致死性侏儒症Ⅰ型高发突变发生机制浅析

致死性侏儒症(thanatophoric dysplasia,TD)是重型短肢畸形病中相对常见的致死性遗传性骨病,分为TD-Ⅰ和TD-Ⅱ 2型,它们都是由于FGFR3基因发生致死突变所致.TD-Ⅰ型存在多种致病性突变,其中以c.742C＞T/p.R248C突变最为常见.本病为常染色体显性遗传(autosomal dominant,AD),杂合突变即可致死,但为何表型、基因型正常的父母会生出带有p.R248C突变的患胎并且是纯合突变的死胎？如果是新生突变,又为何会接连数胎生出同样的患胎？p.R248C高发突变的机制是什么？本文重点围绕这些问题,从“FGFR3 (Fibroblast growth factor receptor 3)基因和FGFR3受体(Fibroblast growth factorreceptor 3)的结构和功能,TD-Ⅰ型p.R248C高发突变的发生机制,正常父母生出纯合致死突变的可能机制”几方面进行剖析,指出:①FGFR3基因及其受体蛋白结构和功能的特殊性是高发突变发生的物质基础;②位于IgⅡ和IgⅢ结构域连接区的氨基酸是极性很强的亲水氨基酸,很容易与带电离子结合而影响α螺旋结构,故易受外来理化因素的攻击、诱变而发生改变;③正常父母生出纯合致死突变,推测有两种可能:一种是夫妇一方的生殖腺已带有该高发突变,当胎儿从亲代遗传了一次突变后,只需在另一位点上再发生一次新生突变即可产生;另一种是夫妇双方的生殖腺都是该突变的嵌合体,当两者结合在一起,就有可能产生纯合突变.此外,还对未来发展趋势进行了展望.本文旨在探讨c.742C＞T/p.R248C高发突变和纯合突变发生的机制,进而为其今后的诊断和防治工作提供理论依据.     

miR-424对成釉细胞瘤生物学活性影响研究

 目的　研究miR-424在成釉细胞瘤（ameloblastoma，AB）中的表达情况及其对AB生物学活性的影响。方法　采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测AB和正常口腔黏膜（NOM）组织中miR-424的表达水平。将miR-424 mimics质粒、miR-424 negative control mimics质粒转染至人AB细胞系（AM-1）中，分别记为实验组和阴性对照组。采用EdU免疫荧光法、CCK-8法和划痕实验分别检测miR-424对AM-1细胞增殖能力、细胞活性和迁移能力的影响。结果　miR-424在AB组织中的相对表达量明显低于NOM组织，差异具有统计学意义（P <0.05）。miR-424能够显著降低AM-1细胞增殖能力，并能够影响AM-1的细胞活性（均P < 0.05）。此外，实验组与阴性对照组的划痕面积和宽度比较，差异具有统计学意义，且其差异随时间的延长而增大（均P < 0.05）。结论　miR-424能够显著降低AB的生物学活性，可能在AB中发挥抑癌基因作用。     

