环状RNA circSP3（hsa-circ-0002642）促进肝细胞癌细胞增殖及迁移

目的 探讨环状RNA circSP3（hsa-circ-0002642）在肝细胞癌（HCC）中的表达及其对HCC细胞增殖及迁移的影响。方法 收集重庆医科大学附属第一医院肝胆外科2017年6月至2018年12月收治的42例HCC患者手术切除的癌组织和癌旁组织标本,采用实时定量PCR检测组织中circSP3的表达,分析癌组织中circSP3表达与患者临床病理学指标的关系。培养人HCC细胞系Hep-3B、Huh7、SMMC-7721、Bel-7402及人正常肝细胞系HL-7702,采用实时定量PCR检测细胞中circSP3的表达。使用circSP3过表达及干扰质粒分别转染Hep-3B和Huh7细胞后,采用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）检测细胞增殖情况,Transwell法检测细胞侵袭和迁移能力,蛋白质印迹法检测上皮-间质转化（EMT）相关标志物波形蛋白、E-钙黏蛋白的表达。结果 HCC患者癌组织中circSP3的表达高于癌旁组织（P<0.01）,并且circSP3的表达与HCC肿瘤最大径及TNM分期呈正相关（P均<0.05）。circSP3在4种HCC细胞系中的表达均高于正常肝细胞系（P均<0.01）。circSP3过表达可以促进HCC细胞的增殖、侵袭和迁移（P<0.05、P<0.01）,而干扰circSP3表达则抑制HCC细胞的增殖、侵袭和迁移（P<0.05、P<0.01）。波形蛋白表达在circSP3过表达的HCC细胞中高于对照细胞（P<0.05）,而在干扰circSP3表达的HCC细胞中低于对照细胞（P<0.05）。E-钙黏蛋白表达在circSP3过表达的细胞中低于对照细胞（P<0.01）,而在干扰circSP3表达的HCC细胞中高于对照细胞（P<0.01）。结论 circSP3的异常表达与HCC肿瘤大小及TNM分期呈正相关,有助于评价病情及预后。circSP3能促进HCC细胞的增殖,并且可能通过促进EMT进程进而促进HCC细胞的迁移和侵袭。     

肝X受体负性调控枯否细胞中Toll样受体4通路减轻移植肝脏缺血再灌注损伤

目的探讨肝X受体(LXR)负性调控大鼠枯否细胞(KCs)中Toll样受体4(TLR4)通路对移植肝脏缺血再灌注损伤的影响。方法密度梯度离心法分离培养SD大鼠肝脏KCs,将获得的细胞随机分为脂多糖(LPS)组、LPS+GW3965组、LPS+LXR拮抗剂组。动物实验选用雄性SD大鼠96只,随机分为GW3965预处理组(GW3965 0.3 mg·kg-1于手术前30 min经尾静脉注射处理供体)、生理盐水对照组(给予等体积生理盐水)。两组均采用改进的Kamada两袖套法进行肝移植。Western blot测定各组细胞、移植物中白细胞介素-1受体相关激酶4(IRAK-4)、干扰素调节因子-3(IRF3)蛋白表达,EMSA测定各组细胞NF-κB的相对活性,酶联免疫吸附法检测KCs培养上清液肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素β(IFN-β),于移植肝脏再灌注后3、6、24 h测定血清丙氨酸转氨酶(ALT),光镜观察肝脏组织的形态学变化。结果 IRAK-4和IRF3蛋白表达、NF-κB相对活性、TNF-α和IFN-β水平在LPS+LXR拮抗剂组最高,而在LPS+GW3965组最低(均P<0.05)。GW3965预处理组各时间点组织的IRAK-4和IRF3蛋白表达量以及血清ALT活性明显低于对照组(P<0.05),GW3965预处理组各时间点肝组织的损伤均明显轻于对照组(P<0.05)。结论激活LXRs能负性调控KCs中TLR4信号通路的IRAK-4、IRF3的蛋白表达,抑制NF-κB的活化和炎症因子的释放,可减轻肝移植缺血再灌注损伤。     

奥沙利铂长循环脂质体的制备及其对人结直肠癌SW480细胞活性的影响

目的 观察奥沙利铂长循环脂质体的制备以及对结直肠癌SW480细胞活性的影响.方法 通过逆向旋转蒸发法制备奥沙利铂长循环脂质体,检测脂质体的粒径、电位、包封率及外观形态;分析奥沙利铂长循环脂质体对细胞活性的影响.结果 脂质体粒径、电位分别为(151.56±15.57)nm,(-23.68±2.35)mV;包封率为(42.96±6.45)%;细胞对脂质体的摄入在2 h可观察到,平均荧光强度在2 12、24 h分别为198、443、642;2.60 mmol/L的空载脂质体、28.0 mg/L游离奥沙利铂及2.60 mmol/L的奥沙利铂脂质体(含28.00 mg/L奥沙利铂)分别与细胞作用12 h,细胞的活力分别是(84.73±1.73)%、(70.72±2.66)%和(57.69±3.33)%(F=104.428,P＜0.01),同时细胞集落数量减少.结论 奥沙利铂长循环脂质体具有增强对结直肠癌SW480细胞毒性作用.

