中、高剂量组及阳性对照组于造模前24 h及1 h分别腹腔注射剂量为10、20及30 mg/kg的白藜芦醇或剂量为100 mg/kg的乙酰半胱氨酸,对照组及模型组在相应时间点腹腔注射等量生理盐水,造模时模型组及各药物干预组采用腹腔注射5%四氯化碳,对照组腹腔注射等量橄榄油。采用蛋白质印迹(Western blot,WB)法测定小鼠肝组织NLRP3、凋亡相关微粒蛋白(apoptosis-associated speck-like protein contain,ASC)、炎性半胱天冬酶-1(caspase-1)蛋白,酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测炎症因子白介素(interleukin,IL)-1β及IL-18,全自动生化分析仪测定小鼠肝功能,病理组织学观察肝脏损伤情况及其程度。结果模型组小鼠谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)及谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)水平高于正常对照组(P<0.01);白藜芦醇各剂量组及阳性对照组小鼠ALT及AST水平均低于模型组(P<0.01)。模型组小鼠肝脏炎症积分及损伤面积均高于正常对照组(P<0.01);白藜芦醇各剂量组及阳性对照组小鼠肝脏炎症积分及损伤面积均低于模型组(P<0.05或P<0.01)。模型组小鼠NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β及IL-18表达高于正常对照组(P<0.01);白藜芦醇各剂量组及阳性对照组小鼠NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β及IL-18表达均低于模型组(P<0.05或P<0.01)。病理组织切片显示,模型组小鼠肝细胞结构表现为胞浆疏松,小叶内坏死灶较多,坏死灶中可见中性粒细胞浸润;白藜芦醇各剂量组及阳性对照组小叶内坏死灶及中性粒细胞浸润等改变较模型组减少,肝细胞的受损面积较小。结论白藜芦醇可以显著减轻四氯化碳诱导的ALI,其机制可能与抑制NLRP3炎性体活化及其下游炎症级联反应有关。     

基于信息熵理论权重分析的正交设计法优选参黛愈疡灌肠液水提工艺

目的优选参黛愈疡灌肠液的水提工艺。方法以苦参碱、氧化苦参碱的提取率和干膏率为评价指标,采用信息熵理论确定各指标权重系数并计算综合评分。以煎煮时间、加水倍数、煎煮次数为考察因素,采用L9(34)正交试验筛选参黛愈疡灌肠液的最优提取工艺并进行验证。结果最优的提取工艺为饮片煎煮3次,每次加8倍量水、每次煎煮1 h,苦参碱、氧化苦参碱的平均提取率分别为0.117 1%、0.010 8%,平均干膏率为36.53%。结论优选的水提工艺重复性好、稳定可行,可为参黛愈疡灌肠液的后续开发和工业化生产提供科学依据。     

和胃消疣汤治疗非成熟型疣状胃炎30例

目的观察中药复方和胃消疣汤治疗非成熟型疣状胃炎的临床疗效。方法将60例非成熟型疣状胃炎分为对照组(30例)和治疗组(30例),两组患者均予口服泮托拉唑、枸橼酸铋钾、阿莫西林、克拉霉素四联疗法治疗2周,再予泮托拉唑口服治疗2周;治疗组30例在上述基础上,加用中药复方和胃消疣汤口服。两组疗程均为28d。结果治疗组证候疗效、胃镜疗效均显著优于对照组(P0.01),治疗组幽门螺杆菌根除率明显高于对照组(P0.05)。结论和胃消疣汤治疗非成熟型疣状胃炎疗效可靠。     

盐霉素联合17AAG促进乳腺癌细胞MCF-7凋亡的机制研究

目的 探讨盐霉素与17-AAG联合用药对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的作用及机制。方法 CCK8法检测单药及联合用药对MCF-7细胞增殖的影响;用流式细胞术检测单药及联合用药对MCF-7细胞凋亡的影响;用qRT-PCR检测与凋亡相关基因的表达情况。结果 细胞增殖实验显示加药后48 h药物杀伤作用更为明显,且联合用药组的细胞增殖抑制率明显高于其他对照组。流式细胞术测定结果显示空白对照组、盐霉素单药组、17-AAG单药组细胞早期凋亡率分为(4.24±0.90)%、(4.79+0.89)%、(2.78±1.10)%,而联合用药组早期凋亡率为(6.42±1.70)% ,明显高于其他三组,组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05);qRT-PCR结果显示与其他三个对照组相比,联合用药组中Bcl-2的表达量显著降低,Caspase-3、Beclin-1、Bax的表达量显著增高,组间比较差异具有统计学意义(P＜0.05)。结论 盐霉素与17-AAG联合用药可能通过相关信号通路如PI3K/Akt /mTOR、MAPK、JNK等,调控凋亡基因Bcl-2、Beclin-1、Bax等的表达而促进MCF-7细胞凋亡。     

