对《2007年医院管理年活动方案》的认识与思考

针对新出台的2007年医院管理年活动方案，文章归纳了2007年管理年活动的主要内容和重点要求，并针对当前我国医院实际，紧密结合《医院管理评价指南（试行）》，从理念、质量、服务和管理4个方面着重分析了医院管理者应当关注的问题，以更好地贯彻落实管理年的有关精神和要求，科学制定出适合各级医院特点的更为具体和更具操作性的实施细则，促进我国公立医院管理水平不断提升。     

全肠外营养对肠免疫功能影响的研究

为了研究通过不同营养方式添加谷氨酰胺或其前体以强化标准全肠外营养的效果，作者利用ＳＰＦ大鼠完全肠外营养模型观察标准全肠外营养对肠免疫屏障和细菌移位的影响，以及经口或静脉添加丙氨酰谷氨酰胺和经口添加谷氨酰胺强化对肠屏障功能是否具有维护作用。结果表明，全肠外营养支持１周，肠固有层中ＣＤ＋３、ＣＤ＋４、ＣＤ＋８细胞明显下降，调节功能减弱，肠固有层中ＩｇＡ阳性细胞数下降，合成及分泌ＩｇＡ减少，肠腔内细菌Ｓ－ＩｇＡ包被率下降，肠壁清菌能力减弱，肠粘膜免疫功能减退；肠道需氧菌特点是大肠埃希菌优势生长，厌氧菌相对减少，定植抗力降低；细菌发生移位，血浆内毒素潜在升高。提示ＴＰＮ支持１周即已引起肠屏障功能一定程度减退。本方法确能对肠免疫屏障和生物屏障提供保护，具有临床应用前景。     

人骨髓间质干细胞体外扩增和向内皮细胞定向诱导分化的研究

目的：体外分离、扩增成人骨髓间质干细胞（MSCs）和向内皮细胞（ECs）定向诱导分化，开辟心血管组织工程种子细胞的新来源。 方法： 采用Percoll(1 073 g/L)从正常成人骨髓中分离出MSCs，纯化和扩增后流式细胞仪鉴定其纯度；用血管内皮生长因子(VEGF)诱导MSCs向ECs分化，Ⅷ因子(vWF)免疫组化和透射电镜(TEM)鉴定细胞性质。 结果： 5.0×105个MSCs在体外扩增15代后，获得8.0×1012个MSCs，扩增了约1.6×107倍；MSCs在加入VEGF诱导培养大约14-21 d，80%-90%的诱导细胞对Ⅷ因子相关抗原呈阳性反应；TEM可观察到胞浆内有Weible-palade小体，证实为ECs。 结论： 成人骨髓MSCs在体外具有定向诱导分化为ECs的潜能，这为心脏组织工程瓣体外构建, 尤其是在小儿先天性心脏病组织工程研究中种子细胞的来源提供了可能性。     

用蛋白Ⅷ在噬菌体表面展示抗体分子效果的观察

目的 观察抗体分子通过丝状噬菌体主要外壳蛋白Ⅷ（cpⅧ）和次要外壳蛋白Ⅲ（cpⅢ)在噬菌体表面呈现效果的差异。方法 分别构建通过cpⅢ或cpⅧ展示抗乙肝表面抗原（HBs)Fab,ScFv和抗角蛋白（Ker)Fab的表达载体，制备噬菌体抗体，比较其抗原结合活性和Fab呈现水平。用多种方法尝试提高cpⅧ介导的噬菌体展示效果。结果 cpⅧ对不同特异性抗体Fab段和不同形式的小分子抗体（Fab和ScFv)的展示效果均低于cpⅢ的展示，增加cpⅧ－Fab对野生型cpⅧ的表达比例，试用不同菌株，在Fab和cpⅧ之间插入间隔序列及换用控制更为严密的启动子等,匀未能改善cpⅧ介导的噬菌体展示。结论 以前所报道的通过cpⅧ多价展示Fab段不是普遍存在的现象，对有些抗体基因不能达到多价展示。     

不同轴向伸长率下兔股动、静脉的顺应性变化

研究轴向应变对血管顺应性的影响 ,明确能否通过调节吻合张力建立顺应性一致的静脉移植修复动脉缺损模型。取一段做完轴向拉伸实验的血管 (兔股动、静脉分别为 13、12条 ) ,测量不同伸长率下的压力—容积曲线 ,换算为压力—标准容积曲线 ,用幂函数 P=M1 × [еM2 ( v- v0 ) - 1]进行拟合 ,用多项式 M=a1 λ5+a2 λ4 +a3λ3+aλ2 +a5λ+a6 拟合 M- λ数据。由 P=M1 × [еM2 ( v- v0 ) - 1]得出在动脉平均压 (11.78KPa)下血管顺应性 dv/ dp=1/ (M1 ×M2 +11.78M2 )。由张力 T与伸长率 λ的单值对应关系建立起 T与顺应性 dv/ dp的单值对应关系 ,发现在张力 1.19g时 ,在动脉平均压下 ,动静脉的顺应性一致 ,为 0 .0 31,其所对应的动静脉伸长率为 :1.6 7及 1.32     

