钛板表面壳聚糖-金纳米粒子/整合素β6复合物涂层的制备与性能分析

目的    在粗糙纯钛板表面制备壳聚糖-金纳米粒子/整合素β6复合物（Ch-AuNPs/ITGB6）涂层，研究Ch-AuNPs/ITGB6对细胞成骨分化和抗炎能力的影响。方法    氧化还原法制备Ch-AuNPs，分别加入等质量ITGB6质粒（pLV-ITGB6）和空白质粒（pLV-cs2.0），在粗糙纯钛板表面分别形成Ch-AuNPs/ITGB6涂层和Ch-AuNPs/pLV涂层。应用动态光散射法（DLS）、电泳光散射法（ELS）检测Ch-AuNPs的湿态性质，通过透射电子显微镜（TEM）及扫描电子显微镜（SEM）观察涂层形态，使用能量色散X射线光谱（EDX）分析涂层性质。将具有Ch-AuNPs/ITGB6及Ch-AuNPs/pLV涂层的钛板分别与成骨细胞前体细胞（MC3T3-E1）共培养48 h，记为Ch-AuNPs/ITGB6组和Ch-AuNPs/pLV组。应用Western Blot检测两组骨桥蛋白（OPN）、骨钙素（OCN）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及白介素-6（IL-6）的蛋白表达水平。结果    Ch-AuNPs湿态直径大多为50 ~ 120 nm、分布均匀（多扩散系数PDI = 0.544），携带弱正电荷（zeta电位主要位于0 ~ 10 mV），可与ITGB6质粒形成Ch-AuNPs/ITGB6包被于钛板表面。与Ch-AuNPs/pLV组相比，Ch-AuNPs/ITGB6组可提高细胞OCN、OPN的蛋白表达水平，降低TNF-α、IL-6的蛋白表达水平。结论    Ch-AuNPs/ITGB6可成功包被于钛板表面，且能够促进MC3T3-E1中成骨分化蛋白的表达，降低炎症因子的表达水平，为种植体表面生物修饰提供新思路。     

转录因子YY1对口腔鳞癌细胞ITGB6基因表达的影响

 目的：研究肿瘤相关转录因子YY1 对口腔鳞癌细胞整合素β6（integrin β6, ITGB6）基因表达调控的影响。方法：用生物信息学方法预测分布在ITGB6启动子区域的转录因子YY1潜在的结合位点,构建萤光素酶报告基因质粒,利用双萤光素酶报告基因系统检测ITGB6启动子片段的转录活性;利用染色质免疫沉淀技术检测在天然染色质条件下转录因子YY1与ITGB6启动子的结合情况;采用定点突变方法检测YY1结合位点对ITGB6启动子活性的影响;利用RT-PCR方法检测过表达转录因子YY1对口腔鳞癌细胞ITGB6 mRNA表达水平的影响。结果：ITGB6启动子-421~-150 nt区域存在多个转录因子YY1潜在的结合位点。在口腔鳞癌细胞的天然染色质中,转录因子YY1结合于ITGB6启动子-421~-150 nt区域;定点突变YY1潜在结合位点对口腔鳞癌细胞中ITGB6启动子活性无显著影响。另外,过表达的YY1对口腔鳞癌细胞ITGB6 mRNA的表达水平也无影响。结论:转录因子YY1在口腔鳞癌细胞中结合于ITGB6基因启动子-421~-150 nt区域,但对ITGB6基因的基础转录水平无影响。     