肝储备功能分级法在门静脉高压症脾切除断流术风险评估中的意义

【摘要】目的 探讨肝储备功能分级在肝硬化门静脉高压症脾切除断流手术风险评估中的应用价值。方法 回顾性分析2009年3月～2016年11月在西安交通大学第二附属医院行脾切除排钉阻断法断流术的47例肝硬化门静脉高压症患者的临床资料。根据术前吲哚菁绿15 min滞留率（ICG R15）,检测结果将患者分为A组（ICG R15＜30%)28例,〖JP2〗B组（ICG R15 30%~50%)14例,C组（ICG R15＞50%）5例。采用单因素方差分析比较三组围手术期情况。结果 C组〖JP〗较其他两组患者,术后血小板升高不明显,总胆红素、直接胆红素、术后第三天腹腔引流量以及肝昏迷和死亡人数则明显升高(P＜005)。结论 准确评估肝储备功能对评估脾切除断流手术风险和预后有一定意义,其中ICG R15＜30%患者手术风险较低;ICG R15 30%～50%为中风险;ICG R15＞50%或Child C级患者术后容易出现肝功能不全、肝性脑病、腹腔出血等并发症,断流手术风险较高,肝移植可能是更合适的治疗方法。     

储氏纾萎方对脾虚兼瘀热互结型胃癌前病变及胃蛋白酶原影响的临床研究

目的观察储氏纾萎方治疗脾虚兼瘀热互结型胃癌前病变的临床疗效。方法将130例脾虚兼瘀热互结型胃癌前病变患者随机分为治疗组与对照组,每组65例。治疗组予储氏纾萎方,对照组予胃复春片。两组疗程均为3个月,观察中医证候积分、胃镜下黏膜病理积分、胃蛋白酶原(PGI、PGII)的变化情况。结果(1)组间治疗后比较,纳呆消瘦、脘(腹)胀、脘(腹)痛、便溏、乏力、嗳气等中医证候的改善治疗组明显优于对照组(P0.05)。(2)组间治疗后比较,萎缩、肠化、慢性炎症、活动性病理积分差异有统计学意义(P0.05)。(3)组间治疗后比较,PGI、PGI/PGII水平差异有统计学意义,治疗组明显优于对照组(P0.05)。结论储氏纾萎方治疗脾虚兼瘀热互结型胃癌前病变的疗效满意,而调节血清PGI、PGII蛋白水平可能是本方起效的机制之一。     

软肝煎治疗非酒精性脂肪肝临床观察

[目的]观察自拟软肝煎对非酒精性脂肪肝患者的临床疗效。[方法]将符合入选标准的病例60例,随机分为治疗组和对照组,其中治疗组30例,对照组30例,分别采用软肝煎及多烯磷脂酰胆碱胶囊治疗,疗程均为12周。观察两组患者肝功、血脂、腹部B超变化。[结果]治疗组与对照组的总有效率分别为86.7%和73.3%,治疗后两组血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰转移酶(GGT)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)较治疗前均明显改善(P0.05),肝脏B超较治疗前改善(P0.05)。[结论]软肝煎对非酒精性脂肪肝疗效确切,值得临床推广。     

胃康宁治疗脾虚寒热瘀毒型慢性萎缩性胃炎伴胃癌前病变临床疗效及调节COX-2蛋白的机制研究

目的 观察胃康宁治疗脾虚寒热瘀毒型慢性萎缩性胃炎伴胃癌前病变患者的临床疗效及调节COX-2蛋白的机制。方法将90例脾虚寒热瘀毒型慢性萎缩性胃炎伴胃癌前病变患者随机分为治疗组和对照组,每组45例。治疗组口服胃康宁组方,对照组口服胃复春片,疗程均为12周。观察临床疗效、病理改变,比较两组中医证候积分和胃黏膜COX-2蛋白变化情况。结果 1治疗组、对照组临床总有效率分别为93.3%和57.6%;组间临床疗效比较,差异有统计学意义(P0.05)。2治疗前后组内比较,两组炎症、萎缩、肠化生积分和总积分差异均有统计学意义(P0.05)。组间治疗后比较,两组炎症、萎缩、肠化生积分和总积分差异均有统计学意义(P0.05)。3治疗前后组内比较,胃痛、痞满、嘈杂、乏力、纳呆积分和总积分差异均有统计学意义(P0.05)。组间治疗后比较,胃痛、痞满、纳呆积分和总积分差异均有统计学意义(P0.05)。4治疗前后组内比较,治疗组COX-2值差异有统计学意义(P0.05);组间治疗后比较,COX-2值差异有统计学意义(P0.05)。结论 胃康宁治疗脾虚寒热瘀毒型慢性萎缩性胃炎伴胃癌前病变临床疗效满意,可显著改善患者临床症状,缓解胃黏膜炎症,逆转胃黏膜萎缩和肠上皮化生,降低胃黏膜COX-2蛋白表达可能为机制之一。     

姜莉云补火生土法治疗慢性萎缩性胃炎经验

姜莉云教授从事中医临床及研究30余年,在治疗脾胃系统疾病及疑难杂症方面有独到的诊治经验,认为慢性萎缩性胃炎脾肾阳虚型者十之八九,"水寒土湿"为慢性萎缩性胃炎致病之根本,气机阻滞、瘀血胃络、痰湿中阻为发病之源,为本虚标实之疾。治疗慢性萎缩性胃炎以补火生土法治其本,配以调畅气机、化瘀通络、燥湿化痰治其标,提倡治本为主兼除其标,主张以扶阳之法治疗慢性萎缩性胃炎。临证予吴萸四逆汤扶阳固本,从而阻断或延缓慢性萎缩性胃炎的发展。