ADAR1 mRNA在肝癌及癌旁组织的表达及意义

目的探讨ADAR1mRNA在肝细胞肝癌(HCC)及癌旁组织的表达及意义。方法采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测诊断为HCC41例患者的肝癌及癌旁组织RNA编辑酶ADAR1mRNA的表达。结果所有肝癌组织RNA编辑酶ADAR1均有表达,相对表达量为3.340±0.863;所有癌旁组织有RNA编辑酶ADAR1表达,相对表达量为0.801±0.209;对照的26例正常肝组织及其他肝脏疾病标本RNA编辑酶ADAR1的相对表达量为0.880±0.226。将肝癌组织和癌旁组织的ADAR1mRNA表达量进行成组t检验,两者间存在显著性差异(t=18.30,P<0.001);肝癌组织和对照肝组织的ADAR1mRNA表达量进行成组t检验,两者间亦存在显著性差异(t=17.65,P<0.001);将癌旁组织和对照肝组织检测到的ADAR1mRNA的表达量进行成组t检验,两者间差异无统计学意义(t=1.64,P>0.10)。将从同一患者取材的肝癌组织和癌旁组织的ADAR1mRNA表达量进行配对t检验,两者间存在显著性差异(t=18.53,P<0.001)。结论ADAR1mRNA在肝癌组织的表达增高,可能在肝癌的发生机制中起一定的作用。     

NT-3对腺样囊性癌细胞系ACC-M体外粘附能力的影响

目的:研究NT-3对涎腺腺样囊性癌细胞系ACC-M体外粘附能力的影响。方法:应用MTT比色法测定不同浓度NT-3对ACC-M细胞在重构基底膜Matrigel上的粘附率。结果:ACC-M细胞与2.5,5,10ng/ml浓度的NT-3共培养30min、90min和6h后的粘附率均明显比同期内未加NT-3组高;而与浓度为500ng/ml的NT-3共培养6h后的粘附率却明显降低。结论:NT-3对ACC-M细胞系体外粘附能力的影响存在浓度依赖性。一定浓度的NT-3能够促进ACC-M细胞系的体外粘附能力。     

V806M突变型Axin基因真核表达载体的构建及其在神经胶质细胞瘤内的表达

目的构建V806M突变型Axin基因真核表达载体pIRES2-EGFP-MT-Axin(V806M),并稳定表达于大鼠神经胶质瘤细胞系C6。方法用分子克隆技术,构建真核表达载体pIRES2-EGFP-MT-Axin(V806M),经NheⅠ和SmaⅠ双酶切鉴定后,用脂质体法稳定转染神经胶质瘤细胞C6。结果构建了真核表达载体pIRES2-EGFP-MT-Axin(V806M),稳定转染后,经荧光显微镜和免疫细胞化学染色法检测,可见细胞内有EGFP及Axin的表达。结论成功构建真核表达载体pIRES2-EGFP-MT-Axin(V806M),并在神经胶质瘤细胞C6中表达,为研究此种突变体Axin是否影响细胞的生物学行为以及是否参与胶质瘤的发生发展奠定了实验基础。     

对药品广告现状的几点思考

药品广告是广告的一种具体形式,在繁荣医药经济、指导百姓安全合理用药方面发挥了积极作用。但近年来药品广告违规、违法刊登、刊播现象十分严重,严重扰乱了药品广告的市场秩序,给公众的正常用药造成了严重误导,成为影响公众身体健康和生命安全的一大隐患,同时成为社会关注的一个焦点和难点问题。为了营造全社会安全合理用药氛围,有必要对药品广告加强监督管理,防止药物滥用,促进安全用药、合理用药。1药品广告的现状2005年12月21日,国家食品药品监管局发布了9月至10月违法药品广告监测情况,在此期间,全国食品药品监管系统共依法通报批评并…     

生理学教学中加强学生素质教育的探索

深化生理学教学改革，实现医学素质的全面提高势在必行。本文探索了生理学教学中对学生进行能力培养的实践。在教学中，重视培养学生的观察能力、思维能力、记忆能力，同时加强创造力开发，强调学生自学能力。实践证明，这样有利于提高学生学习兴趣，培养综合素质。     

桉油β-环糊精包合物的制备工艺研究

目的优选β-环糊精包合桉油的最佳工艺。方法采取L9(34)正交实验,以包合物得率及包合率两个指标,综合考察β-CD与油、β-CD与水的比例、包合温度、搅拌时间四因素对β-环糊精包合桉油工艺的影响。结果优选出工艺为A3D1C1B1,即环糊精∶桉油为8∶1,环糊精∶水为1∶10,包合时间为1 h,包合温度为40℃。结论包合方法工艺简单,方便实用,达到了改变桉油剂型的目的。     

