血清内皮素-1作为早期放射性肺损伤标志物的探讨

目的:探讨内皮素-1(ET-1)作为一种早期放射性肺损伤诊断及病情变化的血清学标志物的可能性。方法:将190只雌性SD大鼠随机分为正常对照组(C组)和实验组,即:放射组(R组)、氟代他汀(Flu)干预组(Flu组)、维甲酸干预组(Ra组)及地塞米松(Dex)干预组(Dex组)。实验组大鼠麻醉固定后,用直线加速器全胸照射15Gy1次,剂量率为2Gy/min,距离为1m。从照射后次日开始,Flu组经胃灌服Flu(20mg·kg-1·d-1),Ra组灌服Ra(20mg·kg-1·d-1),Dex组灌服Dex(3.33mg·kg-1·d-1),C及R组均灌服等量的生理盐水。各组分别于照射后5、15、30、60d,将大鼠分批断头或经心内穿刺取血,分离血清;同时切取肺组织,用放射测定法(RIA)分别测定ET1,层黏连蛋白(LN)及透明质酸(HA)的水平;同时观察肺部的病理变化。结果:与C组相比较,R组大鼠血清ET-1的水平于照射后第5天开始升高(P<0.05),尔后随着放射性肺损伤的加重逐渐升高,于照射后60d检测达高峰。R组大鼠血清LN的水平于照射后30d开始升高,HA于照射后60d开始升高。R组大鼠血清ET-1水平的升高明显早于其他各组,且同放射性肺损伤的病理变化的程度相关。结论:血清ET-1可作为放射性肺损伤早期诊断及动态监测病情变化的一种标志物。     

山药主治糖尿病15例

近年笔者以山药为主治疗了15例糖尿病，均获满意疗效现总结如下：     

新生大鼠海马神经元原代培养方法的研究

目的 :研究和比较 3种不同培养神经元的方法 ,提供一种纯化效率和存活率均较高的培养技术。方法 :取新生SD大鼠的海马区 ,应用一般培养法、加阿糖胞苷法、加阿糖胞苷和神经生长因子法培养神经元 ,观察神经元的形态。用倒置显微镜观察和MTT比色分析检测神经元的存活率。用ABC免疫组化染色法 ,比较 3种不同培养方法在不同培养时间所获得神经元的纯度。结果 :加阿糖胞苷和神经生长因子培养组神经元生长良好 ,纯度和存活率均较高。结论 :加阿糖胞苷和神经生长因子培养神经元的方法具有简便可行 ,易于生长的优点 ,可作为神经元体外培养的良好模型     

蛋白转导域介导BCR/ABL抗原对CML患者T细胞的活化作用

目的：研究蛋白转导域(PTD)介导的BCR／ABL抗原对慢性髓细胞白血病(CML)患者T细胞的特异性活化作用。方法：利用基因工程技术，将PTD基因与CML b3a2 bcr／abl基因融合并原核表达。将纯化的PTD—BCR／ABL融合蛋白与CML患者外周血单个核细胞(PBMC)体外共孵育，用流式细胞仪分别检测CD4^ 、CD8^ T细胞上活化抗原CD25的表达。结果：终浓度为100mg／L的PTD—BCR／ABL抗原体外刺激4d后，10例CML患者中，5例表现为CD8^ T细胞活化，2例表现为CD4^ T细胞活化，其中有1例CD8^ 和CD4^ T细胞同时活化；而作为对照的BCR／ABL抗原刺激组无一例表现为CD8^ 或CD4^ T细胞活化。结论：PTD能将外源性BCR／ABL抗原转导入抗原呈递细胞内，加工呈递后激活抗原特异性CD8^ 及CD4^ T细胞，为CML特异性CD8^ 、CD4^ T细胞的体外活化及细胞免疫治疗开辟一条新的途径。     

兔BK通道β亚基多克隆抗血清的制备

目的:用小鼠制备抗兔BK通道β亚基的抗血清。方法:采用RT-PCR扩增编码兔BK通道β亚基胞内段的基因。在大肠杆菌中表达GST-β亚基融合蛋白。以从PAGE凝胶上切下的融合蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗血清。用ELISA和Westernblot鉴定抗血清的特异性。结果:用RT-PCR扩增出约300bp的兔BK通道基因。序列分析显示,扩增的序列与已发布的新西兰大白兔骨骼肌BK通道的序列完全一致。在E.coliDH5α成功地表达Mr约为37000GST-β亚基融合蛋白。ELISA和Westernblot检测证明,针对GST-β亚基融合蛋白的抗血清,不仅可特异性地识别GST-β,也可识别源于兔组织的β蛋白。抗血清的最高滴度达1∶128000。结论:克隆了编码兔BK通道β亚基胞内段的基因,并成功地获得可特异性识别新西兰大白兔BK通道β亚基的高滴度抗血清,为BK通道的进一步研究提供了物质基础。     

