不同胎龄的胎儿和少儿皮肤中bax,bcl-2和p53基因表达的变化

目的：探讨凋亡相关基因bax, bcl-2和p53在不同胎龄的胎儿皮肤和少儿皮肤组织中表达的变化特征及其可能的生物学意义。方法： 运用末端脱氧核糖转移酶介导的生物素化脱氧尿嘧啶缺口标记技术(TUNEL)检测18例不同胎龄(13-32周)的胎儿皮肤和6例少儿皮肤组织中细胞凋亡的变化后，提取这些皮肤组织中的总RNA，分离mRNA，用RT-PCR方法检测bax, bcl-2和p53基因在不同组织中的表达变化特征。结果： 随着胎儿的生长发育，皮肤组织中的细胞凋亡率逐渐增加。在早期妊娠胎儿的皮肤中，bcl-2基因表达水平较高，随着胎龄的增加，bcl-2基因的转录本含量逐渐降低，在少儿的皮肤组织中，这种基因的表达量明显低于早期妊娠胎儿皮肤（P<0.01）。与bcl-2基因不同，在早期妊娠胎儿皮肤组织中，p53基因表达水平较低，而在晚期妊娠胎儿和少儿的皮肤内，该基因表达较强，而bax基因在不同发育时期的胎儿和少儿皮肤组织中表达差异不显著（P>0.05）。结论： 晚期妊娠胎儿和少儿皮肤组织中细胞增殖减缓，细胞趋向分化或凋亡的增加可能与p53基因表达增强，bcl-2表达降低相关；而p53表达降低，bcl-2表达升高可能是早期妊娠胎儿皮肤中细胞凋亡较少的机制之一。     

不同低温保护剂对皮肤组织β1整合素表达影响的比较

目的比较两种不同低温保护剂对皮肤组织β1 integrin低温保存后表达的影响，为寻求皮肤组织低温保护剂的最佳配方提供试验依据。方法获取新鲜成人皮肤组织分为3组．新鲜对照组、海藻糖／二甲基亚砜（T／D）组、二甲基亚砜／丙二醇（D／P）作为低温保护剂保存组，-196℃液氮冻存7d、14d复温，免疫组织化学染色对各组间皮肤进行比较。并在此基础上，进一步采用RT-PCR方法对不同低温保护剂保存后皮肤的β1 integrin基因水平进行了深入的研究。结果通过光镜图象观察和基因水平分析结果说明，0．5M海藻糖／二甲基亚砜能够很好保护皮肤组织，β1 integrin的基因表达量与新鲜皮肤组相似。结论海藻糖与二甲基亚砜联合应用对皮肤组织β1 integrin的保护作用优于传统组。     

心肌肽素对豚鼠心室肌细胞钠通道的影响

目的： 研究心肌肽素对豚鼠心室肌细胞钠通道的影响，探讨心肌肽素在离子通道水平的作用机制。 方法： 用急性酶解分离法获得豚鼠心室肌细胞，标准全细胞膜片钳技术记录钠电流(I_Na)。 结果： 心肌肽素1、5、10、50、100、500 mg/L使豚鼠心室肌细胞I_Na分别减少(0±1)%、(6±2)%、(10±2)%、(15±1)%、(22±9)%、(30±6)%，呈浓度依赖性抑制I_Na。心肌肽素50 mg/L使I_Na激活时间(TTP)从(2.8±0.7) ms延长至(3.0±0.8) ms (P<0.05)；使I_Na电流密度-电压曲线上移，但不改变激活电位、峰电位、反转电位和I-V曲线的形状；不影响稳态激活曲线、稳态失活曲线和稳态失活后恢复曲线。 结论： 心肌肽素浓度依赖性抑制豚鼠心室肌细胞I_Na，可能是其抗心律失常作用的机制之一。     

多器官功能障碍综合征小鼠脾脏树突状细胞与炎症因子变化的关系

目的探讨多器官功能障碍综合征（MODS）病程中脾脏树突状细胞（DC）变化对炎症因子的影响与作用。方法采用腹腔注射酵母多糖的方法复制小鼠MODS模型，分为正常对照组和MODS组。采用流式细胞技术检测脾脏DC免疫表型，运用免疫组化技术检测脾脏中促炎因子IL-1β与抗炎因子IL-10的表达，计量观察DC与炎症因子在病程中的变化并做相关分析。结果伤后6h组，脾脏中CD11c^＋／MHC-Ⅱ’DC数目与IL-18’细胞数目均明显增多，至24h组达峰值。自48h组，CD11c^＋／MHC-Ⅱ’DC与IL-1β’细胞含量开始下降，在6天组和10～12天组降至正常组或低于正常组含量；而同时CD11c^＋／MHC-Ⅱ^-DC和IL-10阳性细胞含量则相对增多，至10～12天组阳性细胞含量显著升高达到峰值。结论DC的活性在MODS病程早期与IL-1β表达呈正相关性，在病程晚期与IL-10表达呈负相关，提示脾脏DC活性变化与促炎因子和抗炎因子均有密切的相关性。     

