ATAD2对人胶质瘤细胞系转移及上皮间质转换的影响

目的探讨三磷酸腺苷酶家族蛋白2(ATAD2)对人胶质瘤细胞的影响。方法用real-time PCR及Western blot检测ATAD2在人胶质瘤细胞系U87MG、U251和正常人星形胶质细胞的表达。U87MG和U251分为对照组(control)、脂质体对照组(mock)、ATAD2 siRNA(转染特异性siRNA)和ATAD2 overexpression(过表达ATAD2)4组,MTT法、Transwell实验观察细胞增殖和侵袭迁移。Western blot检测上皮间质转换标志蛋白上皮钙黏素、神经钙黏素和波形蛋白的表达。结果 U87MG和U251细胞ATAD2高表达。与对照相比,ATAD2 siRNA抑制U87MG和U251细胞增殖、侵袭、迁移、神经钙黏素及波形蛋白表达,促进上皮钙黏素表达(P0.05);ATAD2 overexpression促进细胞增殖、侵袭、迁移、神经钙黏素和波形蛋白表达,降低上皮钙黏素表达(P0.05)。结论 ATAD2可能通过调节上皮间充质转换进程参与人胶质瘤细胞转移。     

微柱凝胶法交叉配血试验及其影响因素的探讨

目的:探讨微柱凝胶法(MGT)用于交叉配血试验及其影响因素。方法:应用MGT法和试管生理盐水法,对1200例受血者和供血者的血标本进行交叉配血试验,对MGT法交叉配血试验阳性的标本,再用试管法间接抗人球蛋白试验做血型不规则抗体筛选和交叉配血试验,以便进行对照比较。结果:在1200例血标本中,MGT法交叉配血试验阴性者1173例(97.8%),阳性27例(2.3%)。在27例阳性标本中,由血型不规则抗体引起凝集者2例(7.4%),由非血型因素引起的非特异性凝集者25例(92.6%)。结论:应用MGT法进行交叉配血试验,能及时检出血型抗原抗体引起的特异性凝集反应和非血型因素引起的非特异性假凝集反应;而盐水法则不能检出上述真假凝集反应,因此不能有效地防止免疫性溶血性和非溶血性输血反应的发生。     

PBL教学法在外科手术学基础教学中的应用

PBL(problem-based learning)教学理念认为问题是学习的起点,也是选择知识的依据,因此教学过程中应先问题,后内容,整个教学过程中学生才是教学的主体,教师90％的时间退居幕后[1].它的教学目标是围绕问题来编织综合课程,以教师为引导,问题为中心,学生为主体.整个教学过程是以"提出问题一讨论解疑—重点讲授总结归纳"为主体.为了提高教学效果,使学生更好地掌握理论知识,我们尝试采用PBL教学法,并和传统教学做了一个比较研究,现报告如下.     

转录因子EGR—1及其抑癌作用的研究进展

EGR 1是一具有 3个锌指结构的转录因子。其基因Egr 1的转录和表达受多种因素调控。EGR 1能与许多基因的启动子区类似或相同于SP1和WT1的DNA序列结合 ,与WT1或SP1竞争或协同调控目的基因的转录。Egr 1在多种恶性肿瘤细胞中转录及表达减低或缺失 ,这是由于这些细胞缺乏转录和表达潜力。外源高表达EGR 1能抑制一些肿瘤的生长和恶性表型 ,其作用与下调bcl 2及激活TGFβ1 ,FN ,p2 1和FAK的表达有关。故认为该基因是一具基因治疗价值的Ⅱ类抑癌基因。Egr 1基因启动子的放射可诱导性也被用于一些肿瘤的治疗研究。     

原癌基因产物Ras及c-erbB2在着床前小鼠胚胎中的表达

目的　观察小鼠着床前的胚胎细胞中原癌基因ras编码的蛋白产物 p2 1Ras及c erbB2的表达 ,并了解其对着床前的胚胎发育的可能作用。方法　采用免疫组织化学ABC法 ,检测着床前小鼠胚胎中p2 1Ras及c erbB2蛋白的表达。结果　小鼠着床前的胚胎细胞中 p2 1Ras的免疫反应呈阳性 ,阳性物质分布于胞质中 ,胚胎外透明带呈阴性反应 ;而在各期着床前的胚胎中均未检测到c erbB2蛋白的表达。结论　小鼠着床前的胚胎中 ,有原癌基因ras编码蛋白的表达 ,p2 1Ras是增殖和分化受体介导的信号传导途径中的重要组成部分 ,可能在小鼠着床前的胚胎发育过程中起重要的调节作用。C erbB2基因对于围着床期子宫的生长发育具有重要的作用 ;而在小鼠着床前的胚胎发育过程中似乎不起重要作用     

IL-21在不同乙型肝炎病毒感染者外周血CD4~+T细胞中表达的初步研究

目的:探讨乙肝病毒感染不同临床表现患者外周血CD4+T细胞中IL-21表达的差异及其在发病机制中的作用。方法:分离乙肝病毒感染不同临床表现患者及健康人外周血单个核细胞(PBMC),使用PMA+ionomycin进行刺激,同时每份标本未加PMA+ionomycin刺激做阴性对照,流式细胞术(FCM)检测IL-21的表达情况及其与Th17细胞亚群的关系。结果:PMA+ionomycin刺激能够诱导IL-21的产生,产生IL-21的主要为CD4+T细胞,IL-17A+IL-21+CD4+T细胞几乎检测不到,IL-21+CD4+T细胞比例在急性乙型肝炎组、乙肝病毒携带组中较正常对照组和慢重肝组有所升高,Th17细胞亚群比例在各组中没有统计学差异;除急性乙型肝炎组外,其余各组中IL-21+CD4+T细胞比例与Th17细胞亚群比例均有较好的相关性。结论:IL-21在HBV感染不同临床表现患者外周血CD4+T的表达有一定差异,并且其与Th17细胞亚群有相关性,提示IL-21在HBV感染的发病机制可能发挥一定作用。     

