Ⅳ型胶原表达与喉癌颈淋巴结转移关系的探讨

目的研究基底膜主要成分Ⅳ型胶原在喉癌中的表达与颈淋巴结转移之间的关系.方法应用S-P免疫组织化学法检测69例声门上型喉癌Ⅳ型胶原的表达.结果喉癌Ⅳ型胶原完整表达率为39.1%(27/69),在颈淋巴结转移组中为21.2%(7/33),在无颈淋巴结转移组中为55.6%(20/36),差异有显著性(P<0.01).Ⅳ型胶原不完整与颈淋巴结转移相关,具有一致性.结论Ⅳ型胶原表达与喉癌颈淋巴结转移呈负相关;Ⅳ型胶原有限制喉癌颈淋巴结转移的作用.     

铁超负荷与脂肪肝

肝脏不仅是脂肪酸代谢的重要场所,而且也是调节体内整个脂肪酸供应的中心,任何影响肝细胞代谢的因素均可影响这一调节,导致脂肪酸代谢紊乱,继而发生脂肪肝、肝纤维化、甚至发生肝硬化。影响肝脏对脂肪酸代谢的因素有很多,其机制也非常复杂,但氧应激和脂质过氧化损伤似乎占据着非常重要的地位。1氧应激与脂质过氧化氧是维持生物机体活性的一种必需元素,但是分子氧在氧化代谢过程中形成的中间产物———活性氧,如:超氧阴离子自由基(O2-)、羟基自由基(·OH)、过氧化氢(H2O2)、单线态氧(1O2)等,以及在体内参与各种自由基形成过程的一些非自由…     

酒精性肝病的治疗

酒精性肝病(ALD)包括酒精性脂肪肝(AFL)，酒精性肝炎(AH)，酒精性肝纤维化(AF)，酒精性肝硬化(AC)以及轻症酒精性肝病(AML)。ALD的治疗，根据不同病理类型有所不同，但总的治疗原则大致相似，具体治疗方法包括：戒酒、支持治疗、药物治疗、肝移植术、戒酒综合征的治疗和Zieve综合征的治疗。     

肿瘤坏死因子-β抗肿瘤及作用机制的研究

目的 :探讨肿瘤坏死因子 -β(tu mornecrosisfactor β ,TNF β)对 3种人癌细胞的增殖抑制作用及其细胞分子机制。方法 :采用多种体外及体内实验方法 ,从多侧面证实TNF β的抗肿瘤作用。并采用细胞内游离钙浓度测定、12 5I cAMP放免检测法检测cAMP含量。结果 :不同浓度TNF β对肿瘤细胞系均有增殖抑制作用 ,且呈剂量依赖性。当TNF β与顺铂和多柔比星合用 ,JF3 0 5细胞死亡百分比分别达到 ( 68 6±9 0 ) %和 ( 76 5± 7 9) %。TNF β实验组细胞内cAMP浓度明显增加 ,JF3 0 5细胞由( 0 0 5 72± 0 0 176)上升到 ( 0 2 896±0 0 784) pmol/10 6个细胞。此外细胞内钙浓度上升并且凋亡。结论 :TNF β具有体内、外抗肿瘤作用 ,其部分机制是通过增加cAMP含量及诱导细胞凋亡     

WT1基因对肾胚瘤细胞系G401细胞肿瘤逆转的研究

目的 肾胚瘤是一种较常见的儿科实体肿瘤，该肿瘤的发生与抑癌基因WT1密切相关。本研究的目的是利用脂质体介导转染法将WT1cDNA导入G401细胞，研究WT1基因对G401细胞生长凋亡及致瘤性的作用。方法 通过Western blot检测WT1基因在肾胚瘤中的表达、采用碘化丙锭(PI)染色法检测G401细胞的凋亡情况、并且对G401的致瘤性进行分析，探讨WT1基因在肾胚瘤发生及治疗中的作用。结果 WT1 DNA可诱导G401细胞凋亡，并且使其致瘤性有所降低。结论 该结果为确定WT1在肾胚瘤病因方面的作用、为肾胚瘤的基因治疗提供重要的依据。     

子宫内膜癌中p27蛋白与肿瘤相关抗原SC3A的表达及临床意义

目的探讨抑癌基因p27蛋白与肿瘤相关抗原SC 3A在子宫内膜癌中的表达及临床意义。方法应用免疫组化S-P法检测66例子宫内膜癌中p27、SC 3A的蛋白表达。结果p27与SC 3A在66例子宫内膜癌中的阳性表达率分别为53.0%和81.8%,与子宫内膜非典型增生及正常增生期子宫内膜对照组比较差异有显著性(P<0.05)。p27蛋白的阳性表达率与子宫内膜癌的组织分级、临床分期呈负相关(P<0.05),而与子宫内膜癌的肌层浸润、淋巴结转移无明显相关性(P>0.05)。SC 3A的阳性表达率与组织分级、临床分期、肌层浸润及淋巴结转移无明显相关性(P>0.05)。结论同时检测p27、SC 3A对提高子宫内膜癌的检出率及判断预后有重要的指导意义。     