Abstract：

Objective To investigate the preparation of oxaliplatin long-circulating liposomes and its effect on activity of human colorecal cancer SW480 cells. Methods The rverse-phase evaporation vesicles (REV) method was used to prepare the oxaliplatin long-circulating liposomes. The particle size, electric potential, entrapment efficiency and face shape were analyzed, and the effects of liposomes on activity of cells were also analyzed. Results The particle size and electric potential were ( 151.56 ± 15. 57 ) nmand ( - 23.68 ± 2. 35) mV resepctively. Entrapment efficiency was (42. 96 ± 6. 45 ) %. At 2 h, the uptake of liposomes by cells was observed. At 2, 12, 24 h, immunofluorescent intensity was 198,443 and642 respectively. After cells were treated with 2. 60 mmol/L blank liposomes, 28.00 mg/L free oxaliplatin and 2. 60 mmol/L liposomal oxaliplatin (containing 28 mg/L oxaliplatin), activity of cells was (84. 73 ±1.73 ) %, (70. 72 ± 2, 66 ) % and (57. 69 ± 3. 33 ) % respectively ( F = 104. 428, P ＜ 0. 01 ). Additionally, the number of cell colonies was reduced. Conclusion Oxaliplatin long-circulating liposomes were successfully prepared, and could enhance cytotoxic effects against colorecal cancer SW480 cells.     

胰头与十二指肠的血供关系及其临床意义

目的　了解胰头及十二指肠的血管走行,为在DPPHR术中如何保护十二指肠的血供及是否行Kocher操作提供更多的形态学资料。 方法　随机选取40具尸体,充分解剖暴露肠系膜上动脉、胃十二指肠动脉及胰十二指肠前后动脉弓,对供应十二指肠的动脉及伴行的静脉行径进行仔细观察和记录。 结果　在97.5%的标本中（n=39）, 胰十二指肠后动脉弓及伴行的静脉均位于胰后筋膜内;在90%的标本中（n=36）, 胰十二指肠下前动脉及伴行的静脉走行于胰十二指肠沟内,易于保留;在个别标本中（10%, n=4）, 没有完整的胰十二指肠前动脉弓;其中1例标本（2.5%,n=1）,没有完整的胰十二指肠后动脉弓,但供应十二指肠的动脉及其伴行静脉仍位于胰后筋膜内。 结论　DPPHR手术的关键在于保留胰十二指肠后动脉弓,同时尽可能地保留部分胰十二指肠前动脉弓,而Kocher操作有利于保护胰十二指肠后动脉弓;在个别标本中,没有完整的胰十二指肠前动脉弓,此时施行DPPHR可能伤及十二指肠血供,导致手术失败。     

探讨绕肝提拉法在原发性肝癌解剖性切肝中的运用

目的探讨在原发性肝癌解剖性切肝中运用绕肝提拉法（liver hanging maneuver,LHM）的优越性。方法收集重庆医科大学附一院肝胆外科2006年9月至2007年12月没有采用LHM的解剖性切肝28例原发性肝癌患者（非LHM组）与2008年1月（即我们开始采用LHM）起至2010年9月运用LHM的解剖性切肝20例原发性肝癌患者（LHM组）的资料作比较,比较两组之间的术前一般情况,手术时间,断肝时间,术中出血量,术中输血量,住院时间和并发症率。结果术前一般情况在两组之间没有显著差异。而术中失血量,输血量,LHM组较非LHM组有减少[（800±600）ml vs（1200±500）ml,P〈0.05];虽然手术时间在两组之间没区别,但断肝时间LHM组比对照组有显著缩短[（25±15）分钟vs（40±25）分钟,P〈0.05];住院时间LHM组较非LHM组缩短[（18±7）日vs（25±15）日,均P〈0.05]。而术后肝功能衰减发生率,并发症率和死亡率两组之间没有区别。结论绕肝提拉法可以缩短原发性肝癌解剖性切肝的断肝时间及住院时间,减少术中失血量。在原发性肝癌解剖性切肝中运用肝脏提拉法有明显的优势。     

小鼠原位肝移植模型建立方法的改良研究

照组48h存活率(分别为95.7%、91.4%)比较无显著性差异(P>0.05),但实验组1周、1个月存活率(分别为92.9%、85.7%)较对照组(分别为81.4%、71.4%)均明显提高(P<0.05).结论 该方法 能有效地缩短供、受体手术时间,提高供肝质量及受体长期存活率,是一种稳定、可靠、有效的小鼠肝移植建模方法.     

