透骨消痛胶囊含药血清对软骨细胞Cyclin D1 mRNA表达的影响

目的:观察透骨消痛胶囊含药血清对软骨细胞CyclinD1 mRNA表达的影响,探讨透骨消痛胶囊治疗骨性关节炎的可能作用机制.方法:采用抽签法将16只12周龄雄性新西兰大白兔随机分为空白组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组4只.低剂量组按5 mL·kg-体质量以5 mg·mL-1透骨消痛胶囊溶液灌胃,中剂量组按5 mL·kg-体质量以10 mg·mL-1透骨消痛胶囊溶液灌胃,高剂量组按5 mL·kg-1体质量以20 mg·mL-1透骨消痛胶囊溶液灌胃,空白组按5 mL·kg-1体质量以生理盐水灌胃.每天灌胃2次,连续7d,最后1d连续2次灌胃,中间间隔2h.末次灌胃后3h提取各组实验兔含药血清低温保存备用.将6只4周龄雄性新西兰兔处死,取其膝关节软骨,置入盛有Ⅱ型胶原酶的培养皿中进行消化,建立软骨细胞体外培养体系,并采用甲苯胺蓝染色法鉴定细胞功能.将体外培养的第3代软骨细胞随机分为空白组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,并分别加入含空白血清、低剂量中药血清、中剂量中药血清、高剂量中药血清的DMEM培养液中继续培养72 h后,采用MTT法检测软骨细胞的增殖情况,采用RT - PCR法检测CyclinD1 mRNA的表达,并在透射电子显微镜下观察细胞形态.结果:Ⅱ型胶原酶消化法成功建立了软骨细胞的体外培养体系,甲苯胺蓝染色可见软骨细胞内呈紫红色异染颗粒.干预72 h后,各组软骨细胞光密度值比较,差异有统计学意义(F=6.209,P=0.004);中剂量组、高剂量组软骨细胞光密度值高于空白组(P=0.005,P=0.002);中剂量组、高剂量组软骨细胞光密度值高于低剂量组(P =0.034,P=0.011).各组软骨细胞CyclinD1 mRNA表达量比较,差异有统计学意义(F=8.262,P=0.001);中剂量组、高剂量组软骨细胞CyclinD1 mRNA表达量高于空白组(P=0.002,P=0.001);中剂量组、高剂量组软骨细胞CyclinD1 mRNA表达量高于低剂量组(P =0.012,P=0.004);中剂量组、高剂量组可见较多处于分裂期的细胞.结论:透骨消痛胶囊的含药血清能促进软骨细胞G1期正性调节因子CyclinD1 mRNA的表达,从而促进软骨细胞增殖,这可能是透骨消痛胶囊在临床上治疗骨性关节炎具有较好疗效的部分机理,而有关透骨消痛胶囊治疗骨性关节炎的具体作用机制还需作更进一步的深入研究,以便为临床应用提供理论依据.     

解毒消癥饮对BGC-823胃腺癌细胞线粒体膜电位与细胞凋亡的影响

[目的]探讨中药复方解毒消癥饮含药血清对胃腺癌细胞BGC-823增殖与凋亡的影响。[方法]低、中、高剂量（0.28g/ml,1.41g/ml,2.83g/ml）含药血清干预体外培养的胃腺癌细胞BGC-823,MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪分析细胞凋亡率、细胞周期及线粒体膜电位的变化。[结果]与对照组比较,随时间延长（24、48、72h）,含药血清组可以显著抑制胃腺癌细胞的生长,且呈剂量依赖性（r=0.951,P〈0.05）;含药血清与细胞共培养24h后,低、中、高剂量组的细胞凋亡率分别为2.392%±0.188%,3.960%±0.568%,6.350%±0.065%,较对照组1.357%±0.335%增加;细胞周期显示出典型的S期阻滞;含药血清低、中、高剂量组线粒体膜电位下降的细胞百分率为5.095%±0.971%、8.593%±0.944%、16.217%±2.358%,较对照组1.610%±1.067%明显降低。[结论]解毒消癥饮能抑制胃腺癌细胞生长并促其凋亡。     

