部分阴道封闭术治疗老年重度盆腔器官脱垂16例临床分析

目的 探讨部分阴道封闭术治疗老年重度盆腔脏器脱垂(POP)的疗效及安全性.方法 回顾性分析南京市第一医院2012年1月至2014年7月因重度盆腔脏器脱垂行部分阴道封闭术治疗的16例老年患者病例资料,记录围手术期参数和手术并发症,评价手术的主客观效果.结果 术后16例患者阴道肿物脱出症状完全消失,排尿及排便症状较术前明显改善,新发压力性尿失禁1例(6.2％),术后随访2～30个月,客观治愈率100％,患者满意率100％.结论 部分阴道封闭术对于不需要维持阴道性交功能的老年重度POP患者是一种的安全、有效的手术方法.     

冠心病患者内皮素水平的变化及其与冠脉病变的关系

目的：探讨冠心病患者血浆内皮素（ET）水平变化与冠状动脉病变的关系.方法：选择2012年12月至2013年12月在我院心内科住院确诊的冠心病患者130例,其中稳定型心绞痛（SAP）、不稳定型心绞痛（UAP）各40例,非ST段抬高型心肌梗死（NSTEMI）、ST段抬高型心肌梗死（STEMI）各25例;多支血管病变58例,单支病变72例.冠状动脉造影正常者50名为非冠心病正常对照组.检测各组ET浓度并进行比较分析.结果：（1）冠心病各组血浆ET水平均显著高于非冠心病对照组（P均＜0.01）;STEMI组、NSTEMI组血浆ET水平显著高于UAP组和SAP组[（95.6±14.7） pg/ml、（89.6±11.2） pg/ml比（67.2±8.5） pg/ml比（35.7±5.8） pg/m门,且UAP组显著高于SAP组（P均＜0.01）,STEMI组和NSTEMI两组间比较无显著差异（P＞0.05）;（2）冠心病组中多支血管病变组血浆ET水平显著高于单支血管病变组[（81.3±12.6） pg/ml比（64.5±10.3） pg/ml],P＜0.01.结论：冠心病患者血内皮素水平显著升高,其检测对于观察病情、判断预后有重要临床意义.     

非编码 RNA GlmY 对伤寒沙门菌生物膜形成的影响

目的: 探究非编码 RNA GlmY 对伤寒沙门菌生物膜形成的影响及其分子机制。方法: 用自杀质粒pGMB151介导的同源重组方法,制备 glmY 缺陷株;用96孔微量板结晶紫染色法检测各菌株生物膜形成情况;通过qRT PCR分析glmY 缺陷株及野生株中生物膜形成相关基因的mRNA表达水平。结果： 成功制备glmY缺陷株;细菌生物膜形成实验表明,与野生株相比,glmY缺陷株生物膜形成能力明显下降;qRT PCR分析结果显示,GlmY缺失后卷曲菌毛合成相关基因csgD和csgA的mRNA表达水平明显下调。结论： 伤寒沙门菌非编码 RNA GlmY可通过上调csgD和csgA的表达促进卷曲菌毛合成,进而促进生物膜的形成。     

1型糖尿病的非胰岛素辅助降糖治疗

1型糖尿病（T1DM）是一种自身免疫介导的以胰岛素分泌减少或胰岛素绝对缺乏为特征的疾病,胰岛素治疗是 其主要的治疗方式。胰岛素治疗存在着增加体重和低血糖风险的缺点。与此同时,胰岛素治疗不能延缓或阻止胰岛 功能的进行性破坏,因此T1DM患者病程中晚期多出现脆性糖尿病。文章总结了近些年有关T1DM非胰岛素辅助治 疗的最新研究进展,详细阐述了口服降糖药、注射类药物、免疫治疗等作为胰岛素的辅助治疗带来的新作用,为改善 T1DM患者生活质量带来新思路与新展望。     

HEV保护性基因工程抗体的制备及功能研究

目的：制备抗戊型肝炎病毒（hepatitis E virus,HEV）的人鼠嵌合基因工程抗体并研究其中和保护作用及特性。方法：将已获得的抗HEV鼠源单克隆抗体基因序列进行优化,设计人鼠嵌合的工程化抗体基因序列,将其克隆入真核表达载体;表达载体共转染293F细胞进行表达优化,高效制备基因工程化抗体;通过酶联免疫反应（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）、免疫荧光及HEV细胞感染模型,研究工程化抗体的结合能力及中和活性。结果：成功构建基因工程化人鼠嵌合HEV保护性抗体表达载体,在293F表达系统中实现高效表达。抗体表达产率达30 mg/L,亲和力为1.202×10-8 mol/L。免疫荧光检测结果显示抗体能够灵敏、特异地与已感染HEV的 Kernow细胞结合,实时荧光定量PCR检测结果显示抗体可保护易感的C3A细胞不被HEV感染。结论：基因工程化抗体抗体具有高效的HEV结合能力及中和作用,能有效阻断HEV感染,并实现低成本高效表达。     

