新疆维吾尔族乳腺癌中细胞色素P45019基因rs10046位点基因多态性与病理免疫组化指标表达状态的研究

目的 探讨应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法检测 112 例维吾尔族女性乳腺癌患者和 139 例维吾尔族正常女性细胞色素 P450（CYP）19 基因 rs10046 位点多态性,回顾性分析该位点多态性和乳腺癌免疫组化的关系。结果：细胞色素 P450 19 基因 rs10046 位点三种基因分型符合Hardy-Weinberg 平衡;细胞色素 P450 19 基因 rs10046 位点存在 C-T 的替换,等位基因 C、T 在病例组所占的比例分别为 48.2%、51.8%,对照组为 47.5%、52.5%,等位基因分布无统计学差异（P〉0.05）;CC、TC、TT 基因型在乳腺癌组分布频率分别为 26.8%、42.9%、30.4%,在对照组中分布频率分别为 18.0%、,57.6%、24.5%,两组间分布差异有统计学差异（P〈0.05）。细胞色素 P450 19 基因型与乳腺癌组织中的 ER、PR、Her-2、Ki-67 的表达差异及相关性均无统计学意义（P〉0.05）。结论新疆维吾尔族乳腺癌的CYP19基因rs10046位点多态性与对照组的分布差异有统计学意义,基因rs10046位点多态性与免疫组织化学指标表达的状态差异无统计学意义。     

乳腺癌淋巴结转移、微转移和孤立肿瘤细胞状态下肌动蛋白和PTEN的表达及意义

目的 探讨肌动蛋白和PTEN蛋白在乳腺癌腋窝淋巴结中从单个肿瘤细胞或者肿瘤细胞团到明显肿瘤细胞转移发展过程中的意义.方法 收集92例女性乳腺癌术后淋巴结共293枚,采用免疫组化的方法对常规HE染色未发现转移的淋巴结行细胞角蛋白19(CK19)以及肌动蛋白染色,筛选出含有微转移、孤立肿瘤细胞的淋巴结.对筛选出的淋巴结行PTEN检测,观察不同转移情况下PTEN的表达情况.结果 所有293枚淋巴结中,有明显转移的84枚(28.67%),有微转移的42枚(14.33%),含孤立肿瘤细胞者22枚(7.51%);所有明显转移灶周围均有肌动蛋白表达,34枚(80.95%)含有微转移的淋巴结中微转移灶周围有肌动蛋白表达.PTEN在84枚含有明显转移的淋巴结中均呈低表达,在38枚含有微转移的淋巴结中呈低表达,其余4枚未见PTEN表达.结论 淋巴结内间质反应中肌动蛋白表达变化在乳腺癌细胞进入淋巴结发展为微转移灶及进一步发展为明显转移形成的过程中可能发挥重要的作用.PTEN蛋白的低表达可能是促进淋巴结内肿瘤细胞生长和侵袭的重要原因之一.     

不可逆性电穿孔介导HPV16 E6 shRNA干扰质粒对宫颈癌SiHa细胞增殖的影响

目的:探讨利用治疗剂量脉冲电场产生不可逆电穿孔(IRE)介导HPV16 E6 shRNA干扰质粒进入细胞的可行性,阐明二者共同作用对宫颈癌SiHa细胞增殖的影响及其作用机制。方法:将HPV16 E6基因特异性干扰序列插入pGenesil-1质粒,构建HPV16 E6 shRNA真核表达载体,将10个电压为800 V、脉宽100 μs、频率1 Hz的IRE作用于SiHa细胞与HPV 16 E6 shRNA干扰质粒的混悬液,根据处理因素组合,分为空白对照组、IRE处理组、pGenesil-N组、pGenesil-N+IRE组、pGenesil-E6组和pGenesil-E6+IRE组。在荧光显微镜下观察SiHa细胞绿色荧光蛋白(GFP)的表达,计算GFP表达效率;RT-PCR法检测HPV 16 E6 mRNA表达水平,Western blotting法检测HPV16 E6蛋白、P53及PCNA蛋白表达水平,CCK-8法检测各组SiHa细胞增殖能力的变化。结果:成功构建HPV16 E6 shRNA真核表达载体,IRE处理后24 h细胞即可见到绿色荧光;与IRE组比较,pGenesil-E6+IRE组E6 mRNA表达水平下降(P<0.05),E6蛋白表达水平降低(P<0.05),P53蛋白表达水平增高(P<0.05),PCNA表达水平下降(P<0.05);CCK-8法检测,与pGenesil-E6组比较,pGenesil-E6+IRE组细胞增殖活性下降更明显(P<0.05)。结论:治疗剂量的IRE可介导外源基因进入细胞,二者联合作用能明显抑制宫颈癌SiHa细胞增殖。     

