表没食子儿茶素没食子酸酯对结肠癌细胞株抑制作用的体外研究

目的探讨绿茶提取物表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对结肠癌细胞株(LoVo细胞、SW480细胞、HT29细胞、HCT-8细胞)增殖的抑制作用及对细胞凋亡和细胞周期的影响,研究其对结肠癌的抑癌机制。方法体外培养结肠癌细胞株,采用不同浓度的EGCG(10,20,35μg/ml)对其进行干预,MTT法检测EGCG对结肠癌细胞株增殖的抑制作用;用流式细胞仪检测EGCG对结肠癌细胞株凋亡和细胞周期的影响。结果 MTT法检测EGCG对结肠癌细胞株的抑制作用均具有浓度依赖性,且HT29细胞株尚具有时间依赖性。流式细胞仪检测EGCG能增强结肠癌细胞株的凋亡率,且剂量与凋亡率呈正相关。EGCG能将SW480细胞和LoVo细胞细胞周期阻滞在G0/G1期,阻碍其向S期转换,将HCT-8细胞阻滞在G2/M期,阻碍其向M期转换,将HT29细胞阻滞在S期,阻碍其向G2期转换,抑制结肠癌细胞株的增殖。结论EGCG对体外培养的结肠癌细胞株的增殖有明显抑制作用,其作用机制与增强细胞凋亡和影响细胞周期有关,具体作用机制有待进一步研究。     

周宜轩辨治高血压病的数据挖掘分析

目的：挖掘与总结周宜轩教授临床辨治高血压病的诊疗规律及学术思想。方法选取2012年12月－2013年12月周教授诊治的原发性高血压病患者149例,208诊次,将其初诊数据录入数据库,进行名词标准化,对其临床证候、治法、方药进行统计分析。结果149例高血压病患者,按照证候出现频次排序,由高到低依次为痰湿中阻证、气虚血瘀证、气阴两虚证、肝阳上亢证、肝肾阴虚证等。方剂多为参苓白术散、补阳还五汤、生脉散、天麻钩藤饮、六味地黄丸等加减。用药频次排序,由高到低依次为炙黄芪、佛手、川芎、丹参、当归、山萸肉、白芍、赤芍、炒白术、酸枣仁、枳壳、薏苡仁、党参、合欢皮、水蛭。结论高血压病是本虚标实证,临床以气虚、气阴两虚、肝肾阴虚为本,肝阳上亢、瘀血、痰浊为标。周教授善于用益气、养阴、理气、化痰、活血、安神法治疗高血压病,体现了周教授的学术思想。     

穴位注射配合超短波治疗椎-基底动脉缺血性眩晕疗效观察

目的观察穴位注射配合超短波治疗椎-基底动脉缺血性眩晕的临床疗效。方法将80例椎-基底动脉缺血性眩晕患者随机分为两组,治疗组予穴位注射配合超短波治疗,对照组予常规药物治疗;比较两组治疗后主要症状积分、血液流变性、椎-基底动脉血流速度的改善情况。结果治疗组主要症状改善优于对照组,其血黏度、椎-基底动脉血流速度改善亦优于对照组。结论穴位注射配合超短波治疗椎-基底动脉缺血性眩晕有较好的疗效。     

欣胃颗粒对胃癌前病变大鼠胃黏膜关键因子NF-κB、COX-2表达的影响

目的:探讨欣胃颗粒对胃癌前病变(PLGC)大鼠胃黏膜NF-κB、COX-2表达的影响。方法:将健康的雄性Wistar大鼠120只根据体质量编号,按随机数字表法将Wistar大鼠随机分为4组。除空白组外,其他3组均自由饮用N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG),采用标准的饲料雷尼替丁喂养,热盐水灌胃,同时配合饥饱失常的复合造模法进行造模。至16周结束,随机抽取模型组大鼠4只做胃黏膜病理组织学检查,确认模型成功后全部停止造模及干预药物。模型制备成功后随即处死所有大鼠,剖腹取胃,应用免疫组织化学法、Western Blot法检测胃黏膜组织中NF-κB,COX-2基因和蛋白的表达情况。结果:模型组胃黏膜NF-κB,COX-2的表达较其他各组显著升高,欣胃颗粒可降低NF-κB,COX-2基因和蛋白的表达。结论:欣胃颗粒可通过下调PLGC大鼠模型胃组织NF-κB、COX-2基因和蛋白的表达,从而促进胃黏膜上皮细胞凋亡与抗细胞增殖。     