静态与动态下脱细胞猪主动脉瓣种植人成纤维细胞初步研究

目的 探索在脱细胞猪主动脉瓣膜材料上种植人成纤维细胞的方法与效果；材料和方法 采用在脱细胞猪主动脉瓣膜材料上静态与动态种植人成纤维细胞，并对其结果进行比较研究。结果 静态种植不能在猪主动脉瓣叶的两侧形成完整的单层人成纤维细胞融合层；而经过动态种植，在一定条件下可以在猪主动脉瓣叶两侧形成完整的单层人成纤维细胞融合层；结论 动态种植较之静态种植易达到形成完整均匀的细胞种植效果。     

FD-1冷冻干燥机的研制及生物材料的冷冻干燥

观察自制冷冻干燥机冷冻干燥生物材料的效果。采用 R5 0 2压缩机和制冷剂制成 FD- 1冷冻干燥机。本实验冷冻干燥了胶原海绵、菌种及去纤酶。在冻干箱负载或空载情况下蒸发冷凝器温度均可达到 - 4 5℃ ,小冰箱可达到 - 30℃ ,冻干的胶原海绵具有许多孔洞的结构 ,冻干的菌种和去纤酶性能保持良好。 FD- 1冷冻干燥机适用于生物样品中小批量的冷冻干燥     

缺氧性肺动脉高压时一氧化氮合酶、左旋精氨酸及亚硝基左旋精氨酸甲酯的研究

目的研究一氧化氮（ＮＯ）在缺氧性肺动脉高压（ＨＰＨ）发病中的作用。方法用烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸—黄递酶（ＮｉｃｏｔｉｎａｍｉｄｅＡｄｅｎｉｎｅＤｉｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅＰｈｏｓｐｈａｔｅＤｉａｐｈｏｒａｓｅ，ＮＡＤＰＨｄ）和免疫组化ＡＢＣ方法检测原生型和诱生型一氧化氮合酶（ｃＮＯＳ、ｉＮＯＳ）在正常和缺氧大鼠肺内的表达和分布，同时观察左旋精氨酸（Ｌａｒｇ）和亚硝基左旋精氨甲酯（ＬＮＡＭＥ）对正常和缺氧大鼠肺循环的影响。结果ＨＰＨ组，ＮＡＤＰＨｄ阳性反应见于大血管内皮、平滑肌、支气管粘膜上皮及小血管内皮和平滑肌中，而后者在正常时未见阳性反应；ｃＮＯＳ在肺血管内皮和支气管粘膜上皮中的表达明显减弱，甚至消失，而正常时不表达ｉＮＯＳ的肺血管内皮和血管、支气管平滑肌在ＨＰＨ组出现了阳性表达；缺氧时补充Ｌａｒｇ和ＬＮＡＭＥ，与单纯缺氧相比，对右心室肥大和肺血管重建无影响。结论缺氧时ｃＮＯＳ被抑制，可能对ＨＰＨ的形成具有一定的作用；而ｉＮＯＳ的诱导表达，则可能对ＨＰＨ的形成具有阻止作用。     

衰老大鼠急性肺损伤诱导肾功能受损

目的:观察衰老大鼠的急性肺损伤(ALI)是否可进一步诱导肾功能受损。方法:Wistar雄性大鼠40只, 复制成衰老模型, 然后再随机分成对照组(静脉注射生理盐水), ALI组(静脉注射脂多糖, LPS)及LPS组(左心室内注射LPS), 后两组再分2h及6h组。每组8只。注LPS后2h或6h收集血并取肺、肾。制备肺、肾组织匀浆待测。结果:ALI组在注LPS后仅至6h时血中肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)含量才有显著升高(均P＜0.01)。而LPS组Cr、BUN含量均无显著升高。ALI组血中乳酸(LD)、丙二醛(MDA)及一氧化氮(NO)含量在注LPS后2h时均显著升高(P＜0.05, P＜0.01);而肺组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-P_X)及Na⁺-K⁺-ATPase活性均显著下降(均P＜0.01);上述变化持续至观察的6h时。ALI组在注LPS后仅至6h时, 肾组织中MDA、NO含量才有显著升高(均P＜0.01)及GSH-P_X、Na⁺-K⁺-ATPase活性显著下降(P＜0.01)。而在LPS组, 除注LPS后2h时的血中和2h、6h的肺组织中NO含量显著升高(均P＜0.05)及2h时的肺组织中Na⁺-K⁺-ATPase活性显著下降(P＜0.05)外, 其它均无显著变化。结论:给衰老大鼠静脉内注射5mg/kg的LPS可致ALI, 并可进一步诱导肾功能受损。     

Screening of human anti-TNF-alpha scFv from large phage library

AIM: To clone human anti-TNF-alpha scFv from large phage antibody library. METHODS: Panning of large phage library against TNF-alpha was conducted to select specific antibodies. The antigen binding activity and DNA sequence were determined and analyzed by ELISA, restriction enzyme map. RESULTS: After 4 rounds of panning, 62 positive clones were obtained and 27 clones had specific binding ability to TNF-alpha. DNA fingerprinting of the 27 clones showed 7 different stripes indicated 7 different positive clones. 5 of the 7 clones expressed soluble anti-TNF-alpha activity. DNA sequence analysis showed that the variable regions of these scFvs belonged to different subgroups. CONCLUSION: Human TNF-alpha scFv have been successfully obtained from large phage antibody library.