1679例乳腺癌内乳淋巴结转移的高危因素分析

目的 探讨乳腺癌内乳淋巴结转移的高危因素。方法回顾性分析复旦大学附属肿瘤医院乳腺外科1956-2003年开展的l679例乳腺癌扩大根治术临床资料,选取病人年龄、肿瘤大小、肿瘤位置、腋窝淋巴结转移状况共4个乳腺癌内乳淋巴结转移可能相关的因素,分析不同情况下内乳淋巴结转移的高危因素。结果在选取的4个因素中,肿瘤大小不是影响内乳淋巴结转移的独立因素。腋窝淋巴结状况为内乳淋巴结转移的重要影响因素。不同情况下,肿瘤位置和年龄对内乳淋巴结转移的影响也不同。腋窝淋巴结阴性病人的内乳淋巴结转移率为4．4％,腋窝淋巴结1-3个阳性为18．8％,腋窝淋巴结4-6个阳性为28．1％,腋窝淋巴结≥7个为41．5％。结论有4个或以上腋窝淋巴结转移、内侧肿瘤合并腋窝淋巴结转移、肿瘤直径〉5．0cm的年轻病人是内乳淋巴结转移率的高危病人。     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂LBH589抑制基底样乳腺癌生长和转移

目的：探究组蛋白去乙酰化酶抑制剂LBH589对基底样乳腺癌（BLBC）生长和转移的抑制作用。方法：通过MTT法和平板克隆实验检测LBH589对人乳腺癌细胞系MDA-MB-231和小鼠乳腺癌细胞系4T1增殖能力的影响;Transwell实验检测LBH589对细胞迁移和侵袭能力的影响;实时荧光定量PCR和免疫印迹实验检测LBH589对细胞上皮-间质转化的作用;构建4T1乳腺癌细胞Balb/c小鼠脂肪垫成瘤模型,腹腔注射LBH589,观察4T1细胞成瘤和转移能力。结果：体外实验结果显示,与对照组相比,LBH589显著抑制MDA-MB-231和4T1细胞的增殖能力（t=11.37,P<0.05;t=18.18,P<0.05）、克隆形成能力（t=7.76,P<0.05;t=15.22,P<0.05）、迁移（t=8.8,P<0.05;t=18.0,P<0.05）和侵袭能力（t=8.24,P<0.05;t=15.99,P<0.05）;与对照组相比,LBH589上调细胞的上皮标志物CDH1的mRNA(t=7.33,P<0.05)表达水平,抑制细胞的...     

乳腺癌患者家庭关怀度与自杀意念的研究

目的调查乳腺癌患者家庭关怀度与自杀状况间的关系,进一步了解乳腺癌患者家庭功能与自杀意念的相关性,为临床心理干预工作的加强提供基础数据.方法对112例乳腺癌患者（手术及非手术患者）采用APGAR家庭关怀度指数问卷和自杀意念自评量表（SIOSS）分别评定家庭关怀度和自杀意念状况,并分析家庭关怀度与乳腺癌患者自杀意念各因子得分之间的关系.结果乳腺癌患者手术组与非手术组、正常对照组间家庭关怀度指数存在显著差异,且家庭关怀度与自杀意念量表总分及各因子得分呈负关联.结论改善家庭功能、增加家庭支持可能有利于减低乳腺癌患者自杀意念的发生.     

乳腺癌中HER-2蛋白表达及基因扩增检测的比较研究

目的 比较免疫组化（IHC）法与荧光原位杂交（FISH）法检测乳腺癌组织HER-2状态,分析二者相关性.方法 应用IHC法与FISH法对56例女性新发乳腺癌行HER-2蛋白表达及基因扩增的检测.结果 56例受试者中HER-2蛋白表达（-）、（＋）、（＋＋）、（＋＋＋）者分别为9例（16.1%）、29例（51.8%）、11例（19.6%）、7例（12.5%）;有26例（46.4%）HER-2基因扩增,30例（53.6%）无扩增.HER-2基因扩增主要表现在HER-2（＋＋）和（＋＋＋）中,基因扩增率分别为72 7%和100%.HER-2（＋）中有11例（37.9%）出现基因扩增,HER-2（-）中未见基因扩增.两种方法检测结果的阳性率差异有统计学意义（χ2=19.778,P＜0.01）.HER-2（-）及HER-2（＋＋＋）与FISH结果一致性很好（Kappa=0.969）.HER-2（＋）及HER-2（＋＋）与FISH结果一致性较差（Kappa=0.271）.结论 IHC是HER-2表达初步的筛查方法,HER-2（-）和（＋＋＋）者与基因扩增情况有很好的一致性,可直接指导临床治疗.HER-2（＋）和（＋＋）者中有部分HER-2基因扩增阳性,如行靶向治疗需进一步行FISH检测.     