3,3'-二吲哚甲烷对过氧化氢诱导人角质形成细胞氧化应激的预防作用及其机制

目的:探究3,3'-二吲哚甲烷(DIM)对过氧化氢(H₂O₂)诱导人角质形成细胞(HaCaT)氧化应激作用的预防效应及可能机制。方法:体外培养HaCaT细胞,用H₂O₂建立氧化应激模型。采用CCK-8法检测不同浓度(1~20 μmol/L)DIM对HaCaT细胞生长的抑制作用;流式细胞术检测DIM作用前后细胞内活性氧自由基(ROS)含量的变化;Western blot检测不同浓度DIM(0、5、10 μmol/L)对HaCaT氧化应激相关蛋白核因子(NF-κB)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)磷酸化表达水平的影响。结果:成功建立了HaCaT氧化应激模型。CCK-8法研究结果显示1~10 μmol/L DIM对HaCaT细胞无明显毒性作用(P>0.05);流式细胞术检测结果表明10 μmol/L DIM预处理可有效预防由H₂O₂诱导的HaCaT内ROS产生(P<0.05);Western blot检测结果显示,随着DIM浓度的增加,HaCaT中p38-MAPK、JNK和NF-κB磷酸化蛋白表达水平均逐渐降低(P均<0.05)。结论:DIM预处理可减弱HaCaT中由H₂O₂引起的氧化应激,其机制可能是通过抑制ROS的产生及对NF-κB、MAPK家族等氧化应激相关蛋白表达的调控作用来实现的,提示DIM可作为预防或改善氧化应激型皮肤细胞损伤的一种有效药物。     

铁死亡信号介导抗肿瘤作用的细胞器调控机制研究进展

铁死亡是一种非凋亡性调节性细胞死亡（RCD），表现为多细胞器调节信号的变化。目前，已明确部分铁死亡上游执行机制，即不稳定铁池的产生和/或谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）的抑制或失活，和下游的脂质过氧化物产生和积累的触发机制；同时铁死亡相关信号分子可发生蛋白质翻译后修饰参与信号网络功能调控。功能上，铁死亡既参与外源物诱导的致癌作用，也可介导外源物对肿瘤细胞的选择性杀伤作用。本综述拟阐述铁死亡的相关信号通路，阐明不同细胞器参与铁死亡调控的分子机制，探讨外源化学物靶向铁死亡信号分子介导的抗肿瘤作用，为铁死亡依赖性致癌作用防制策略提供新的理论依据。     

可控药物释放输送系统研究进展

新型药物输送系统可增强药物体内稳定性、控制药物释放等提高药物治疗特异性,降低药物毒副作用.近年来,药物智能控释技术已取得重大进展,新兴治疗药物(如生物制剂)、给药方式需求(如口服的延长药物释放微型装置和可注射特殊医用材料)及保护敏感药物分子的先进载药系统等可有效提升疾病防治水平.基于纳米囊泡、病原体仿生载体和工程化改造细胞(如特异性靶向、延长循环时间和免疫逃逸)的可控释放载药体系具有良好的应用前景.本文综述了药物输送系统设计的指导性原则及其控释机制,系统阐述了注射性药物递送系统、口服药物递送系统及生物源仿生药物递送系统研究前沿和进展.     

基于网络药理学与生物信息学揭示冬凌草调控乳腺癌能量代谢的作用及分子机制

目的 基于网络药理学结合生物信息学、分子对接探究冬凌草调控乳腺癌能量代谢的作用及分子机制。方法 通过多个数据库结合文献查找冬凌草的有效成分,筛选已报道的冬凌草中具有抗肿瘤作用并符合类药五原则的活性成分;利用PubChem数据库、PharmMapper数据库收集冬凌草抗肿瘤活性成分的结构及其潜在靶点。从TCGA和GEO数据库获取乳腺癌样本转录组数据,通过差异表达基因分析及WGCNA挖掘乳腺癌相关靶点,并与冬凌草抗肿瘤活性成分预测靶点匹配映射,获得两者的共同靶点,之后进行GO和KEGG富集分析。使用STRING数据库对共同靶点构建PPI网络,通过Cytoscape软件对网络进行可视化,使用DEGREE和MCC 2种算法分别取PPI网络中排名前10的靶点,两者去重后与富集排名靠前的能量代谢相关通路和生物学过程中的靶点取交集,得到能量代谢相关的关键靶点。随后,通过UALCAN数据库分析能量代谢相关的关键靶点的表达量,利用TIMER数据库分析这些靶点与免疫浸润的关系。最后,将这些靶点与有预测关系的活性成分进行分子对接。结果 选取冬凌草中冬凌草甲素、冬凌草乙素、鲁山冬凌草丙素、β-蒎烯、D-柠檬烯、太白乌霉素A及信阳冬凌草素J共7个活性成分及其潜在靶点368个,与乳腺癌相关靶点映射得到共同靶点34个。GO和KEGG富集分析发现大部分排名靠前的功能/通路与糖、脂代谢相关,从这些功能/通路得到PCK1、ADH1C、AKR1C3、HSD11B1、MAOA、ALDH2、RBP4这7个能量代谢相关的关键靶点,这些靶点在乳腺癌中的mRNA、蛋白水平的表达量均低于正常组织,且均与肿瘤纯度呈负相关;此外,CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞等免疫细胞的浸润程度也会影响乳腺癌患者的预后。分子对接结果表明上述7个有效成分与其有预测关系的靶点有良好结合潜力。结论 冬凌草抗乳腺癌具有多成分、多靶点、多信号通路协同作用的特征,其可能通过调控乳腺癌的能量代谢实现清热解毒之功,从而发挥抗乳腺癌作用。     