基于内质网自噬系统探究泽泻汤对高脂血症急性胰腺炎的防治作用

目的 研究泽泻汤对高脂血症急性胰腺炎（hyperlipidemia acute pancreatitis,HLAP）的防治作用及机制。方法 雄性C57BL/6J小鼠以高脂饮食喂养,ig泽泻汤干预8周后,ip雨蛙素（50 μg/kg）制备HLAP模型。采用试剂盒检测小鼠血清中三酰甘油（triglyceride,TG）、总胆固醇（total cholesterol,TC）水平及淀粉酶（amylase,AMY）、脂肪酶（lipase,LPS）、总超氧化物歧化酶（total superoxide dismutase,T-SOD）、过氧化氢酶（catalase,CAT）活性;采用油红O染色观察肝脏组织脂质蓄积情况,苏木素-伊红（HE）染色观察肝脏、胰腺组织病理学变化;采用Western blotting检测胰腺组织中血红素加氧酶-1（heme oxygenase-1,HO-1）、核因子E2相关基因（nuclear factor erythroid-2-related factor 2,Nrf2）、免疫球蛋白重链结合蛋白（binding immunoglobulin protein,BIP）、真核翻译起始因子2α（eukaryotic translation initiation factor 2α,eIF2α）、p-eIF2α、Bcl-2相互作用蛋白（Bcl-2 interacting coiled-coil protein-1,Beclin-1）、自噬蛋白5（autophagy-related protein 5,ATG5）、自噬蛋白12（autophagy-related protein 12,ATG12）、微管相关蛋白1轻链3-II/I（microtubule-associated protein light chain 3-II/I,LC3-II/I）及溶酶体相关膜蛋白1（lysosomal associated membrane protein 1,LAMP-1）表达。采用棕榈酸（200 mmol/L）和雨蛙素（10 nmol/L）处理胰腺腺泡AR42J细胞构建HLAP细胞模型,给予泽泻汤干预后,采用试剂盒检测细胞培养上清液中LPS、T-SOD活性;采用DCFH-DA荧光探针、线粒体膜电位（mitochondrial membrane potential,MMP）荧光探针检测细胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）及MMP水平;采用透射电镜观察细胞超微结构及自噬变化;采用Western blotting检测细胞中HO-1、Nrf2、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1（kelch-like ECH-associated protein 1,Keap1）、BIP、eIF2α、p-eIF2α、Beclin-1、ATG5、LC3-II/I和LAMP-1表达。结果 与模型组比较,泽泻汤能够降低小鼠血清中TC、TG水平及AMY、LPS活性（P＜0.05、0.01、0.001）,抑制肝脏组织中的脂滴蓄积,减轻肝脏及胰腺组织病理损伤,同时上调血清及胰腺腺泡细胞中SOD、CAT活性（P＜0.05、0.01）,下调ROS水平（P＜0.001）,上调胰腺组织及细胞中HO-1、Nrf2、LAMP1表达（P＜0.05、0.01、0.001）,下调Keap1、BIP、eIF2α、p-eIF2α、Beclin-1、ATG5、ATG12及LC3-II/I表达（P＜0.05、0.01、0.001）。结论 泽泻汤可以防治HLAP,其作用机制可能与抑制内质网应激诱导的过度自噬、恢复自噬通量有关。     

厦门市翔安区高碘饮用水源调查

厦门市翔安区位于福建东南沿海.该区新店镇洪前村于1986年发现水源性高碘甲状腺肿,是福建省迄今唯一的水源性高碘病区.为进一步了解该区饮用水水碘的情况,明确可能存在的水源性高碘病区,笔者于2005年6月进行了居民饮用水水碘的调查.     

蛋白激酶C介导转化生长因子β诱导人口腔鳞癌细胞整合素β6的表达

目的:研究蛋白激酶C(PKC)是否参与转化生长因子β(TGF-β)诱导的人口腔鳞癌细胞(SAS)整合素β6表达。方法:人口腔鳞癌细胞SAS 培养于含10%胎牛血清DMEM培养基中,经TGF-β诱导后,裂解细胞提取总RNA和蛋白质,采用实时荧光定量RT-PCR及蛋白印迹方法分别检测整合素β6 mRNA和蛋白表达情况;利用PKC阻断剂研究PKC对整合素β6表达的影响。结果:TGF-β诱导人口腔鳞癌SAS细胞整合素β6 mRNA及蛋白表达呈时间依赖性;广谱型PKC抑制剂RO-31-8220呈剂量依赖性阻断TGF-β诱导的SAS细胞 整合素β6 mRNA和蛋白表达,而Ca²⁺依赖型PKC抑制剂G6976则没有阻断作用。结论:非Ca²⁺依赖途径的PKC介导TGF-β诱导人口腔鳞癌细胞SAS细胞整合素β6表达。     

母胎界面微环境改变与早产

妊娠第37周前分娩的现象被称为早产。目前,全球每年约有1500万早产儿出生,其中100万早产儿在出生后的1个月内死亡。因此,早产作为一个全球性的问题,为社会带来了严重的负担。探索早产发生的机制,寻找有效的预防方法,是目前亟待解决的科学问题。文章围绕影响母胎界面微环境的3个主要因素即胎儿滋养层细胞、子宫蜕膜和母胎界面免疫细胞,详细阐述母胎界面微环境改变在早产发生中的作用机制。     

基于乳腺X线影像组学辅助诊断BI-RADS4和5类良性病变

目的 评价乳腺X线影像组学辅助诊断乳腺影像报告和数据系统(BI-RADS)4和5类良性病变的价值.方法 回顾性分析经病理证实的344例乳腺病变患者,包括194例良性病变、150例恶性病变;根据接受乳腺X线检查时间将前70％ 归为训练集(n=240)、后30％ 归为验证集(n=104).基于头足(CC)位和内外斜(MLO...     