光动力疗法对乳腺癌干细胞的作用研究

目的通过体外实验探索以血卟啉单甲醚作为光敏剂的光动力疗法(PDT)对乳腺癌干细胞的作用及可能机制,寻找可能抑制乳腺癌干细胞的有效方法。方法采用流式细胞仪从MCF-7乳腺癌细胞系中分离出表型为CD44+CD24-/lowESA+乳腺癌干细胞,分别检测MCF-7乳腺癌干细胞及分选后的乳腺癌干细胞在空白处理组、单纯光照组、单纯光敏剂组和PDT组相对应的细胞生长抑制率,并用流式细胞仪检测其早期凋亡率。结果流式方法分选的MCF-7乳腺癌干细胞系干细胞比例为(1.2±0.4)%。空白对照组、单纯照射组、单纯光敏剂组及PDT组MCF-7乳腺癌干细胞生长抑制率比较,差异有统计学意义(P<0.05);其中PDT组较空白对照组、单纯照射组、单纯光敏剂组均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。空白对照组、单纯照射组、单纯光敏剂组及PDT组未分选MCF-7乳腺癌干细胞生长抑制率比较,差异有统计学意义(P<0.05);其中PDT组较空白对照组、单纯照射组、单纯光敏剂组均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。空白对照组、单纯照射组及PDT组MCF-7乳腺癌干细胞与未分选MCF-7乳腺癌干细胞生长抑制率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。空白对照组、单纯照射组、单纯光敏剂组与PDT组乳腺癌干细胞凋亡率比较,差异有统计学意义(P<0.05);其中PDT组较空白对照组、单纯照射组、单纯光敏剂组均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论以血卟啉单甲醚作为光敏剂的PDT对乳腺癌干细胞具有一定程度的抑制作用,其抑制机制可能与诱导细胞凋亡有关,但是仍不可避免地存在耐受。因此单独使用PDT的治疗效果有限,需联合其他治疗以期达到更好的预后。     

淋巴结阴性乳腺癌血清TRACP5b检测及临床意义

目的探讨血清抗酒石酸酸性磷酸酶5b（TRACP5b）预测淋巴结阴性乳腺癌骨转移的临床价值。方法采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测18例健康女性、26例淋巴结阴性乳腺癌的血清TRACP5h水平。结果乳腺癌组血清TRACPSb水平为（3．85±0．85）U／L较健康组（2．08±O．84）U／L明显升高,差异有统计学意义（P〈0．05）;血清TRACP5b预测淋巴结阴性乳腺癌骨转移的敏感性为42．31％,特异性为94．44％。结论血清TRACPSb在早期预测乳腺癌骨转移中的敏感性和特异性良好,可作为诊断乳腺癌骨转移的血清标记物之一。     

胸锁乳突肌外缘小切口甲状腺手术的临床观察

目的 探讨在局部麻醉下采用胸锁乳突肌外缘小切口甲状腺手术的技巧和优势.方法 2008年7月～2010年5月选择经彩超证实无颈淋巴结肿大的甲状腺肿块患者100例,随机分为两组:实验组(胸锁乳突肌外缘小切口)和对照组(传统颈前沿皮纹切口),每组50例,均采用1%利多卡因行皮下浸润麻醉,根据术中冰冻病理结果选择术式,将两组资料进行对比分析.结果 两组患者均在局部麻醉下完成手术,术中无影响手术的麻醉不良反应.两组病例肿块大小、手术时间、术中出血及术后并发症差异均无显著性(P＞0.05).切口长度、术后引流量及术后住院时间差异有显著性(P＜0.05).实验组出现1例低钙抽搐,对照组出现1例声嘶,分别于术后25 d及1.5月恢复.结论 采用胸锁乳突肌外缘小切口下作甲状腺手术,可以同时处理双侧甲状腺病变,操作简单,安全有效,术后不需常规引流,具有显著的微创美容特点.