精制保和颗粒治疗溃疡性结肠炎的机制研究

目的研究精制保和颗粒(RBG)对溃疡性结肠炎(UC)的影响及其潜在机制。方法采用随机数字表法将24只C57BL/6小鼠分为对照组、RBG组、DSS组和DSS+RBG组,每组各6只。采用饮用2%葡聚糖硫酸钠(DSS)的方法建立UC小鼠模型。RBG组自由饮用双蒸水的同时灌胃0.2 m L RBG(药物浓度为1.5 g/kg)11 d,每日1次;DSS组自由饮用2%DSS连续7 d后换回自由饮用双蒸水至11 d,同时灌胃等体积的双蒸水11 d,每日1次;DSS+RBG组自由饮用2%DSS连续7 d后换回自由饮用双蒸水至11 d,同时灌胃0.2 mL RBG 11 d,每日1次;对照组自由饮用双蒸水同时灌胃等体积的双蒸水11 d,每日1次。每日测量小鼠的体质量和便血情况,并每2天计算疾病活动指数(DAI)评分;干预后取结肠,测量结肠长度和体质量,并采用HE染色和电子光学显微镜观察结肠组织形态病理变化;免疫组化染色检测小鼠结肠组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的表达水平。结果与对照组比较,DSS组小鼠的体质量明显减轻,DAI评分明显增加,结肠长度明显缩短,结肠体质量...     

青风藤治疗骨性关节炎药效物质基础多靶导向作用的计算机模拟研究

目的探讨青风藤治疗骨性关节炎(osteoarthritis,OA)的药效物质基础,并对青风藤多靶导向作用做出药效学阐释。方法 (1)构建青风藤化学成分分子数据库,应用分子对接探讨其与OA重要靶标的相互作用;(2)构建青风藤所含分子配体-靶作用网络及DrugBank药物库中有关OA的药物分子配体-靶作用网络,分析其网络特征,阐明青风藤治疗OA作用机制和特点。结果青风藤中共有14个化学成分分子与2个及2个以上靶点相互作用,其中6个化学成分分子对4个及4个以上靶点有作用效应。青风藤分子配体-靶作用网络与药物分子配体-靶作用网络的轮廓和特征相似。结论青风藤存在多成分、多靶导向效应,且部分成分存在多靶导向效应,为青风藤治疗OA的药效学分子机制提供了解释,同时也为寻找治疗OA的新型药物提供一定的参考和借鉴。     

透骨消痛胶囊对凋亡软骨细胞Rac1和Cdc42表达的影响

背景：透骨消痛胶囊治疗早、中期骨性关节炎有较好疗效,但作用机制尚未完全阐明。小GTP酶Rho能够抑制软骨细胞肥大分化,促进软骨细胞的凋亡。
　　目的：观察透骨消痛胶囊对体外培养凋亡大鼠关节软骨细胞Rac1和Cdc42的影响,并初步探讨其防治骨性关节炎的作用机制。
　　方法：采用4周龄SD大鼠膝关节软骨建立稳定的软骨细胞体外培养体系,采用甲苯胺蓝染色法对第3代软骨细胞进行鉴定。用20μg/L的肿瘤坏死因子α诱导体外培养软骨细胞的凋亡,诱导成功后,给予透骨消痛胶囊(500,100,20 mg/L)孵育24 h后,分别用MTT法检测各组软骨细胞的存活率,用流式细胞仪检测各组软骨细胞的线粒体膜电位情况,Western Blot检测各组软骨细胞Rac1,Cdc42,Bcl-2及Bax蛋白表达。结果与结论：透骨消痛胶囊能够减少肿瘤坏死因子α所致的软骨细胞凋亡,提高线粒体膜电位,提高细胞的存活率,同时能够下调Rac1,Cdc42,Bax蛋白的表达,上调Bcl-2蛋白表达,差异均有显著性意义(P<0.05)。提示透骨消痛胶囊可能通过下调Rac1,Cdc42和 Bax蛋白表达,增加凋亡抑制基因Bcl-2蛋白表达,从而抑制软骨细胞的凋亡,而起到治疗骨性关节炎的疗效。     

心水通胶囊水提物对慢性心衰大鼠NT-proBNP、cTNⅠ、凝血指标的影响

目的 研究心水通胶囊水提物（XST）对慢性心衰大鼠N-端脑利钠肽前体（NT-proBNP）、心肌肌钙蛋白（cTNⅠ）、心功能及凝血指标的影响。方法 阿霉素构建慢性心衰大鼠模型,并用不同浓度心水通胶囊水提物干预心衰大鼠。在给药前、给药15d、给药30d三个阶段分别检测每组大鼠心功能。给药30 d后,检测血清N-端脑利钠肽前体、心肌肌钙蛋白、凝血指标浓度,HE染色观察心肌细胞病理变化。结果 与模型组比较,心水通胶囊水提物中、高剂量组LVIDs和LVIDd明显降低,射血分数（LVEF）明显升高（P<0.01）,血清N-端脑利钠肽前体、心肌肌钙蛋白和纤维蛋白原（FIB）浓度显著降低（P<0.01）,凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）和凝血酶时间（TT）水平显著升高（P<0.01）,且高剂量组给药30 d后LVIDs和LVIDd降低最显著,射血分数升高最显著（P<0.05）;同时心水通胶囊水提物能改善心衰大鼠心肌细胞的病理性肥大、变性和坏死。结论 心水通胶囊水提物能剂量依赖性降低心衰大鼠血清N-端脑利钠肽前体、心肌肌钙蛋白浓度,改善高凝血和心功能,提高心衰大鼠的存活率。     