染料木黄酮对人卵巢癌裸鼠移植瘤影响的实验研究

目的:探讨植物雌激素染料木黄酮对人卵巢癌HO-8910PM细胞裸鼠移植瘤的影响。方法:体外培养人卵巢癌HO-8910PM细胞,裸鼠皮下接种HO-8910PM细胞建立裸鼠移植瘤动物模型,随机分为对照组和3个染料木黄酮治疗组,治疗组分别给予5,25,50 mg.kg^-1染料木黄酮。治疗4周后,应用流式细胞术(FCM)检测各组裸鼠移植瘤细胞周期时相和凋亡率,免疫组化技术检测凋亡基因bcl-2,Fas,FasL蛋白的表达情况,并通过电镜进行形态学观察。结果:50 mg.kg^-1染料木黄酮治疗组裸鼠移植瘤明显小于对照组,肿瘤细胞G₀-G_l期比例升高明显,S期细胞比例显著降低(P<0.01),移植瘤细胞凋亡率为(15.14±2.27)%,明显高于对照组(3.12±1.12)%(P<0.01);移植瘤细胞bc1-2蛋白表达水平明显下降,而Fas蛋白表达水平升高,与对照组比较,均有显著性差异(P<0.05)。电镜观察50 mg.kg^-1染料木黄酮治疗组可见凋亡细胞明显增多。结论:染料木黄酮通过调节移植瘤细胞周期分布和凋亡基因,抑制卵巢癌细胞增殖,诱导细胞凋亡。     

正交试验优选桉油β-环糊精的包合工艺

目的:优选β-环糊精包合桉油的最佳工艺。方法:采取L9(34)正交试验,以包合物得率及包合率两个指标,综合考察β-CD与油、β-CD与水的比例、包合温度、搅拌时间四因素对β-环糊精包合桉油的工艺影响。结果:优选出工艺为A3D1C1B1,即环糊精:桉油为8∶1,环糊精∶水为1∶10,包合时间为1 h,包合温度为30℃。结论:包合方法工艺简单,方便实用,达到了改变桉油剂型的目的。     

Survivin基因RNA干涉对HeLa宫颈癌细胞凋亡及顺铂敏感性的影响

背景与目的:Survivin基因是凋亡抑制因子家族的新成员,它在人类多种恶性肿瘤,包括宫颈癌中均高表达,其表达下调可提高恶性肿瘤的化疗敏感性。本研究观察了survivin基因RNA干涉对宫颈癌细胞HeLa凋亡及顺铂敏感性的影响。方法:通过脂质体介导将含人survivin基因siRNA的重组真核表达质粒pS ilencer2.1-s2转染宫颈癌细胞系HeLa,G418筛选阳性克隆,半定量PCR、W estern b lot分别检测survivin mRNA和蛋白表达,激酶活性检测法测定半胱氨蛋白水解酶-3(caspase-3)活性变化,流式细胞仪、Hoechst染色观察细胞凋亡情况,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活率并计算顺铂的50%抑制浓度(IC50)。结果:G418筛选24天后出现阳性克隆,与转染阴性对照质粒(HeLa-NC)、空载质粒(HeLa-U6 neo)及未转染(HeLa)细胞比较,转染pS ilencer2.1-s2质粒者survivin mRNA和蛋白表达明显下降,表达抑制率分别为:62.8%和60.1%;caspase-3激酶活性增强,A405达1.26±0.04;细胞凋亡率明显升高,为(29.2±1.4)%(P<0.05);在同一药物浓度下,细胞存活率明显下降,顺铂的IC50值降低为0.87±0.02ug/m l(P<0.05)。结论:Survivin基因RNA干涉可通过阻抑HeLa细胞中survivin表达,增强caspase-3激酶活性,诱导细胞凋亡并显著提高宫颈癌细胞对顺铂的敏感性。     

siRNA抑制HER2/neu过表达肺腺癌细胞生长和增殖

背景与目的：30％NSCLC存在HER2／neu过表达，与肿瘤发生、转移、肿瘤血管形成、抗凋亡及化疗耐药等有关。本文通过RNA干涉抑制肺腺癌细胞SPC—A-1 HER2／neu过表达，观察肿瘤细胞周期、增殖及集落形成能力的变化。方法：构建针对HER2／neu的siRNA重组质粒，稳定转染SPC—A-1，通过RT—PCR和Western Blot检测HER2／neu表达；FCM分析细胞周期；MTT法观察细胞增殖，绘制细胞生长曲线；平板集落形成实验检测肿瘤细胞的集落形成能力。结果：成功构建了HER2／neu的siRNA重组质粒，稳定转染靶细胞后可显著降低HER2／neu表达；与亲代细胞相比，G0／G1期细胞增加17．1％，S期细胞减少12．8％；细胞生长速度减慢，集落S1抑制率达到49．0％。结论：针对HER2／neu的siRNA可以显著降低肺腺癌细胞过表达HER2／neu，肿瘤细胞阻滞于G0／G1期，造成细胞增殖减慢，集落形成能力明显下降。因此，siRNA对过表达HER2／neu肺癌的治疗具有潜在应用价值。