泽泻醇提物对大鼠肾毒性及其分子机制的探究实验

泽泻醇提物长期喂养大鼠,探究其对大鼠的肾毒性作用,并研究其肾毒性的可能的分子机制。60只雌性大鼠随机分为空白组,雷公藤对照组,庆大霉素对照组,泽泻高、中、低剂量组,连续给药6个月。利用高效液相色谱仪(HPLC)对泽泻提取物成分进行分析,同时采用HE染色检测肾脏病理变化,通过Western blot法、免疫组织化学和q-PCR法检测Kim-1,clusterin,LCN2,osteopontin,ceruloplasmin和TIMP1蛋白和m RNA水平。HPLC解析出泽泻醇提物中的8个成分(环氧泽泻烯,泽泻醇F,泽泻醇A,24-乙酰泽泻醇F,泽泻醇A-24-醋酸酯,泽泻醇B,23-乙酰泽泻醇B和23-乙酰泽泻醇C)。HE染色结果显示,高、中剂量的大鼠肾脏间质炎性细胞浸润,肾小管上皮细胞水肿且形态发生变化。与空白组相比,雷公藤和庆大霉素对照组大鼠肾脏Kim-1,clusterin,LCN2,osteopontin和TIMP1蛋白和m RNA水平显著地提高,而ceruloplasmin蛋白和m RNA水平显著地降低;给予泽泻高、中剂量6个月后,大鼠肾脏Kim-1,clusterin,LCN2,osteopontin和TIMP1蛋白和m RNA水平也有显著地提高,而ceruloplasmin蛋白和m RNA水平显著地降低。长期大剂量服用泽泻醇提物可导致雌性大鼠产生肾毒性,其分子机制可能是通过调节Kim-1,ceruloplasmin,clusterin,LCN2,osteopontin和TIMP1等蛋白的表达来实现。     

RNA的N6-甲基腺嘌呤甲基化在肿瘤发生中作用的研究进展

RNA的N⁶-甲基腺嘌呤（m⁶A）甲基化是RNA修饰的最主要形式,参与m⁶A甲基化与去甲基化过程的酶分为3类：甲基转移酶,去甲基酶和m⁶A结合蛋白。这3类调控m⁶A的蛋白在RNA的加工代谢以及正常生理功能中发挥重要的调节作用,并且通过调节RNA的转录、剪接、加工、翻译和衰变等过程参与多种恶性肿瘤的发生和转移。近年来随着m⁶A检测技术的发展,m⁶A甲基化在恶性肿瘤病理进程中的作用研究逐渐成为热点。本文就有关m⁶A甲基化修饰影响肿瘤病程的表观遗传学机制进行综述,旨在为以m⁶A甲基化为靶点的肿瘤治疗策略提供新思路。     

亚健康状态的中医辨识探析※

本文基于中医学八纲辨证理论,并根据厦门大学医学院杨宗保教授多年的临床经验总结出人体15大亚健康状态类型,分别为：气虚、血虚、津亏、精虚、气滞、血瘀、痰湿、风寒、寒湿、虚寒、风热、脏热（包括肺热、肝火、心火、胃火、大肠火）、湿热（包括脾胃湿热、肝胆湿热、大肠湿热、膀胱湿热、湿热痹症）、虚热、过敏状态。