枢椎侧弓螺钉安全钉道的判定与测量

目的:利用Unigraphics(UG)三维重建技术寻找枢椎侧弓螺钉安全钉道的经过,并进行相关参数的测量.方法:对4例干燥和8例新鲜枢椎行CT扫描, UG软件重建虚拟实体,利用3.5 mm虚拟螺钉模拟进钉,寻找安全钉道经过的特征标记点.以此为基础,测定57例干燥枢椎安全钉道的内倾角与上倾角(AutoCAD环境)及进针点距峡部及下关节突外缘的距离(手工测量).结果:模拟发现横断面安全钉道经过前弓中宽后界的内中1/3交界与中宽前界的外中1/3交界,矢状面经过前弓中宽后界中部及前界中宽与上关节突下界交界处.对另57例干燥标本进行测量发现安全钉道的内倾角为左/右＝(10.94±6.53)°/(11.95±2.82)°,上倾角为(13.31±5.44)°/(14.45±3.80)°,在大多数标本椎板后下方有一突起的骨嵴 (左/右＝84.2%/84.98%) ,进针点多位于这一骨嵴线上(左/右＝87.5%/84.9%).进针点距离下关节外侧缘左/右＝(6.71±1.33)mm/(6.28±1.48)mm,距离后弓左/右＝(9.93±1.38)mm/(8.47±1.70)mm.个体间差异较大.结论:侧方椎弓螺钉固定的安全钉道在横断面经过横突孔区域(侧弓前份)中宽后界的内中1/3交界与中宽前界的外中1/3交界,矢状面经过后方中宽中部及前方中宽与关节突下界交界处,不同侧别间及不同个体间有明显差别.     

小儿心脏术后急性呼吸窘迫综合征的预防及治疗

为探讨小儿心脏术后急性呼吸窘迫综合征（ARDS）的临床发病特点及治疗对策,对23例ARDS患儿（包括早期发病8例、迟发15例）采用：①限制吸气峰压≤35cmH2O(3.43kPa);②早期应用呼气末正压（PEEP）8-12cmH2O(0.78-1.18kPa);③反复性侧卧体位等措施。结果23例中1例（1/23）继发感染、急性肾功能衰竭死亡;并发气胸2例（2/23）;严重肺不张3例（3/23）;痰培养阳性5例（5/23）。结果显示：对ARDS高危患儿应慎重选择早期拔管指征;对诊断明确者应用低容量限压通气配合体位变换可减少并发症、提高治愈率。     

中国成年人生活方式和心血管代谢因素与甲基化年龄加速的相关性分析

目的比较分析5种甲基化年龄加速指标与生活方式和心血管代谢因素间的相关性。方法基于中国慢性病前瞻性研究中有基线外周血全基因组甲基化检测数据的研究对象980人, 计算Horvath时钟、Hannum时钟、DNAm PhenoAge、GrimAge和Li时钟5种甲基化年龄。根据甲基化年龄对实足年龄回归的残差值计算甲基化年龄加速。研究的生活方式因素包括吸烟、饮酒、饮食习惯、体力活动、经BMI和腰围联合定义的体型。心血管代谢因素包括血压、血糖和TC。利用一般线性模型分析生活方式和心血管代谢因素与各甲基化年龄加速指标的相关性[β值(95%CI)]。结果 GrimAge加速指标与吸烟、饮酒、体力活动水平及BMI存在关联。与不吸烟、不饮酒或BMI为18.5～23.9 kg/m2 者相比, 吸烟者(每天吸烟1～14、15～24、≥25支者对应的β值依次为0.71(95%CI:0.57～0.86)、0.88(95%CI:0.73～1.03)、0.99(95%CI:0.81～1.18)、重度饮酒者[每日纯乙醇量≥60 g:0.33(95%CI:0.11～0.55)]、BMI<18.5 kg/m2者[0...     

