C57bl/6小鼠OVA哮喘模型的建立与评价

目的：本实验旨在利用无鸡蛋卵清蛋白（ovalbumin,OVA）诱导建立C57bl/6小鼠的哮喘模型,并用地塞米松对该模型小鼠进行治疗,用以评价模型是否建立成功。方法：将36只３代以上脱敏饮食的6周龄雌性C57bl/6小鼠随机分为对照组、哮喘组、地塞米松治疗组。哮喘组小鼠在第0、14天分别腹腔注射0.2 mL致敏液[20 μg OVA,100 μL生理盐水,100 μL Al（OH）3]致敏,在第21~27天用1.5% OVA溶液雾化,对照组小鼠在同样时间给予同剂量的生理盐水,治疗组在第25~27天雾化前0.5 h腹腔注射5 mg/kg地塞米松溶液0.2 mL。于末次雾化后24 h内对每组6只小鼠进行有创肺功能检测气道阻力,其余6只进行支气管肺泡灌洗观察气道炎症情况,HE染色观察肺部病理改变,PAS糖原染色观察气道黏液分泌情况,ELISA检测血清IgE以及肺泡灌洗液中IL-4含量。结果：哮喘组小鼠气道阻力值在激发浓度为25 mg/mL时较对照组（F=26.53０,P=0.000）明显升高,在激发浓度为50 mg/mL时较对照组（F=18.690,P=0.000）明显升高,支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）细胞计数细胞总数哮喘组较对照组（F=1.349,P=0.000）和治疗组（F=1.461,P=0.006）有明显增多,嗜酸性粒细胞分类计数哮喘组较对照组（F=7.000,P=0.013）和治疗组相比也有增多,但差异无统计学意义（F=1.000,P=0.056）,肺部病理和气道黏液分泌情况哮喘组与对照组相比均较严重,哮喘组血清中IgE含量与对照组相比有统计学差异（F=15.10,P=0.036）和治疗组相比有所增加,但差异无统计学意义（F=2.680,P=0.083）,哮喘组肺泡灌洗液中IL-4含量均较对照组（F=7.953,P=0.000）和治疗组（F=4.413,P=0.008）明显增加。结论：本实验成功确立了构建C57bl/6小鼠哮喘稳定模型的方法。     

2016年重庆医科大学附属儿童医院副流感病毒感染流行病学特点及临床特征

目的：分析2016年1月至2016年12月重庆医科大学附属儿童医院住院患儿人副流感病毒（human parainfluenza,HPIV）流行病学特点及临床特征。方法：选择全院住院患儿中应用呼吸道免疫荧光法检测HPIV抗原的病例进行分析;纳入HPIV为唯一病原并排除不符合标准的病例后共131例,分析其临床特征。结果：19 632例痰标本中有1 573例HPIV抗原阳性（8.01%）,其中HPIV3 1 369例（6.97%）,HPIV1 184例（0.94%）,HPIV2 20例（0.10%）;男1 002例（8.21%）,女571例（7.69%）（χ2=1.660,P=0.203）;春、夏、秋、冬四季感染率分别占11.32%、13.21%、5.27%、3.35%,且两两比较差异均有统计学意义（χ2=448.253,P=0.000）;婴儿组1 065例（8.80%）,幼儿组406例（9.97%）（χ2=5.054,P=0.025）;以HPIV为唯一病原感染者所患疾病：支气管肺炎92例,支气管炎17例,百日咳综合征16例,毛细支气管炎11例。结论：①HPIV是2016年重庆医科大学附属儿童医院住院患儿下呼吸道感染常见病毒,以HPIV3感染多见。②男女比较差异无统计学意义,春夏为好发季节,婴幼儿多发。③以HPIV为唯一病原感染的患儿居前4位的呼吸道疾病依次为支气管肺炎、支气管炎、百日咳综合征、毛细支气管炎。多数患儿经对症治疗后明显好转。     

诱导型一氧化氮合酶基因多态性与川崎病并发冠状动脉病变易感性研究

目的：探讨诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）基因多态性与川崎病（Kawasaki disease,KD）并发冠状动脉病变（coronary artery lesion,CAL）的相关性。方法：将本院收治的146例KD患儿作为 KD组,同期健康体检儿童119例作为健康对照组。KD组中合并CAL（CAL组）79例,未合并CAL（none coronary artery lesion,NCAL组）67例。利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法检测 iNOS基因-1026C/A和+2087G/A 2个单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphisms,SNP）位点基因型。应用酶联免疫吸附实验（ELISA）双抗体夹心法检测血浆iNOS水平,硝酸还原法检测血浆NO水平。比较各组间血浆iNOS、NO表达水平,分析2个SNP位点多态性与KD并发CAL相关性。结果：健康对照组血浆iNOS水平（48.02±31.46） U/L明显低于NCAL组（81.46±41.32） U/L和CAL组（90.29±47.68） U/L（P=0.000、0.000）。血浆NO水平组间比较差异无统计学意义（F=3.003,P=0.052）,iNOS 基因+2087G/A位点 A等位基因及 GA+AA基因型频率在CAL组明显低于NCAL组（P=0.010、0.013）,与 G等位基因及 GG基因型相比,A等位基因及GA+AA基因型均能显著降低KD并发CAL发生风险[OR（95%CI）= 0.41（0.21-0.82）,0.42（0.19-0.92）;P=0.010,0.029]。-1026C/A与+2087G/A 2位点构建的-1026C/+2087A单倍型频率分布在CAL组与NCAL组间差异有统计学意义（P=0.010）,-1026C/+2087A 单倍型携带者发生 KD并发CAL的风险显著降低[OR（95%CI）=0.45（0.22-0.91）,P=0.030]。结论：血浆iNOS水平在KD及其CAL的发生过程中可能起一定作用。iNOS基因+2087G/A多态性和-1026C/+2087A单倍型与KD并发CAL密切相关,其中+2087A等位基因可能为减少KD并发CAL发生风险的保护基因,其作用机制可能通过降低血浆iNOS水平,减少NO产量实现。     

