18β-甘草次酸抑制肝癌细胞生长的实验研究

目的:探讨18β-甘草次酸(GA)对肝癌细胞生长的影响。方法:用不同浓度的GA或阿霉素(ADM)处理肝癌细胞(Hepa1-6)及正常肝细胞(AML-12)不同时间后,分析细胞的抑制情况及半数抑制浓度(IC_(50));根据IC_(50),选择合适浓度的GA处理Hepa1-6细胞一定时间后,检测细胞的凋亡情况。结果:低浓度GA对两种细胞增殖均无明显影响,当GA浓度8μg/m L时,对两种细胞的增殖均有明显的抑制作用,且抑制作用随药物浓度升高、作用时间延长而增加;ADM所有浓度对两种细胞的增殖均有抑制作用,且抑制作用随浓度升高而增加,但随时间延长而减弱。GA对Hepa1-6细胞的IC_(50)低于对AML-12细胞的IC_(50),当药物作用48 h时,GA对两种细胞的IC_(50)的差值最大,而ADM对Hepa1-6细胞的IC_(50)在任何时间都高于对AML-12细胞的IC_(50);选择25μg/m L的GA处理Hepa1-6细胞48 h(该条件下,Hepa1-6细胞的增殖抑制率为50%,而AML-12细胞的增殖抑制率为3.8%),Hepa1-6细胞的明显增加,且主要是早期凋亡(P0.05)。结论:GA能够抑制肝癌的生长,其机制可能与诱导肝癌细胞凋亡有关;在治疗肝癌方面,GA可能较ADM更为安全,毒副作用更小。     

"二袖套法"制备大鼠原位肝移植模型的方法改进

目的在Kamada "二袖套法"的基础上对大鼠肝移植手术方法进行改进,提高大鼠肝移植模型的稳定性和动物存活率.方法在Kamada"二袖套法"大鼠肝移植基础上对供肝切取、受体手术及术中管理进行改进行大鼠肝移植60例,Kamada"二袖套法"行大鼠肝移植20例.比较两组大鼠肝移植术后并发症的发生率和1周生存率.结果在Kamada"二袖套法"基础上改进的肝移植大鼠并发症发生率较少,1周存活率91.7%,经典Kamada"二袖套法"肝移植大鼠1周存活率70%.结论改进的大鼠原位肝移植术操作简便,手术成功率高,模型稳定性好.     

小切口联合胆道镜保胆取石手术32例体会

对于胆囊结石,手术是外科治疗的主要手段,但切除或保留胆囊也是外科治疗争论的焦点,至今仍未明确定论.近10多年来国内不少学者对于传统的切胆理论提出了怀疑和挑战[1],并且提出了保胆取石的新概念,开展了开腹或腹腔镜下保胆取石的手术临床实践,取得了明显的进展,手术方式亦在不断发展.我院2009年3月至2011年12月采用小切口联合胆道镜行保胆取石手术32例,30例获成功.现报道如下.     

多轴全方位机器人造影系统在内镜治疗胆道结石中的应用价值初探

目的探讨在行内镜逆行胰胆管造影（ERCP）时使用Artiszeego机器人对胆道进行3D旋转采集和三维重建的应用价值。方法对12例B超提示胆道扩张的病例,在行ERCP同时使用Artis zeego机器人进行3D旋转采集,并经工作站处理进行三维胆道重建,以内镜和手术取石结果为最终诊断,观察其对肝内外胆管结石诊断的符合率。结果12例患者均完成3D旋转采集和三维重建检查,其诊断结果与ERCP取石和手术取石结果均相符,诊断符合率100％,其中,ERCP诊断中2例肝外胆管结石数量不明,1例可疑结石及2例疑似肝内胆管结石病例均得到明确诊断。结论使用Artis zeego机器人对胆道进行3D旋转采集和三维重建有助于ERCP诊疗中对胆道病变做出精准判断。     

TRIM28转录激活RMI2对肝癌SK-Hep-1细胞恶性生物学行为的影响

目的:探究RecQ介导的基因组不稳定性(因子)-2 (RMI2)对肝癌(HCC)SK-Hep-1细胞恶性表型的影响。方法:GEPIA数据库检测RMI2、三结构域蛋白28(TRIM28)在HCC组织中的表达,并预测HCC分期、HCC患者总体生存率和无病生存率,以及RMI2与TRIM28表达在HCC组织中的相关性;实时定量PCR(RT-qPCR)和免疫印迹法(Western blot)检测RMI2和TRIM28表达。基于HumanTFDB网站预测RMI2启动子与TRIM28结合位点;荧光素酶报告实验和染色质免疫沉淀法(ChIP)验证RMI2与TRIM28两者的结合关系。采用MTT和EdU染色检测细胞增殖;流式细胞术和TUNEL实验分别检测细胞周期和凋亡;Western blot分析增殖和凋亡相关蛋白表达。结果:HCC组织和细胞系中RMI2和TRIM28表达水平较正常组织和肝上皮细胞增加(P<0.001),且与预后不良相关。敲低RMI2后SK-Hep-1细胞增殖能力降低(P<0.001),导致G0/G1期细胞阻滞(P<0.001),细胞凋亡率增加(P<0.001)。HCC组织中RMI2和TRIM28的表达呈正相关,TRIM28可结合RMI2启动子从而上调其表达(P<0.001)。TRIM28过表达可逆转RMI2敲低对SK-Hep-1细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响(P<0.05)。结论:RMI2受TRIM28转录激活从而调控SK-Hep-1细胞恶性表型。     