卵巢癌组织中KLK9基因的表达及其临床意义

目的:探讨KLK9基因mRNA及其蛋白在卵巢癌组织中的表达及其临床意义。方法:采用半定量RT-PCR和免疫组化SP法检测55例卵巢癌组织KLK9mR-NA及蛋白的表达。结果:KLK9蛋白表达位于细胞质,KLK9mRNA及其蛋白表达水平与临床分期有关;早期卵巢癌(Ⅰ、Ⅱ期)KLK9mRNA及蛋白表达水平明显高于晚期(Ⅲ、Ⅳ期),χ2值分别为7·33及8·69,P值分别为0·006及0·0032。但KLK9mRNA及其蛋白表达水平与病理分级及组织学类型无关。结论:KLK9基因表达可能与卵巢癌的恶性度有关,可作为一项检测卵巢癌预后的指标。     

十字饱碱逆转耐药性KB细胞多药抗药性的机制

目的:研究蛋白激酶C抑制剂十字饱碱(staurosporine,ST)逆转耐长春新碱KB细胞(简称KB/VCR)的机制。方法:用MTT法比较ST作用前后KB/VCR细胞耐药性的改变,用流式细胞术观察KB/VCR药物代谢的变化,用RTPCR法和免疫组织化学方法研究耐药膜糖蛋白(Pglycoprotein,Pgp)、耐药相关蛋白(multidrugresistanceassociatedprotein,MRP)和肺耐药蛋白(lungcancerresistancerelatedprotein,LRP)在细胞mRNA水平和蛋白水平上的表达。结果:1ng/mLST使KB/VCR细胞耐药性下降了158倍。亲本株KB/S细胞几乎不表达Pgp,而KB/VCR细胞却近100%强表达Pgp,P=0.004;ST使KB/VCR细胞的Pgp表达强度明显降低,但阳性率未见明显改变。MRP在两种细胞的基因转录水平和蛋白水平均呈现弱表达,ST也不影响其表达。1ng/mLST作用24h后,KB/S和KB/VCR细胞的LRP在mRNA水平及蛋白水平上表达指数均明显地高出用药前,P=0.006。结论:ST可通过降低Pgp表达强度和药物外排功能来逆转肿瘤细胞的多药抗药性,但这种作用可部分地被LRP蛋白表达增强所抵消。     

5氮杂胞苷诱导NB细胞Caspase 8表达及对TRAIL敏感性的研究

目的探讨5氮杂胞苷(5-Azacytidine)对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand,TRAIL)诱导神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)细胞株SH-SY5Y凋亡的影响及其发生机制.方法应用RT-PCR方法检测5氮杂胞苷作用前后SY5Y细胞Caspase 8的表达;应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法及流式细胞仪(FCM)检测TRAIL、5氮杂胞苷+TRAIL、5氮杂胞苷+Caspase 8抑制剂+TRAIL对SY5Y细胞生长及凋亡的影响.结果SY5Y细胞不表达Caspase 8,5氮杂胞苷作用1、3和5d的SY5Y细胞Caspase 8表达逐渐增加;SY5Y细胞对TRAIL不敏感,经5氮杂胞苷诱导表达Caspase 8的 SY5Y 细胞对TRAIL敏感,并呈现一定的时间和剂量依赖性.联合用药组细胞凋亡率分别为(28.6±4.0)%、(38.5±4.2)%和(42.3±6.2)%,与单独用TRAIL组[(9.5±2.0)%、(10.7±1.8)%和(11.2±1.5)%]比较,差异有统计学意义,F值分别为41.131、45.014和49.405,P值均为0.000;Caspase 8抑制剂组细胞凋亡率分别为(11.8±2.0)%、(13.5±2.9)%和(15.1±3.4)%,与相应浓度的5氮杂胞苷+TRAIL组相比,细胞凋亡率明显降低,F值分别为41.131、45.014和49.405,P值均为0.000,说明Caspase 8抑制剂可明显降低TRAIL对表达Caspase 8的SY5Y细胞的杀伤作用.结论5氮杂胞苷能增强SY5Y细胞对TRAIL的敏感性,其发生机制可能与Caspase 8表达上调有关.     

紫杉醇诱导黑色素瘤A375细胞凋亡的分子机制

目的:探索紫杉醇对A375细胞的诱导凋亡作用及其机制。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测紫杉醇对细胞增殖能力及细胞生长的影响;流式细胞仪分析及细胞形态学观察检测细胞周期和细胞凋亡;Westernblot方法检测bcl2、Bax和Caspase3蛋白表达。结果:0.001～1.000μmol/L紫杉醇以时间和剂量依赖方式抑制A375细胞生长和诱导细胞凋亡,0.000～1.000μmol/L紫杉醇作用24h时,早期细胞凋亡率由(0.5±0.1)%增至(32.4±1.1)%,P<0.05,0.100μmol/L紫杉醇作用24和48h时,早期细胞凋亡率由(20.9±0.9)%增至(52.6±1.0)%,t=28.89,P=0.001;不同浓度紫杉醇诱导A375细胞凋亡的机制不同,0.001μmol/L时不影响细胞周期,0.010μmol/L时使G0/G1期细胞含量明显减少,0.100和1.000μmol/L时使细胞发生G2/M期阻滞。紫杉醇作用24h后,Caspase3被激活,同时bcl2和Bax蛋白表达分别被下调和上调。结论:紫杉醇可诱导A375细胞凋亡,bcl2/Bax蛋白比值的下降及Caspase3的激活参与了该细胞凋亡过程,但高浓度紫杉醇通过作用微管,低浓度紫杉醇则通过尚不清楚途径实现细胞凋亡过程。