奥曲肽联合加贝酯治疗重症急性胰腺炎临床疗效的初步探讨

目的：初步探讨奥曲肽联合加贝酯治疗重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis,SAP）的临床疗效。方法：将2008年10月到2010年10月我院收治的ＳＡＰ46例患者随机分为A、B ２组,每组23例;A组：奥曲肽联合加贝酯治疗,B组：奥曲肽治疗。观察２组患者腹部体征消失、胃肠道功能恢复正常时间,2组总有效率和并发症发生率。结果：A组腹部体征消失、胃肠道功能恢复正常时间均低于B组（P<0.05）,A组总有效率高于B组,但差异无统计学意义（P >0.05）,并发症发生率、手术率A组（13.04%）低于B组（30.43%）。结论：奥曲肽联合加贝酯治疗ＳＡＰ临床疗效较好,可提高总有效率和降低并发症发生率。     

血液净化治疗在148例急危重症患儿中的应用及护理

目的：探讨不同的血液净化模式在治疗婴幼儿急危重症中的应用,总结护理经验和体会,为儿科临床工作提供借鉴。方法：对2009年1月-2011年12月在我院儿童血液净化中心接受血液净化治疗的148例患儿的临床资料进行回顾性分析,包括患儿的原发疾病种类、血液净化模式、临床疗效、相关并发症的治疗和护理等。结果：本组148例患儿共进行血液净化336次,死亡5例,2例为先天性心脏病术后并发肾功能不全,2例为脓毒血症并发感染性休克、炎症反应导致多器官功能衰竭,1例为流行性脑脊髓膜炎并发肾功能不全,死亡原因与血液净化无直接关系;其余患儿均痊愈出院。结论：血液净化模式的选择、参数的设置、管路的良好护理、抗凝剂的合理使用及必要的管路预充等是儿童血液净化技术的重要组成部分,该项技术的开展和推广,有利于提高婴幼儿危急重症的治疗水平。     

新生儿坏死性小肠结肠炎并发败血症临床分析

目的：了解新生儿坏死性小肠结肠炎（neonatal necrotizing enterocolitis,NEC）并发败血症的发病率、相关高危因素及病原菌。方法：对2000年7月至2013年2月在我院确诊的277例新生儿NEC患儿的临床资料进行回顾性统计,对并发败血症群体和其血/腹腔液培养结果进行分析总结。结果：我院新生儿NEC并发败血症的发病率为28.5%（79/277）。79例患儿中,平均胎龄（36.62±3.26）周,早产儿32例（40.5%）,早产儿的发生率更高（P=0.049）;平均出生体质量（2 551.06±737.90） g;平均发病日龄（10.30±12.18） d,早产儿平均发病日龄（12.90±16.23） d,胎龄越小,发病时间越晚;母亲围产期因素以感染性疾病史、胎膜早破及羊水异常居多;临床表现以腹胀、呕吐、少吃少哭少动和高胆红素血症为主;其他主要合并或并发症为肺炎、肠穿孔和腹膜炎;血液分析符合临床诊断标准72例（91.1%）;治愈19例（24.1%）,好转28例（35.4%）,放弃23例（29.1%）,死亡9例（11.4%）。临床分期以Ⅲ期为主（49例,62.2%）。培养结果：72份标本共分离病原菌13种38株,血培养阳性率46.9%,腹腔液培养阳性率66.7%,主要有肺炎克雷伯菌（29.1%）和大肠埃希菌（29.1%）。结论：Ⅱ期以上NEC易并发败血症,病原菌以肠杆菌科为主。确诊NEC时,应常规做血培养,重视厌氧菌培养,并定期监测实验室指标,注意监控疾病发展,以便能切断或减少肠源性败血症发生的机会。     