伴CIC-DUX4融合基因的高级别未分化圆细胞肉瘤的研究进展

未分化圆细胞肉瘤是一组异质性肿瘤性病变,新近的研究显示重现性CIC-DUX4融合基因是该类肿瘤的一大特征。该类肿瘤常发生于年轻人的肢体软组织,具有较强的侵袭性。细针吸取（FNA）细胞涂片技术结合免疫组织化学染色是未分化圆细胞肉瘤进一步精准基因分型的重要筛查方法。本文对该肿瘤的临床特征、FNA细胞学形态特征、病理诊断和鉴别诊断,以及CIC基因对肿瘤的调控机制作一综述。     

利用光学相干断层扫描血管造影分析PM2.5对小鼠角膜上皮和角膜全层厚度的影响

目的 利用光学相干断层扫描血管造影（OCTA）分析PM2.5 对小鼠角膜上皮和角膜全层厚度的影响。 方法 随机选取健康BALB/c 小鼠（18 ～ 21 g,6 ～ 8 周龄,雄性）共32 只,采取随机数字表法分为实验组、对 照组两组,每组16 只,体重、周龄匹配。实验组采用5 mg/ml 的PM2.5 混悬液滴眼,对照组采用PBS 滴眼,均 为双眼,每天4 次。采用系统软件将角膜划分为17 个区域,并利用光学相干断层扫描血管造影术分别在干预前, 干预后第1、4、7、10 及14 天对两组小鼠角膜上皮和角膜全层厚度进行测量。结果 制作模型前、干预第1 天, 实验组与对照组小鼠角膜上皮和角膜全层厚度比较差异无统计学意义（P >0.05）,第4 天起,与对照组比较,实 验组小鼠角膜上皮下部的IT5、I5、IN5、IT6、I6 及IN6 区域增厚（P <0.05）,但角膜全层厚度无明显改变（P >0.05）。 第7 天起,与对照组比较,实验组小鼠角膜上皮所有区域均增厚（P <0.05）,角膜全层中央和下部C2、IT5、I5、 IN5、IT6、I6 及IN6 区域厚度延长（P <0.05）。第10 和14 天,与对照组比较,实验组小鼠角膜上皮和角膜全层 各个区域及平均厚度均增厚（P <0.05）。结论 PM2.5 能引起小鼠角膜上皮和角膜全层厚度改变,且随着干预 时间增加,角膜上皮下部各区最先增厚,其他区域随后增厚。角膜全层厚度随后也变厚,且为中央和下方各区 最先增厚,随后其他区域增厚。角膜全层增厚速度慢于角膜上皮增厚速度。     

键合β-环糊精琼脂凝胶微球分离纯化大豆苷元及其色谱机制研究

目的通过制备键合β-环糊精琼脂凝胶微球(AG-β-CD)作为分离介质,对大豆异黄酮粗品中大豆苷元进行高效分离纯化。方法利用琼脂为原料,通过乳化、交联并键合功能基团β-环糊精(β-CD)制备AG-β-CD;将其作为一种分离介质,通过考察流动相、洗脱体积流量和微球负载量3个方面,确定AG-β-CD分离纯化大豆苷元的工艺并进行验证,质谱和核磁共振鉴定其结构;通过与其他2种黄酮类物质表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)和葛根素在C18反相柱色谱保留行为比较,结合auto DOCK4.0进行分子模拟,以及流动相乙腈体积分数变化对3种黄酮类物质在AG-β-CD固定相上的保留时间的变化曲线证明其色谱机制。结果大豆异黄酮粗品中主要成分为大豆苷元(57.14%),AG-β-CD的负载量为1.33 mg/m L(大豆异黄酮粗品总量/柱体积),体积流量为2 BV/h时,通过20%乙醇洗脱2 BV、40%乙醇洗脱1.33 BV、70%乙醇洗脱6~7 BV,得到质量分数≥95%(平均质量分数96.98%)的大豆苷元,收率为97.86%。色谱机制实验表明AG-β-CD具有亲水和反相双重保留与分离作用。结论 AG-β-CD能够高效地分离纯化大豆苷元。