微柱凝胶法检测疾病对ABO血型抗原的影响及血清学特性分析

目的：探讨疾病对ABO血型抗原性的影响及其血清学特性分析。方法：应用微柱凝胶法、单克隆抗体血型分型试剂和RBC试剂，对100例患者和30例献血员的RBC（检测抗原）和血清（检测抗体）进行正反定型，测定血型抗原性和抗体效价。对血型抗原性极度减弱导致血型鉴定困难的患者血液，进行吸收放散、血型物质测定、不规则抗体筛选和抗球蛋白试验。结果：100例患者中血型抗原性减弱者占24％，其中自血病患者占40％（12／30），恶性肿瘤患者占36．67％（11／30），其他疾病患者占2．50％（1／40）。抗原性减弱在ABO血型中的分布：A型为40．48（17／42），B型为16．67％（5／30），O型为7．14％（2／28）；献血员血型抗原性减弱者为3．33％（1／30）。100例患者中血清血型抗体效价降低者2％，献血员血清血型抗体效价降低者为0％。结论：白血病和恶性肿瘤对血型抗原性的影响较其他疾病大，患者ABO血型抗原性减弱正定型时容易导致血型误判，但其血清中仍存在着规则的抗A或抗B抗体，唾液中含有血型物质，应用微柱凝胶法进行正反定型，同时进行吸收放散试验和血型物质的测定，能提高血型检测的准确性.     

细菌脂多糖诱导小鼠DC2.4细胞TLR7蛋白的表达

目的:探讨细菌脂多糖(LPS)对小鼠树突状细胞(DC)系DC2.4 TLR7蛋白表达的诱导作用.方法:用RPMIl640完全培养液培养DC2.4细胞,光学显微镜观察LPS刺激前后的细胞形态特征,RT-PCR和Western blot分别测定TLR7 mRNA和蛋白表达.结果:LPS刺激前后,细胞中均有TLR7 mRNA转录.LPS刺激前,细胞较小而透亮,树突较少,无,TLR7蛋白表达;LPS刺激后,细胞体积增大,树突增粗增多,刺激后12 h、24 h、48 h,TLR7蛋白均有表达,且在3个时间点的表达量基本一致.结论:LPS可诱导DC2.4中TLR7蛋白的表达.     

细胞因子佐剂对HIV DNA疫苗免疫效果的影响

根据联合国艾滋病规划署(UNAIDS)资料，在艾滋病流行的20年里，全世界已有6000万人感染了人类获得性免疫缺陷病毒(HIV)，其中1／3已因艾滋病或HIV感染相关疾病而死亡。尽管目前公认疗效较好的高效抗逆转录病毒治疗(HAART)在抗HIV感染中取得一定效果，但由于药物昂贵和HIV耐药株的产生影响了艾滋病治疗，限制了其在发展中国家使用。因此，最终将需要一种有效的疫苗来控制HIV感染的流行及传播。近年来，不少学者研究了多种类型的HIV疫苗，其中最引人关注的是HIV—1 DNA疫苗(核酸疫苗)。     

超声引导L3-L4胸腰筋膜中层注射治疗腰椎手术后疼痛综合征的疗效分析

目的 探讨超声引导L3-L4胸腰筋膜中层注射治疗腰椎手术后疼痛综合征(failed back surgery syndrome,FBSS)的疗效分析.方法 选择2018年8月～2020年8月本院收治的100例FBSS患者,采用随机数字表法分为两组:对照组给予超声引导脊神经后内侧支注射治疗,观察组采用超声引导L3-L4胸腰筋膜中层注射治疗.比较两组患者治疗前、治疗后1 h、3个月时的VAS评分以及Oswestry功能障碍指数(Oswestry disability index,ODI),治疗后3个月时采用MacNab疗效标准评估综合疗效.结果 两组治疗后1 h、3个月时的ODI指数以及VAS评分较治疗前均显著降低(P<0.05),且观察组治疗后1 h、3个月时的两项指标评分均显著低于对照组(P<0.05);治疗后3个月时,观察组的优良率显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 相较于传统脊神经后内侧支注射,超声引导L3-L4胸腰筋膜中层注射在缓解腰部疼痛及功能障碍方面效果更佳,有望成为FBSS注射治疗的新靶点.