不同结构形式的HBX蛋白对其在肝细胞癌HepG2中分布的影响

目的:本研究选用不同的真核表达载体,分别克隆并构建了包含HBX基因或其与GFP以不同方式融合表达的重组质粒,探究不同结构的HBX蛋白对其在细胞内定位的影响.方法:以本实验室构建好的pcDNA3.0-HBX质粒为摸板,采用PCR方法扩增Flag-HBX,克隆至pMD-18T载体中,测序正确后,分别亚克隆至不同载体,构建重组质粒pFlag-HBX-IRES2-EGFP,pEGFP-C3-Flag-HBX,pFIag-HBX-EGFP-N3,鉴定正确后瞬时转染肝癌HepG2细胞,通过间接免疫荧光染色显示HBX蛋白的细胞内定位和分布.结果:成功构建出三种Flag-HBX的真核莺组质粒;不同重组质粒转染HepG2细胞后,间接免疫荧光显示与GFP不同融合形式的HBX蛋白在细胞内存在不同的分布特征.结论:为研究HBX在肝癌发生发展中的作用提供了有意义的实验依据,尤其是对体外细胞转染结果的解释提供了借鉴.     

成年阻塞性睡眠呼吸暂停患者多导睡眠图及临床特征分析性差异

目的:分析成年男性阻塞性睡眠呼吸暂停(OSA)患者多导睡眠图及临床特征,明确年龄对OSA严重程度的影响。方法:回顾性研究包括836名成年男性OSA患者,按年龄分为三组:青年组312人(平均年龄37.07岁),中年组359人(平均年龄52.14岁),老年组165人(平均年龄69.43岁)。分析其多导睡眠图和临床特征,并进行相关性分析。结果:中年组和老年组呼吸暂停低通气指数(AHI)、阻塞性呼吸暂停指数(OAI)、AHI-NREM和AHI-REM均无显著统计学意义(P>0.05),但均低于青年组(P<0.01);中年组和老年组的最低血氧饱和度(SaO2)均高于青年组;中枢性呼吸暂停指数(CAI)随年龄增长而升高(P<0.05)。在睡眠结构方面,老年组总睡眠时间、非快速眼动(NREM)睡眠时间和快速眼动期(REM)睡眠时间均缩短,睡眠效率亦低于青年组(P<0.01),但睡眠潜伏期和入睡后觉醒时间(WASO)明显延长(P<0.01)。年龄与以下各项均呈现显著的相关性:AHI(P<0.01),OAI(P<0.01),CAI(P<0.01),最低SaO2(P<0.01)。多重回归分析表明年龄作为独立变量分别与AHI,OAI,CAI具有相关性。结论:在成年OSA患者中,年龄与OSA严重程度具有显著的相关性,表现为OSA随年龄增长而降低。本研究为研究年龄与OSA严重程度的关系提供了新的证据。     

抗人球蛋白试验阳性及其临床意义的探讨

目的:观察抗人球蛋白试验(AGT)的临床应用及对自身免疫性溶血性贫血(AIHA)的诊断价值。方法:采用微柱凝胶法和传统试管法,对368例临床表现疑似为AIHA、风湿免疫性疾病及新生儿溶血病患者的血标本进行AGT。结果:在368例患者血标本中AGT阳性209例(56.8%),其中直接抗人球蛋白试验(DAT)阳性187例(89.5%),间接抗人球蛋白试验(IAT)阳性12例(6.4%,DAT和IAT均阳性10例(5.3%)。AGT阳性的类型分布为IgG+C3型118例(63.1%),IgG型45例(24.1%),C3型24例(12.8%)。12例IAT阳性经抗体特异性鉴定为抗D 2例(16.7%),抗E 5例(41.7%),抗C 1例(8.3%),抗Ec 2例(16.7%),抗e 3例(25.0%)。10例DAT和IAT均阳性者为新生儿溶血病引起的免疫性抗体。结论:AGT能较敏感地检出吸附在红细胞膜上的IgG和补体C3等免疫性抗体,对AIHA的诊断有重要临床意义。但AGT存在一定的假阳性和假阴性,应同时做阴阳性对照才能确保试验结果的准确性。     

微囊化SD大鼠周围神经组织移植促进周围神经再生的实验研究

目的采用微囊化组织研究技术,研究微囊化神经组织移植对周围神经再生的影响.方法将12只SD大鼠随机分为实验组和空白组.切断SD大鼠左侧坐骨神经并行显微缝合,实验组8只,加入制备好的微囊化同种异体周围神经颗粒无血清培养液30?μl,约含微囊颗粒300个;空白组4只,加入不含微囊颗粒的无血清培养液30?μl.术后4周取材做组织形态学检查.结果实验组周围神经再生明显优于空白组.结论微囊化周围神经移植有促进周围神经再生的作用.