新型冠状病毒肺炎药物预防、诊断、治疗与出院管理临床指南计划书

本计划书为《新型冠状病毒(2019-nCoV)感染的肺炎诊疗快速建议指南(标准版)》更新版的研究方案。计划书涵盖指南制定方法学、指南的目标用户、指南的目标人群、利益冲突调查与声明、临床问题和结局指标的遴选与确定、证据的检索、合成与评价、证据与推荐意见分级标准、推荐意见的形成、指南的更新,并附录指南临床问题清单、文献检索策略及利益冲突调查表。     

穴位贴敷联合推拿治疗小儿上气道咳嗽综合征的临床随机对照观察

目的 观察穴位贴敷联合推拿治疗小儿上气道咳嗽综合征的临床疗效。 方法 将70例上气道咳嗽综合征患儿随机分为对照组和治疗组,每组35 例。对照组予以手法治疗;治疗组手法与对照组相同,在推拿的基础上行穴位贴敷。两组治疗每天1次,5次为1疗程,共治疗1个疗程。 结果 治疗组和对照组总有效率分别为94.2%和85.7%,差异无统计学意义(χ2=4.769, P=0.029),治疗组和对照组愈显率分别为54.2%和28.6%,差异具有统计学意义(χ2=1.429, P=0.232)。 结论 推拿及穴位贴敷联合推拿治疗小儿上气道咳嗽综合征均具有良好的效果,结合使用疗效更佳。     

阿奇霉素与生脉注射液合用致豚鼠心律失常作用及其机制

目的研究阿奇霉素合用生脉注射液潜在的致心律失常风险及其机制。方法 (1)豚鼠在体实验:1倍临床剂量的阿奇霉素(38.2 mg·kg~(-1))或生脉注射液(4.6 m L·kg~(-1))颈外静脉缓慢推注;或1倍临床剂量阿奇霉素缓慢推注5 min后加生脉注射液缓慢推注。记录给药前后的心电图。(2)豚鼠离体实验:离体心脏按1,5和10倍临床浓度,即阿奇霉素41.5→207.5→415 mg·L~(-1)顺序灌流,或生脉注射液5→25→50 m L·L~(-1)顺序灌流;或阿奇霉素+生脉注射液(均1倍临床浓度)灌流。上一浓度组灌流结束后随后灌流下一浓度组,每组灌流持续5 min,分别记录各组给药5 min后的心电图。(3)细胞实验,酶解法分离制备豚鼠单个左心室肌细胞,按1倍临床浓度阿奇霉素(41.5 mg·L~(-1))→阿奇霉素+生脉注射液(均1倍临床浓度)顺序灌流,每组灌流持续5 min,分别记录各组给药5 min后的动作电位、L型Ca~(2+)及Na+电流。结果 (1)在体实验:心电图显示,1倍临床剂量阿奇霉素或生脉注射液均未能引起心电图明显改变,而阿奇霉素合用生脉注射液(均1倍临床剂量)显著降低心率(P<0.05),延长P-R(P<0.05)及QRS(P<0.05)间期。(2)离体实验:心电图显示,1,5和10倍临床浓度阿奇霉素浓度依赖性降低心率(P<0.05),延长P-R(P<0.05)及QRS(P<0.05)间期,5倍临床浓度还能显著延长QTc间期(P<0.05),洗脱能部分逆转上述变化。1,5和10倍临床浓度生脉注射液浓度依赖性地降低心率(P<0.05),延长P-R(P<0.05)间期,对QRS及QTc间期无明显作用,洗脱能部分恢复上述变化。而阿奇霉素合用生脉注射液(均1倍临床浓度)显著降低心率(P<0.05),延长P-R(P<0.05)及QRS(P<0.05)间期。(3)细胞实验:1倍临床浓度阿奇霉素对豚鼠单个左心室肌细胞动作电位幅值及复极50%(APD_(50))及90%(APD_(90))时程无明显作用。而阿奇霉素合用生脉注射液(均1倍临床浓度)显著降低动作电位幅值(P<0.05),缩短APD_(50)(P<0.05)及APD_(90)(P<0.05)。同样,阿奇霉素1倍临床浓度对L型Ca~(2+)及Na~+电流无明显抑制作用,阿奇霉素合用生脉注射液(均1倍临床浓度)显著抑制L型Ca~(2+)(P<0.05)及Na+(P<0.05)电流。结论阿奇霉素或生脉注射液在临床上使用存在一定心律失常的风险,两者合用其风险进一步加大。抑制L型Ca~(2+)及Na+电流是两者合用导致心律失常的作用机制之一。     