NF⁃κB p65调控IRF⁃8基因启动子活性及其启动子结合元件的初步鉴定

目的：探讨大鼠核因子?κB（nuclear factor?κB,NF?κB）p65亚基在细胞内过表达和其活性变化对干扰素调节因子?8（interferon regulatory factor?8,IRF?8）基因启动的影响,并初步筛查IRF?8启动子上可能的p65结合元件。方法：采用聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）技术扩增大鼠p65基因蛋白编码区（complete sequence coding,CDS）序列,将其插入到空载pIRES2?EGFP质粒中,构建大鼠野生型（wild type,WT）p65过表达质粒（pIRES2?p65 WT）。在此基础上,将p65第535位丝氨酸（serine,S）突变为天冬氨酸（aspartic,D）或丙氨酸（alanine,A）,分别构建p65持续活化突变型质粒（pIRES2?p65 S535D）和p65显性负性突变型质粒（pIRES2?p65 S535A）。之后应用生物信息学软件预测IRF?8基因启动子区p65的结合元件,并据此构建IRF?8启动子全长（full?length,FL）和3个截短的荧光素酶报告质粒,即pGL3?IRF?8?FL（-1 892 ~ +174 nt）、pGL3?IRF?8?1（-1 360 ~ +174 nt）、pGL3?IRF?8?2（-752 ~ +174 nt）和pGL3?IRF?8?3（-68 ~ +174 nt）。将上述质粒行不同组合共转染人胚肾293T（human embryonic kidney 293T,HEK?293T）细胞,Western blot和荧光素酶实验分别检查p65的表达和IRF?8的启动子活性,并分析IRF?8启动子区可能的p65结合元件。结果：菌液PCR及测序证实上述质粒构建成功。分别将pIRES2?p65 WT、pIRES2?p65 S535D、pIRES2?p65 S535A和pGL3?IRF?8?FL共转染HEK?293T,发现过表达pIRES2?p65 WT或pIRES2?p65 S535D均可明显增加IRF?8启动子活性,且以pIRES2?p65 S535D更为显著;而过表达pIRES2?p65 S535A后,IRF?8启动子活性无明显变化。将pGL3?IRF?8?FL、pGL3?IRF?8?1~3和pIRES2?p65 S535D共转染HEK?293T后发现,pGL3?IRF?8?3的启动子活性显著低于pGL3?IRF?8?FL、pGL3?IRF?8?1和pGL3?IRF?8?2,提示大鼠IRF?8启动子-752~68 nt区域可能存在p65结合元件。结论：在HEK?293T细胞内过表达野生型或持续活化突变型p65可显著促进IRF?8基因的启动,且p65与IRF?8启动子的结合元件可能位于-752~-68 nt部位。     

振动反应成像技术在呼吸系统疾病的临床应用进展

肺部呼吸成像诊断系统(Vibration Response Imaging System,VRIxpTM)是一种全新的、利用振动反应成像(Vibration Response Imaging,VRI)技术显示肺部信息的设备.VRIxpTM 通过低真空传感器吸附在受检者背部,记录12S呼吸周期产生的振动能量,滤除胸部运动和心音所产生的干扰带宽,将采集的模拟信号转换成灰阶方式的数字信号,以71帧的动态图像的形式表现出来.VRIxpTM图像可从振动能量曲线、动态能量图像、最大振动能量图像(MEF,Max energy frame)、肺部定量数值(QLD,Quantitative lung data)、干湿哕音和左右肺EVP曲线(Envelope of Acoustic Signal)等方面进行分析.它无侵袭性、无辐射,且操作简单容易掌握.目前,国内外关于VRIxpTM的临床研究在呼吸领域的诸多疾病中显示了良好的应用前景,研究结果综述如下.     

人克拉拉细胞蛋白与慢性阻塞性肺病

世界卫生组织资料显示,慢性阻塞性肺疾病( chronic ob-structive pulmonary disease,COPD)的死亡率居所有死因的第四位,且有逐年增加的趋势[1].目前COPD诊断金标准是FEVl,它反映了疾病的特征,可以作为疾病严重性的评估.但是同样也有很多证据表明,这一描述并不是非常准确.如:一个45岁COPD患者,他的FEV1为55％,和一个85岁患者,他的FEV1为45％,按照GOLD严重程度分级标准,前者为COPDⅡ级,后者为Ⅲ级,似乎后者较前者严重.但是如果考虑到年龄因素,我们可以看出,前者的肺功能损伤明显高于后者[2].同样我们也很容易理解,疾病的严重性和疾病的活动性并不是同样的概念.而且,FEV1％作为疾病的特征描述,不能反映COPD药物治疗的效果,极大的影响了新药研究.现在临床迫切需要寻找一种生物标志物,这种标志物可以反映疾病的异质性、严重程度、活动性,能够预测疾病的进展,可以和药物的治疗效果相匹配.