介入治疗对胰腺癌乙型肝炎病毒感染患者的疗效分析

目的分析介入治疗对胰腺癌乙型肝炎病毒(HBV)感染患者的疗效,为改善患者的预后提供理论依据。方法选取医院2010年3月-2011年3月86例胰腺癌HBV感染患者,按照随机数字表法分为介入组及手术组,每组各43例,分别使用介入治疗及手术治疗,比较两组患者的临床疗效,并进行两年的随访,观察其6个月、1年及两年生存率,采用SPSS13.0软件对数据进行统计分析。结果治疗总有效率介入组为67.4%、手术组为37.2%,介入组治疗效果显著优于手术组;不良反应发生率介入组为32.6%、手术组为11.6%,介入组不良反应发生率显著高于手术组;治疗后介入组患者sTNFR-Ⅳ、IAP等指标显著低于手术组,差异有统计学意义(P<0.05);6个月、1、2年生存率介入组分别为97.7%、83.7%、34.9%,均显著高于手术组的88.4%、67.4%、16.3%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论介入治疗可有效阻止胰腺癌肿瘤血管营养供给,影响肿瘤的浸润和转移,且能够显著改善患者的自身免疫功能,降低HBV感染带来的胰腺损伤,有利于保证其生存质量,同时,介入治疗较传统化疗具有更高的安全性和局部药物浓度,创伤小、操作简便,是临床治疗中晚期胰腺癌的有效方式。     

肝胆外科研究生术中超声能力的培养

术中超声以其无创、方便、高敏感性及特异性,已成为肝胆外科医师手术中非常重要的辅助检查工具。然而我国肝胆外科医师缺乏应有的术中超声扫描训练,往往依赖于超声科医师,以至于此项技术在术中的作用被弱化。文章通过介绍术中超声在肝胆外科的应用价值,强调培养和提高肝胆外科研究生运用术中超声能力的重要性。     

原位二级脾蒂离断法腹腔镜脾切除术治疗特发性血小板减少性紫癜

目的 探讨原位二级脾蒂离断法腹腔镜脾切除术(laparoscopic spleneetomy,LS)治疗特发性血小板减少性紫癜(idiopathic thrombocytopenia purpura,ITP)的可行性及临床疗效.方法 对41例ITP患者在腹腔镜下采用解剖二级脾蒂的方法,超声刀切开脾蒂浆膜,自下而上沿脾脏逐支分离脾动、静脉的二级分支,Hem-O-lok结扎夹钳夹2道,在两结扎夹之间用超声刀离断,切除脾脏.结果 41例患者均完成LS,无1例中转开腹.手术时间75～180 min,术中出血量50～800 ml.术中发现并切除副脾7例,2例患者术中脾蒂改为Endo-GIA切割离断.住院时间4～9 d,无严重并发症.术后血小板明显上升,5～7 d到达高峰.随访3～20个月,总有效率达到85.4%(35/41).结论 原位二级脾蒂离断法LS治疗ITP)安全有效、创伤小、并发症少、恢复快、手术费用低,值得临床推广.     

NBD多肽与OPG联合抑制聚乙烯磨损颗粒诱导的溶骨效应

目的运用小鼠植骨气囊模型,研究NBD多肽、NBD多肽联合骨保护素(osteoprotegerin,OPG)减少骨破坏吸收防治人工关节松动的效应。方法在小鼠背部注入空气形成气囊,取同源小鼠的颅骨植入气囊内。将已制成的气囊模型的小鼠分成3组:NBD多肽组(气囊内注入聚乙烯颗粒及NBD多肽);联合组(气囊内注入聚乙烯颗粒、NBD多肽及OPG);对照组(气囊注入聚乙烯颗粒及生理盐水)。3周后取囊壁和植入颅骨组织进行HE染色检测炎症反应情况及炎症细胞渗出量;取组织匀浆液应用ELISA方法检测炎性细胞因子(IL-1、TNF)浓度;抗酒石酸酸性磷酸酶染色观察破骨细胞的分化成熟情况;应用扫描电镜检测骨片吸收情况及RT-PCR检测破骨细胞骨吸收相关基因Ⅱ型碳酸酐酶(CA-Ⅱ)mRNA表达水平。结果①HE染色检测炎症细胞渗出量NBD多肽组(870±236)、联合组(820±198)明显少于对照组(3 325±467)(P<0.05)。②ELISA法检测炎性细胞因子(IL-1、TNF)浓度NBD多肽组[(138.34±2.32)、(156.14±4.17)]与联合组[(129.32±4.62)、(148.78±5.36)]均明显低...