外周血细胞计数及其比值预测百日咳患者疾病严重程度的分析

目的 ：评估外周血细胞计数[白细胞（white blood cell,WBC）、淋巴细胞绝对值、血小板（platelet,PLT）]及其相关比率,即中性粒细胞/淋巴细胞比率（neutrophil to lymphocyte ratio,NLR）、淋巴细胞与单核细胞比（lymphocyte to monocyte ratio,LMR）、血小板与淋巴细胞比率（platelet to lymphocyte ratio,PLR）、血小板计数与平均血小板体积（platelet count to mean platelet volume ratio,PLT/MPV）在预测百日咳患者合并呼吸道感染严重程度的价值。方法 ：回顾性分析1 129例百日咳患者资料,分组对比外周血WBC、PLT、NLR、PLR、LMR、PLT/MPV差异。结果：共1 129例患者纳入研究。重症肺炎组分别与3个非重症肺炎组（上呼吸道感染组、支气管炎组、肺炎组）WBC计数水平有统计学差异（P=0.000、0.041、0.000）,重症肺炎组WBC计数水平明显高于非重症肺炎的3组患者,WBC计数越高,越容易发生重症肺炎,提示外周血...     

肌肉超声回声联合血浆炎性因子对ICUAW诊断及预后评估的价值研究

目的 探讨重症监护病房（intensive care unit,ICU）获得性肌无力（ICU acquired weakness,ICUAW）患者肌肉超声回声与血浆炎性因子的相关性,以及其对ICUAW的诊断价值和预后的预测价值。方法 选择重庆市急救医疗中心ICU住院患者,分别在第1、3、7天使用床旁超声检测患者肌肉回声,获得的总体肌肉回声评分（global muscle echogenicity score,GEM）,测定血清白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）和降钙素原（procalcitonin,PCT）浓度,采用医学研究理事会肌力评分法（medical research council scales,MRC-ss）评估肌肉力量。根据患者入ICU第7天MRC-ss评分将患者分为ICUAW组和非ICUAW组,分析比较2组患者GEM、IL-6、PCT的差异及各指标的相关性。利用受试者工作特征（receiver operator characteristic,ROC）曲线分析以上参数对ICUAW诊断效能,分析GEM、IL-6、PCT对ICUAW患者的预测预后价值。结果 ICUAW组第3天GEM、第7天IL-6浓度、GEM高于非ICUAW组（P<0.05）。GEM与第7天IL-6水平呈正相关（r=0.221）,第7天GEM与MRC-ss评分呈负相关（r=-0.581）。ROC曲线分析显示,第7天GEM对ICUAW有诊断预测价值,ROC曲线下面积（area under the curve,AUC）为0.838,使用GEM、IL-6、PCT联合诊断,AUC=0.885（P<0.05）。ICUAW组Barthel指数评分（Barthel index,BI）低于非ICUAW组,ICUAW组中总体肌肉超声回声评分（global muscle echogenicity score,GEM）高的患者BI低于GEM低的患者（P<0.05）。结论 ICU住院患者GEM与IL-6、PCT浓度相关,其对ICUAW具有一定的诊断价值,并能够预测ICUAW患者的预后。     

ERRα对hiPSCs衍生心肌细胞ATP合成的调控作用

目的探讨雌激素受体α(ERRα)在人诱导多能干细胞衍生心肌细胞(hiPSC-CMs)中对腺苷三磷酸(ATP)合成的调控作用。方法采用时序性短暂激活/抑制Wnt信号通路的方法诱导未分化人诱导多能干细胞(hiPSCs)分化为心肌细胞。使用免疫荧光法分别检测hiPSCs中多能性标志物性别决定区Y框蛋白2(SOX2)、阶段特异性胚胎抗原4(SSEA4)及肿瘤抗性抗原1-60(TRA-1-60),以及hiPSC-CMs中心肌特异性标志物心肌肌钙蛋白T(cTnT)、缝隙连接蛋白43(Cx43)的表达情况;RT-qPCR检测hiPSCs及hiPSCs-CMs中心肌肌钙蛋白T2(TNNT2)、肌球蛋白重链6(MYH6)mRNA的表达水平;Western blotting检测ERRα、细胞色素C(CytC)及线粒体丙酮酸载体1(MPC1)的蛋白表达水平。此外,用ERRα特异性抑制剂XCT790处理hiPSC-CMs后,采用Western blotting检测ERRα、CytC与MPC1蛋白表达的变化,试剂盒检测hiPSC-CMs的细胞活力、胞内ATP含量及线粒体膜电位的改变。结果免疫荧光检测显示,hiP...     

医务人员职业暴露风险与防护探讨

目的探讨医务人员职业暴露风险与防护措施。方法通过对193名医务人员随机进行问卷调查,包括是否发生过职业暴露及发生职业暴露后的处理;被患者血液、体液污染情况;自我防护情况等。结果医务人员发生过职业暴露者146名（75．6％）;62名（32．1％）医务人员发生职业暴露后没有进行有效的局部紧急处理,27名（14．0％）医务人员对被血液、体液污染持无所谓态度,96名（49．7％）医务人员不了解标准预防的内容,能做到I级防护的只占7．8％。结论医务人员发生职业暴露的概率较高,普遍缺乏对职业暴露风险的认识,对标准预防的内容不够了解。