透骨消痛胶囊亚急性毒性试验

目的考察透骨消痛胶囊用药的安全性。方法 80只SD大鼠分4组,分别灌胃透骨消痛胶囊相当于成人用量的80、40、20倍和等体积生理盐水,4周后取一半大鼠进行血常规、生化、病理组织检测;免疫组化法观察细胞色素P450三种亚型在肝脏的表达;透射电镜观察肝、肾细胞超微结构。另一半大鼠停药1周,观察延迟毒性,指标同前。结果 1给药及停药后,大鼠一般状况、体重、血常规、生化指标及细胞色素P450三种亚型的表达与正常对照组无显著性差异;2病理组织、超微结构观察结果显示药物组与正常对照组无明显差异。结论透骨消痛胶囊安全性较好。     

透骨消痛胶囊促进成骨细胞的增殖和分化

背景：透骨消痛胶囊是福建中医药大学治疗骨关节炎的临床验方,以往的研究多集中于其对软骨的作用。目的：观察透骨消痛胶囊对成骨细胞增殖、分化及骨重塑相关因子表达的影响。方法：以透骨消痛胶囊干预大鼠成骨细胞 ROS17/2.8,分空白对照组和各浓度透骨消痛胶囊组,MTT 法测定细胞增殖,比色法检测成骨细胞分化的生物标志物碱性磷酸酶活性,ELISA 法检测骨钙素,茜素红染色观察骨矿化结节,实时定量 PCR 和 ELISA 法检测骨重塑相关因子骨保护素/核因子κB受体活化因子配体的表达。结果与结论：与对照组相比,质量浓度为 0.25-2 g/L 透骨消痛胶囊能显著促进 ROS17/2.8 细胞增殖（P 〈 0.05）,上调碱性磷酸酶活性（P 〈 0.05）、骨钙素的表达水平（P 〈 0.05）和矿化结节面积（P 〈 0.05）,增加骨保护素/核因子κB受体活化因子配体的比例（P 〈 0.05）。提示透骨消痛胶囊防治骨关节炎的作用机制可能与其促进成骨细胞的增殖、分化以及调节骨重塑平衡的作用有关。     

中医药对肿瘤化疗药物增效减毒作用的研究进展

肿瘤化疗药物在临床应用中越来越多,并且化疗药物所引起的毒副作用也越来越不容忽视。中医药作为辅助用药与化疗药联合应用在治疗肿瘤方面具有独特的优势,其不但能够缓解化疗产生的毒副反应,还能提高化疗的疗效,改善患者的生存质量。因此本文将围绕中医药的增敏增效作用、中医药逆转多药耐药、中医药增强机体的免疫功能以及中医药减轻化疗药物对人体正常组织器官的损伤几个方面来阐述中医药对肿瘤化疗药物的增效减毒作用。     

八宝丹抑制TNF-α诱导C2C12成肌细胞Atrogin-1表达的研究

目的 研究八宝丹（BBD）对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的C2C12成肌细胞中核因子κB(NF-κB)通路及下游通路UPS系统中萎缩相关基因1(Atrogin-1)的作用。方法(1)筛选BBD干预浓度实验：取对数生长期C2C12成肌细胞分别予0、0.125、0.25、0.5、0.75、1 mg/mL不同浓度BBD干预48 h,采用MTT法检测细胞活力;(2)筛选TNF-α刺激细胞的浓度和时间实验：取对数生长期C2C12成肌细胞,分别予0、1、10、50 ng/mL TNF-α蛋白液刺激C2C12成肌细胞,Western blot法检测p-P65、Atrogin-1蛋白表达以筛选出TNF-α刺激细胞的最佳浓度;再根据TNF-α刺激细胞的最佳浓度干预C2C12成肌细胞0 min、8 min、15 min、30 min、1 h、4 h,Western blot法检测p-P65、Atrogin-1蛋白筛选出TNF-α刺激细胞的最佳时间;(3)BBD干预实验：将C2C12成肌细胞随机分为空白对照组、药物对照组、模型组、八宝丹组,药物对照组和八宝丹组分别加入BBD预处理2 h,再根据筛选的T...