腹腔镜开窗引流术治疗单纯性肝囊肿的疗效

目的：分析、总结腹腔镜开窗引流术治疗单纯性肝囊肿的临床疗效。方法：选择自2013年12月－2015年6月我院收治的60例单纯性肝囊肿行腹腔镜开创引流术的患者为此次研究对象,将其分为两组,其中对照组采用传统手术方式治疗,实验组给予腹腔镜开窗引流术治疗,对比其治疗效果及其并发症发生率。结果：实验组患者的手术时间、术中出血量、住院时间、术后并发症均优于对照组。对照组患者术后并发症2例,其中腹水1例,感染1例,占患者总数6．67％,实验组患者术后感染1例,占患者总数3．33％,随访1年,对照组有1例复发（复发囊肿位于肝后部,囊肿直径＜5cm,且无临床症状）,复发率为3．33％;实验组没有患者复发。结论：腹腔镜开窗引流术治疗单纯性肝囊肿,患者创伤小,术中出血量较少,康复时间短,并发症发生率及复发率低。     

雷帕霉素对肝脏缺血—再灌注中线粒体DNA D-Loop区的修复作用

目的 研究大鼠肝脏缺血—再灌注(HIRI)损伤中mtDNA的损伤机制及雷帕霉素对其的修复作用.方法 SD大鼠60只,制作大鼠肝脏缺血—再灌注模型,分为A、B、C、D四组;A组:肝脏缺血30 min处理;B组:缺血50 min处理;C组:缺血50 min并雷帕霉素干预处理;D组:假手术组.分别于术后24 h、3d、5d处死,取部分肝组织进行线粒体DNA D-Loop区进行PCR扩增、测序,与GENBANK参考序列对比查找变异位点.结果 在HIRI中存在DNA D-Loop区突变,其中C组大鼠mtDNA D-Loop区突变率低于B组(P＜0.05).结论 HIRI中mtDNAD-Loop区产生突变,而雷帕霉素可能通过降低线粒体DNA D-Loop区突变率而减轻其氧化损伤,从而对肝脏缺血—再灌注损伤过程产生保护作用.     

基于生物信息学分析KDM1A在肝细胞癌组织中的表达及意义

目的 分析赖氨酸特异性组蛋白去甲基化酶1(KDM1A)在肝细胞癌(HCC)组织中的表达及意义。方法 通过KM-plotter网站分析癌症基因组图谱(TCGA)数据库、高通量基因表达(GEO)数据库收集的HCC组织及肝血管瘤旁正常肝组织中的RNA测序数据,比较KDM1A基因在HCC基因及正常肝组织中的表达及其临床意义;收集贵州省人民医院HCC免疫组织化学石蜡切片60例(分KDM1A高表达40例,低表达20例),正常肝组织20例,检测KDM1A的表达水平,并分析其表达水平与HCC患者临床病理特征间的关系,通过Kaplan-Meier分析KDM1A表达水平与HCC患者的生存关系。结果 GEO、TCGA数据库HCC数据集分析结果显示KDM1A基因在HCC中的表达水平较正常肝组织高(P<0.01);免疫组织化学结果显示KDM1A在HCC组织中的表达水平也高于正常肝组织(P<0.01);KDM1A表达与HCC患者肿瘤最大径、微血管侵犯、TNM分期有关。生物信息学分析结果显示KDM1A基因与HCC患者的生存期相关,KDM1A基因高表达者总生存期(OS)、无复发生存期(RFS)、无进展生存...     

mTORC1信号通路对能量代谢调控作用及其机制

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTORC1）通路是细胞内最主要的能量感受器,能感受营养和激素、与能量需求相关的多个细胞功能的调节相关的上游调节信号。调节下游信号从而影响不同的细胞代谢,从蛋白质和脂质合成到线粒体活性等不同方面调节细胞代谢。作为对细胞代谢过程的调节,mTORC1的活性在外周激活有利于脂肪细胞活化,脂肪生成,葡萄糖摄取和β细胞数量的增加。本文综述了现有的知识对mTORC1的作用在能量平衡和能量代谢的调节,特别是旨在提供有关mTORC1在功能细胞中心能够整合不同激素的作用的背景下的研究进展进行了综述。     

胆囊巨大结石颈部嵌顿并急性胆囊炎行LC的临床体会

[摘 要] 目的 总结胆囊巨大结石颈部嵌顿并急性胆囊炎行腹腔镜胆囊切除术（LC）的临床经验。方法 回顾性分析2014年1月至2016年10月贵州省人民医院肝胆外科住院行LC的胆囊巨大结石颈部嵌顿并急性胆囊炎患者50 例临床资料。结果 50例患者均成功完成LC,无中转开腹病例,术后均无出血、胆漏等并发症发生,无死亡病例。患者于术后第1天进食低脂饮食并下床活动,第3天拔除腹腔引流管办理出院。术后随访,所有患者均无残石、腹痛、延迟性腹腔出血、胆漏和黄疸等并发症。结论 胆囊巨大结石颈部嵌顿并急性胆囊炎行LC是安全、可行的。