经皮冠状动脉介入治疗对冠心病患者术后焦虑和抑郁影响的研究

目的 评价经皮冠状动脉介入治疗对冠心病患者术后焦虑和抑郁影响。方法 600例冠心病患者根据是否在冠状动脉造影时接受支架植入术治疗分为支架组（n = 400）和非支架组（n = 200）,400例支架组患者根据术后是否接受心理干预治疗进一步随机分成干预组（n = 200）和非干预组（n = 200）。患者入院后1 d、PCI治疗后1 d、出院时分别采用焦虑自我量表和抑郁自我量表进行焦虑和抑郁评分,比较不同时间患者焦虑和抑郁评分。结果 3组患者平均年龄、性别构成、血红蛋白含量、总胆固醇含量、甘油三酯含量、低密度脂蛋白胆固醇含量和高密度脂蛋白胆固醇含量差异均无统计学意义（均P > 0.05）,具有可比性。入院后1 d,3组冠心病患者焦虑和抑郁评分差异均无统计学意义（均P > 0.05）;PCI治疗后 1 d,干预组和非干预组冠心病患者焦虑和抑郁评分均显著高于非支架组（均P < 0.05）,干预组和非干预组冠心病患者焦虑（t = 11.21,P < 0.01;t = 9.96,P < 0.01）和抑郁评分（t = 8.56,P < 0.01;t = 6.73,P < 0.01）均显著高于入院后1 d。出院时,3组冠心病患者焦虑和抑郁评分差异均有统计学意义（均P < 0.05）,干预组和非干预组冠心病患者出院时焦虑（t = 21.57,P < 0.01;t = 15.77,P < 0.01）和抑郁评分（t = 24.33,P < 0.01;t = 15.01,P < 0.01）均显著低于PCI治疗后 1 d,干预组焦虑和抑郁评分均显著低于非干预组（均P < 0.05）。结论 PCI治疗会加重冠心病患者术后焦虑和抑郁状态,而心理干预治疗可减轻焦虑和抑郁状态。     

DeBakey Ⅰ、Ⅱ型主动脉夹层的外科治疗

目的 总结DeBakeyⅠ、Ⅱ 型主动脉夹层的外科治疗经验,探讨其手术指征、基本方法和手术技术。方法 对131例DeBakeyⅠ、Ⅱ型主动脉夹层患者实施手术治疗,其中25例行升主动脉＋部分主动脉弓替换术,83例行主动脉根部替换术（Bentall‘s手术）,10例行升主动脉替换＋全弓替换术,4例行细胞感升主动脉替换＋主动脉瓣替换术（Wheats),3例行主动脉根部替换术＋全弓替换术,4例行“象鼻手术”（(Elephant Trunk),2例行主动脉根部替换＋象鼻技术。结果 本组死亡4例,死亡率3．05％。急诊手术44例,死亡3例,死亡率6．81％。择期手术87例,死亡1例,死亡率1．1％。结论 早期手术治疗是降低DeBakeyⅠ、Ⅱ型主动脉夹层病死率的关键。右锁骨下动脉插管,深低温停循环结合选择性脑灌注是一种简便易行的脑保护方法,有利于降低该病死亡率和并发症的发生率。     

EFFECT OF VL AND VH CONSENSUS SEQUENCE-SPECIFIC PRIMERS ON THE BINDING AND EXPRESSION OF A MINI- MOLECULE ANTIBODY DIRECTED TOWARDS HUMAN GASTRIC CANCER

Objective. To construct ScFv and Fab from murine anti-gastric cancer monoclonal antibody(mAb) 3H11.Methods. At first,3H11 ScFv and Fab were constructed with Ⅴ genes PCR amplified by degenerate primers for FR1 .The bacterial expressed 3H11 Ab fragments showed no antigen binding activity.Then,phage antibody library and random mutated library were constructed from 3H11 hybfidoma cells and panning selection was performed. Again the i-dentification of positive clone was failed. Finally the N-terminal sequences of Ⅴ regions were resumed to 3H11 original sequences by site-directed mutagenesis via PCR.Restdts. Binding activity to gastric cancer cells was detected only from N-terminal sequence corrected 3H11 ScFv and Fab, though the expression of the Ab fragments was not affected. Correction of either VL or VH N-terminal se-quences could partially resume the antigen binding activity. Conclusion. Sequence changes of Ⅴ region N terminal introduced by PCR may seriously affect antigen binding without affecting the expression of antibody.