IL-12-CAR-T细胞诱发细胞因子释放综合征小鼠模型的建立及观察

目的：通过构建表达IL-12的小鼠CAR-T细胞,探讨经尾静脉将其输注于小鼠体内建立细胞因子释放综合征（CRS模型的方法。方法：构建基于靶向鼠源CD19的CAR分子,包装逆转录病毒载体并感染小鼠T细胞构建mCD19-CAR-T、mCD19/IL-12-CAR-T细胞。通过构建小鼠体内胰腺癌Panc02-CD19细胞移植瘤模型,检测mCD19/IL-12-CAR-T细胞的抗肿瘤活性,ELISA法检测两种CAR-T细胞IL-12和IFN-γ分泌水平;经小鼠尾静脉输注mCD19/IL-12-CAR-T细胞构建CAR-T细胞CRS小鼠模型,流式细胞术检测小鼠血清中IL-6、MCP-1、IL-1、IL-10、TNF-α、IFN-γ等细胞因子的含量,H-E染色法观察荷瘤小鼠肝、脾、肺和肾的病理组织学变化。结果：经过培养扩增的mCD19/IL-12-CAR-T细胞能有效分泌IL-12,CAR阳性率达（56.9±5.4）%;与非靶细胞Panc02或靶细胞Panc02-CD19共培养时,均能高分泌IFN-γ。成功构建小鼠胰腺癌Panc02-CD19细胞移植瘤模型,经小鼠尾静脉注射1×106个mCD19/...     

基于“初病湿热在经，久则瘀热入络”探讨风湿性多肌痛的证治

风湿性多肌痛以颈部、肩部及髋部肌肉疼痛和僵硬为主要临床表现,随着疾病进展常可合并血管病变,继而出现动脉炎性表现。风湿性多肌痛可归属于中医学“肌痹”范畴,若辨证准确,于早期干预疗效较好。根据本病的发病特点可从“初病湿热在经,久则瘀热入络”认识其病机的演变规律。风湿性多肌痛的发病责之于内外合邪,外感邪气为标、湿热内蕴为本,总因卫分之邪郁闭肌表,郁热不解渐传营血而成瘀热入络之证。针对本病及其变证,可进行分期论治,急性期外透内清,以祛邪为主;缓解期和解表里,以缓图收功;变证期以象之谓,凉血化瘀为务;此外,因其具有迁延性、反复性和难治性的特点,贵在效不更方,有方有守,持之以恒。     

四妙散加味联合针灸对膝关节滑膜炎患者炎症因子、疼痛介质及关节功能的影响

目的:观察四妙散加味联合针灸治疗膝关节滑膜炎患者的临床疗效。方法:158例膝关节滑膜炎患者按照随机数字表法随机平均分为观察组与对照组。对照组给予患膝关节腔内注射玻璃酸钠+曲安奈德+口服塞来昔布+针灸治疗,观察组给予四妙散加味+针灸治疗。所有患者均治疗4周。比较两组患者临床疗效,治疗前后患膝关节液内肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin 1 beta,IL-1β)、IL-6水平,血清中前列腺素(prostaglandin E_2,PGE_2)、NO、5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)水平,Lysholm膝关节评分系统(Lysholm knee score,LKSS)评分,膝关节麦克马斯特大学骨关节炎指数(the Western Ontario and McMaster university,WOMAC)各项评分及不良反应发生情况。结果:观察组有效率为93.7%(74/79),明显高于对照组[82.3%(65/79),P<0.05]。治疗后两组患膝关节液内各项炎性因子(TNF-α、IL-1β、IL-6)水平和血清中各项疼痛介质(PGE_2、NO、5-HT)水平均显著低于治疗前(P<0.05),LKSS评分显著升高(P<0.05);且观察组改善显著优于对照组(P<0.05)。与对照组比较,治疗2周、4周和治疗结束后4周,观察组膝关节WOMAC各项评分均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组不良反应率[3.8%(3/79)]与对照组[1.3%(1/79)]比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:四妙散加味联合针灸治疗膝关节滑膜炎疗效显著,可明显缓解患者症状,下调患膝关节液内炎症因子水平,降低外周血中疼痛介质水平,促进膝关节功能恢复,且无明显不良反应。